丝氨酸羟甲基转移酶2在小鼠肝再生过程中的变化规律及作用

目的 探索丝氨酸羟甲基转移酶2(serine hydroxymethyl transferase 2,SHMT2)在小鼠肝再生过程中的表达规律,以及其对小鼠肝再生是否有促进作用.方法 SPF级C57BL/6小鼠120只分为肝切除组(2/3 PH)、假手术组(SHAM)、腺病毒干扰组(siSHMT2)及注射生理盐水对照组(Control),每组30只;肝切除组下设1、3、5、7、9d5个时相点,每个时相点6只.小鼠肝切除之后分别取1、3、5、7、9d的肝脏组织及血清,采用qPCR、Western blot和免疫组化检测SHMT2及其下游分子甘氨酸脱氢酶(glycine dehydrogenase,GLDC)的变化规律、血清中丙氨酸转氨酶(alanine transaminase,ALT)和谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)的浓度.取注射腺病毒干扰SHMT2第5天的肝脏组织,通过Westernblot和观察荧光强度,确定转染效果,并检测血浆中ALT和AST水平,免疫组化检测增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA).结果 SHMT2及其下游分子GLDC在小鼠肝再生的后第5、7天表达最高,qPCR检测结果显示,SHMT2第5天的表达量是第1天的1.63倍(P＜0.05).在干扰SHMT2之后,小鼠第5天再生肝脏的质量由(0.79±0.13)g降低至(0.63 ±0.ll)g(P ＜0.05),再生度由(36.37±2.21)％降低至(31.33±1.92)％,肝指数由(3.76±0.44)％降低至(3.13±0.29)％,并且肝功能指标ALT由(70.00±9.52) U/L升高至(154.15±16.49) U/L,AST由(140.09±32.85) U/L升高至(403.41±68.63) U/L(P＜0.05),PCNA阳性率从(53.6±2.3)％降低至(39.0±3.2)％(P＜0.05).结论 SHMT2在肝脏再生的后期高表达,促进残肝的再生,其机制可能与增强肝脏对缺血、缺氧的耐受,提高三磷酸腺苷水平有关.     

阻断Kupffer细胞TIM-4诱导iTreg细胞的产生影响小鼠肝移植免疫耐受

目的 探讨阻断Kupffer细胞(Kupffer cells,KCs)T细胞免疫球蛋白黏蛋白4(T-cell immunoglobulin and mucin-domain-containing molecule 4,TIM-4)诱导小鼠原位肝移植术后iTreg细胞的产生及其相关机制.方法 建立小鼠原位肝移植急性排斥反应模型,分为sham组、control mAb组、TIM-4 mAb组.流式细胞仪检测KCs活化,Western blot检测肝脏TIM-4表达,TUNEL检测肝细胞凋亡指数(apoptotic index,AI).提取KCs,激光共聚焦检测KCs TIM-4表达,将KCs和提取的初始CD4+T细胞进行共培养,激光共聚焦检测Kupffer细胞TIM-4表达,分为control组、control mAb组以及TIM-4 mAb组;CFSE检测CD4+T细胞增殖,流式细胞仪检测CD4+ CD25+ Foxp3+T细胞,ELISA检测IL-4、IL-6、IL-13水平,Western blot检测STAT6表达.建立小鼠移植模型,分为3组:iTreg组移植模型注入iTreg细胞(预先用TIM-4 mAb处理的TIM-4+ KCs与初始CD4+T细胞共培养所诱导),sham组和单纯肝移植组(LT)注入相应的PBS作为对照,检测各组AST、ALT、TBIL水平,HE染色评价肝组织排斥活动指数(rejective activity index,RAI),观察小鼠生存率.结果 肝移植术后24、48、72 h KCs的活化分别为15.9％、21.6％、28.3％,术后1、3、7 dTIM-4蛋白表达水平明显高于sham组(P＜0.05);control mAb组AI值(29.23 ±2.56)明显高于sham组和TIM-4 mAb组[(0.40±0.49),(11.04 ±2.28),P＜0.05].KCs与CD4+T细胞共培养后,control、control mAb以及TIM-4 mAb组CD4+T细胞的增殖率分另别为32.5％、31.6％、17.2％,CD4+ CD25+ Foxp3+T细胞分化分别为12.4％、13.9％、28.1％,共培养上清液TIM-4 mAb组IL-4、IL-6、IL-13分泌水平明显低于control mAb (P＜0.05),且加入TIM-4 mAb明显降低了与TIM-4+ KCs共培养的CD4+T细胞p-STAT6蛋白表达(P＜0.05),外源性加入IL-4可明显增高CD4+T细胞p-STAT6蛋白的表达(P＜0.05).移植模型注入iTreg细胞,iTregz组肝功指标明显好转,与LT组比较差异有统计学意义(P＜0.05).肝组织病理学检查,iTreg组RAI平均得分为(3.97±0.67),明显低于LT组[(8.47±0.90),P＜0.05],且iTreg组小鼠平均存活时间延长.结论 阻断KCs TIM-4能够抑制初始CD4+T细胞IL-4/STAT6信号通路的激活,从而诱导更多iTreg细胞的生成,致使宿主对移植物产生免疫耐受.     

