家庭教育对痴呆照料者精神困扰与家庭负担的影响

目的探讨家庭教育对老年痴呆照料者精神困扰及家庭负担的影响.方法对50例老年痴呆照料者通过集体或个别教育,应用老年痴呆照料者困扰量表(NPI)和家庭负担量表(FIS)评价与分析.结果家庭教育后老年痴呆照料者困扰度明显下降;患者给家庭造成的各种负担总分也明显下降,与教育前相比差异均有显著意义.结论家庭干预能促进老年痴呆照料者的心理健康水平,减轻其精神困扰,并且能减轻老年痴呆患者的家庭负担.     

积雪草总苷对环磷酰胺致小鼠免疫功能低下的影响

目的 探讨积雪草总苷（TCA）对环磷酰胺（CTX）致小鼠免疫功能低下的影响。方法采用一次性腹腔注射CTX 100mg／kg制造小鼠免疫损伤模型，同时应用TCA24、12、6mg／kg 3个剂量灌胃10d进行预防性治疗，观察其对小鼠胸腺指数、脾脏指数、巨噬细胞吞噬百分率、血清溶血素水平等指标的影响。结果 TCA高剂量（24mg／kg）、中（12mg／kg）剂量对小鼠胸腺指数、吞噬百分率和血清溶血素水平有明显的增强作用，同时TCA高剂量对小鼠脾脏指数也有一定的保护作用。结论TCA对CTX致小鼠免疫功能低下有一定的预防作用。     

成人白血病患者微量元素硒的初步研究

本文测定22例成人急性白血病(急白)、5例急白完全缓解(CR)、20例慢性粒细胞白血病(慢粒)、7例慢粒CR患者及10例健康对照者的血清硒值,结果提示急白与慢粒,急白与急白CR及急白与对照组之间存在显著差异(P<0.05)。而慢粒、慢粒CR及对照组之间无差异(P>0.05)。作者认为急白与低硒状态有一定关系。     

抗人CD40人-鼠嵌合抗体在CHO细胞中的表达及其功能研究

目的:实现抗人CD40的人-鼠嵌合抗体(ch-5C11)在的CHO细胞中的稳定表达并对其生物学活性进行初步的研究。方法:pIRES/hu5C11嵌合抗体重组表达质粒用脂质体法转染CHO细胞,采用RT-PCR对CHO细胞进行基因水平鉴定,以流式细胞术(FCM)和Western blot对表达上清中ch-5C11人免疫球蛋白Fc段和κ链成分进行检测,利用Protein G亲和层析和Lowry法进行纯化和定量,MTT实验检测表达ch-5C11对Daudi细胞增殖的抑制效应。结果:获得稳定分泌目的蛋白的CHO稳定株,RT-PCR结果表明目的基因成功整合在CHO稳定株中,FCM和Western blot结果表明稳定株上清中含有抗人CD40抗体,且含人免疫球蛋白Fc段和κ链;Lowry法定量ch-5C11浓度为0.535mg/L,并经SDS-PAGE蛋白电泳鉴定纯度良好;ch-5C11能抑制Daudi细胞增殖。结论:获得了持续分泌ch-5C11的CHO稳定株,功能学研究显示ch-5C11能抑制B细胞淋巴瘤细胞株体外增殖。     

鼠抗人OX40功能性单克隆抗体的研制及其生物学特性的鉴定

目的：研制功能性鼠抗人OX40单克隆抗体。方法：以转人OX40的转基因细胞L929-OX40为免疫原，常规免疫6—8周龄的雌性BALB／c小鼠；采用B淋巴细胞融合技术，将免疫小鼠脾脏细胞与SP2／0融合，以L929-OX40转基因细胞及PHA活化的T细胞为抗体筛选阳性细胞，经免疫荧光标记分析对杂交瘤进行反复筛选和多次的克隆化培养；采用快速定性试纸法及竞争抑制结合试验分析了该单抗的亚类及抗原识别位点；采用MTT法分析单抗在体外对T细胞的促增殖效应以及ELISA分析活化T细胞分泌的细胞因子。结果：获得1株持续、稳定分泌鼠抗人OX40单克隆抗体的杂交瘤细胞株(命名为7E11)，该单抗能特异性地识别人OX40分子和介导有效的共刺激信号，体外促进活化的T细胞增殖和细胞因子的分泌。结论：成功研制成一株能分泌功能性鼠抗人OX40单克隆抗体的杂交瘤，该抗体特异性地识别人OX40分子并具有在体外协同刺激T细胞的作用。     