中医药治疗哺乳期早期急性乳腺炎用药规律研究

目的:分析治疗哺乳期早期急性乳腺炎的内服中药方药间的关联规则和用药规律,为中医药治疗该病提供循证医学依据。方法:检索中国知网期刊全文数据库(CNKI)收录的2009年1月至2019年2月发表的中医内服方治疗哺乳期早期急性乳腺炎的文章,共收集内服中药方65个,应用Excel 2011数据软件,录入各药方的组成药物。对方剂数据库进行统计、分析,并进行关联规则计算。结果:65个内服方中,使用频次最多的14种药物依次为蒲公英、柴胡、甘草、王不留行等;功效分类使用频率前6位的依次为清热解毒、疏肝散结、通经下乳、清热化痰、活血调经、凉血消痈;支持度20%,置信度60%的高频药对分别为柴胡和蒲公英、蒲公英和金银花、路路通和王不留行、柴胡和金银花、金银花和连翘、瓜蒌和青皮。结论:治疗本病的内服方中药药性以寒凉为主,药味以苦辛为主,归经以肝胃为主,药物功效以清热解毒、疏肝散结、通经下乳为主,体现了哺乳期早期急性乳腺炎疏肝清热、通经下乳的临床治疗原则。数据挖掘从宏观层次上探讨中医药治疗本病的配伍特点,对临床辨证论治组方提供指导。     

羚角五虎汤联合磷酸奥司他韦颗粒治疗儿童流行性感冒临床研究

目的:观察羚角五虎汤联合磷酸奥司他韦颗粒治疗儿童流行性感冒的疗效。方法:纳入156例热毒袭肺型流行性感冒患儿作为研究对象,随机分成2组各78例,2组均以磷酸奥司他韦颗粒治疗,观察组联合羚角五虎汤治疗。2组均治疗5天。记录2组患儿的症状缓解时间,治疗前后评定中医证候积分,比较2组的临床疗效。结果:治疗后,观察组总有效率为93.59%,高于对照组的80.77%,2组比较,差异有统计学意义(P 0.05)。观察组退热时间、鼻塞消失时间、咳嗽消失时间均较对照组缩短,差异均有统计学意义(P 0.01)。2组中医证候积分均较治疗前下降(P 0.01),观察组中医证候积分低于对照组(P 0.01)。2组不良反应发生率比较,差异无统计学意义(P 0.05)。结论:羚角五虎汤联合磷酸奥司他韦颗粒治疗儿童流行性感冒能够缩短症状缓解时间,提高疗效。     

多指标综合评分法优选黄芪通便颗粒水提醇沉工艺

目的:多指标综合评分法优选黄芪通便颗粒水提醇沉工艺,为生产节能降耗。方法:以黄芪甲苷转移率和浸膏得率的综合评分为指标,采用Box-Behnken响应面法计算出最佳水提工艺,并采用正交设计试验得到最佳醇沉工艺。结果:最佳水提醇沉工艺为10倍水提、提取次数3次、提取时间80min,合并药液,减压浓缩至密度为1.1g/mL(60℃),加醇使含醇浓度达70%,冷藏静置12h。结论:本研究表明黄芪通便颗粒的水提醇沉工艺准确度高,稳定可行,为工业化规范生产和进一步研究提供科学理论依据。     

临床微生物室进修生带教体会

目前临床微生物室肩负着微生物病原体检测、抗生素药敏试验、院内感染监测以及耐药菌流行趋势监测等重任.而传统的临床微生物进修生单一的技术传授带教模式已无法满足现代医疗的需求,笔者将现代临床微生物和微生物进修生的特殊性进行结合,在带教方式和带教理念方面都进行了改进.一定程度上改变了传统的技术传授为主的带教模式,让进修生在理论与实践相结合的同时还培养了将临床微生物与临床各科室紧密联系的思维.     

熄风定痫汤治疗卒中后迟发型癫痫40例临床观察

目的:观察熄风定痫汤治疗卒中后迟发型癫痫风痰闭阻证的临床疗效。方法:选择卒中后迟发型癫痫风痰闭阻证患者75例,将其随机分为治疗组40例和对照组35例。对照组给予卡马西平治疗,治疗组在对照组治疗的基础上给予熄风定痫汤治疗。2组疗程均为6个月,比较2组综合疗效、癫痫发作频率以及认知功能评分。结果:总有效率治疗组为92. 50%,对照组为74. 29%,2组比较,差异有统计学意义(P 0. 05);治疗后2组癫痫发作频率均较治疗前显著降低、MoCA评分均较治疗前显著升高,且治疗组均优于对照组,差异有统计学意义(P 0. 05)。结论:熄风定痫汤可有效提高卒中后迟发型癫痫风痰闭阻证疗效,减少癫痫发作频率,并改善患者认知功能,值得临床推广。     

结核病患者自我效能感水平及其影响因素分析

目的了解结核病患者的一般自我效能感水平及其影响因素,为提高结核病患者一般自我效能感水平的对策制定提供依据。方法采用一般情况调查表和一般自我效能感量表对某省某三级甲等综合肺科医院结核病区住院的所有结核病患者进行面对面调查,分析结核病患者一般自我效能感水平及其影响因素。结果 402例结核病患者一般自我效能感平均得分为(20.4±4.2)分,其中14例(3.5%)表现出高水平的自我效能。自我效能感得分等级为偏低(10~)、中等(20~)、较高(30~)等级的患者分别为163例(40.5%)、225例(56.0%)、14例(3.5%)。对结核病患者自我效能感有较大影响的因素有患者的病程(P0.001)、居住地(P=0.012)、是否参加结核病教育讲座(P=0.034)、是否体育锻炼(P=0.053,逐步多元线性回归分析P=0.017)和职业状态(P=0.027),以及因结核病住院次数(P=0.002)、家庭经济状况(P=0.027)和文化程度(P=0.020)。结论结核病患者一般自我效能感水平偏低,医护人员对患者随访时应评估患者的一般自我效能感水平及其影响因素,根据患者的具体情况制定个体化的护理干预措施,以提高自我效能感水平。     

miRNAs对神经干细胞分化调控作用分子机制的研究进展

神经干细胞是一类具有强大自我更新能力的多能干细胞,并且具备向神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞分化的潜力。神经干细胞的分化过程受到多种因素的精确调控。miRNAs是一种内源性非编码单链小分子RNA,通过和mRNA结合引导沉默复合体降解mRNA或抑制其翻译调控mRNA在神经干细胞中的表达,从而影响神经干细胞的分化状态。本文就miRNAs调控神经干细胞分化为神经元、星形胶质细胞和少突胶质细胞的分子机制研究进展作一综述。     

氟康唑和伏立康唑治疗新生儿近平滑假丝酵母菌败血症的临床分析

目的探讨氟康唑和伏立康唑治疗新生儿近平滑假丝酵母菌败血症的临床效果,为该类患儿临床抗真菌药物的选择提供参考。方法回顾性分析2014—2018年收治新生儿近平滑假丝酵母菌败血症55例的临床资料,根据首选治疗药物分为首选氟康唑组（31例）和首选伏立康唑组（24例）。比较两种药物初始治疗显效比例、以及并发中枢感染在内的治愈患儿整体疗程和病死率。结果首选氟康唑组： 治愈28例,疗程为（31.39±12.40） d;其中15例治疗（6.67±2.19） d后血培养转阴,疗程（23.13±2.72） d;其余13例治疗至14 d血培养仍持续阳性,换为伏立康唑治疗（需挽救治疗）（6.31±2.21） d后血培养转阴,（25.38±10.20） d后痊愈,疗程（氟康唑+伏立康唑治疗疗程）为（40.15±11.31） d。死亡1例,放弃2例,病死率9.68%。首选伏立康唑组： 24例均治愈无死亡病例;治疗（7.83±2.41） d后血培养转阴（2周内转阴为治疗初始显效）,治疗初始显效比例高于首选氟康唑组（χ2=6.469,P＜0.01）;疗程为（25.83±5.55） d,短于首选氟康唑组治愈患者疗程（t=2.136,P<0.05）。两组治愈患者中均未发现药物相关副作用。结论首选伏立康唑可能较氟康唑更适合新生儿近平滑假丝酵母菌败血症的治疗,但其有效性和安全性仍需进一步明确。