激发型CD28单抗直接激发的T细胞及其表型

1.用羊抗鼠IgG(20μg/ml)包被96孔细胞培养板,再加入游离的激发型CD28单抗(终浓度为5 μg/ml);2.用激发型CD28单抗(10 μg/ml)直接包被96孔细胞培养板,然后分别加入10~5个/孔经E-花结实验获取的人外周血T细胞(PBTC),其中CD3+T>95％。逐日观察细胞的生长状态并绘制生长曲线,用3H-TdR掺入法分析PBTC的增殖效应,用FITC标记的单抗经流式细胞仪(FCM)分析细胞CD3、CD4、CD8、CTLA-4、4-1BB及OX40的表达。逐日细胞计数的结果表明,经羊抗鼠IgG包被后加入游离激发型CD28单抗或直接用激发型CD28单抗包被,均能引发PBTC的活化与增殖效应,激发3 d时的刺激指数(SI)大于9,细胞CD3、CD4、CD8、CTLA-4、4-1BB及OX40的阳性表达率(x±s,％)分别为98.6±0.2、74.4±3.1、22.5±2.0、2.1±0.4、18.4±2.2、35.2±3.5。与XGB7(作为APC)刺激的T细胞相比,经CD28单抗直接激发的T细胞,CD4+/CD8+T细胞的比值及OX40+T细胞的百分率升高(P<0.01),但不表达负性调节分子CTLA-4。     

一株抗人BLys单克隆抗体的制备及其生物学功能研究

研究以稳定高表达BLys的基因转染细胞L-BLys为免疫原,常规免疫BALB/c小鼠,采用B淋巴细胞杂交瘤技术进行细胞融合,L-BLys细胞和天然表达BLys的HL60细胞为抗体筛选阳性细胞株,经免疫荧光标记分析反复筛选和以有限稀释法反复克隆化培养。将获得的克隆4F7培养细胞注射入经致敏的小鼠体内,-抽取的腹水经Protein G亲和层析柱纯化。将纯化所得的抗体作用于经BLys分子刺激的扁桃体B细胞,3H-TdR检测细胞的增殖效率。结果获得1株持续、稳定分泌鼠抗人BLys单克隆抗体的杂交瘤细胞株。该细胞株所分泌的抗体能阻断膜型和可溶性BLys分子对扁桃体B细胞的促增殖作用。对这株单克隆抗体生物学功能的研究表明,这株单抗能特异性识别人BLys分子及阻断膜型和可溶性BLys发挥生物学活性。     

一种显著提高小鼠生产单抗腹水产量的新方法

一种显著提高小鼠生产单抗腹水产量的新方法邱玉华，张学光，谢炜，朱学东（苏州医学院免疫研究室苏州２１５Ｑ０７）本文在常规致敏的基础上，将不完全佐剂（ＩＦＡ）与降植烷（ｐｒｉｓｔａｎｅ）联合应用进行再次致敏，以寻找一种能获得高产量单抗腹水的新方法，并对其...     

部分肿瘤、SLE和再障病人及正常人血桨IL-6、sIL-6Rα和gp130水平的检测

IL-6是机体应激和防御的重要介质.它参与了各种自身免疫性疾病的发生、发展,是介导急、慢性炎症、休克和移植排斥的关键性病理生理因子,同时也是一些恶性肿瘤的生长促进因子.sIL-6Rα能以膜型受体同样的亲和力与IL-6结合.形成IL-6/sIL-6Rα复合物,活化模型sgp130的信号传导.因此,sIL-6Rα具有增强IL-6生物学功能的特性.有关sgp130的检测,目前国内外尚未见详细报导,其生物学功能至今尚未明了.本研究利用本室研制sgp130ELISA检测试剂盒和Immunoteeh公司提供的IL-6、sIL-6RαELISA检测试剂盒对部分肺癌、肝癌、白血病、SLF及再生障碍性贫血门诊病人和部分正常人血浆IL-6、sIL-6Rα以及sgp130水平进行观察和比较.同时选用一部分白血病和再障病人对以上三项指标进行治疗前后的动态观察.结果显示:有50%肺癌、35%肝癌、     

抗人CD86单链抗体的基因克隆、表达及结合活性分析

目的 构建并在CHO细胞中表达抗人CD86单链抗体(CD86-scFv),研究该抗体与抗原的结合特性及介导的生物学功能.方法 从分泌鼠源CD86抗体的杂交瘤细胞中克隆出VH和VL基因,构建含有前导肽L-VH-Linker-VL抗体编码基因的表达载体并转染CHO细胞.经筛选高分泌株并扩大培养后收集上清进行纯化.流式细胞术分析CD86-scFv对不同细胞膜型CD86分子的识别及与鼠源亲本抗体1D1的竞争抑制效应.MTT法分析CD86-scFv与Raji细胞表达的CD86结合后对细胞生长的影响.结果 获得了稳定表达抗人CD86-scFv的CHO细胞株及相应抗体.CD86-scFv与CD86基因转染细胞株L929-CD86、天然表达CD86分子的人B系淋巴瘤细胞Raji和Daudi细胞的阳性结合率分别为67.0％、72.3％和80.5％.CD86-scFv对鼠源亲本抗体1D1具有竞争结合能力,将CD86-scFv(终浓度20μg/mL)加入Raji细胞共同培养72 h时的细胞生长抑制率为28.3％.结论 成功构建了稳定分泌抗人CD86-scFv的CHO细胞株(命名为SA-IV).该抗体能够识别CD86分子并具有良好的生物学活性.