诺如病毒衣壳蛋白单克隆抗体的制备及鉴定

目的制备诺如病毒衣壳蛋白特异性单克隆抗体,为诺如病毒的快速检测及致病机制的研究提供实验材料。方法用分别表达GGII1、GGII3、GGII4和GGII7型诺如病毒衣壳蛋白的重组腺病毒联合免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合,获得分泌高滴度针对衣壳蛋白的杂交瘤细胞株,测定单抗免疫球蛋白亚类及单抗效价,用间接ELISA、间接免疫荧光和Western-blot检测单克隆细胞株的特异性。结果通过细胞融合和克隆化,筛选出4株分泌抗衣壳蛋白的杂交瘤细胞株V1E、V1E9、V1D6和V6D6。间接ELISA、免疫荧光和Western-blot检测结果表明,V1E和V1E9可以与GGII4型诺如病毒衣壳蛋白发生特异性反应,V1D6和V6D6可以同时与GGII1、GGII3、GGII4和GGII7型诺如病毒衣壳蛋白发生特异性反应。结论获得了诺如病毒特异性单克隆抗体,为制备免疫诊断试剂盒及致病机制的研究奠定了基础。     

肠致病性大肠杆菌的致病因子及致病机制的研究进展

肠致病性大肠杆菌是引起全球婴幼儿急、慢性腹泻和成人散发腹泻的一类重要病原菌。本文通过对其毒力岛编码的主要致病基因包括Ⅲ型分泌系统 (esc或sep)、分泌型蛋白质 (esp)及其分子伴侣、外膜蛋白紧密素 (eae)和紧密素易位受体 (tir)等基因 ,以及粘附与脱落损伤的组织病理学结构及其介导腹泻机制的综述 ,以期对肠致病性大肠杆菌的致病机制作一探讨。     

食品工业用红发夫酵母的鉴定

目的了解红发夫酵母(Phaffiarhodozyma)菌种的生理生化特征,保证食品工业使用菌种的安全。方法将菌种分别接种于麦芽汁-琼脂培养基和0.5%蛋白胨-琼脂培养基平板上,18-20℃培养7d后,进行碳源同化试验、糖发酵试验及无性繁殖形态观察。结果该菌种在麦芽汁-琼脂培养基上生长良好,适宜温度为(20±2)℃,其生长特性为具有担孢子及假菌丝并有芽孢台;碳源同化试验及糖发酵试验均具有特异性,与参考文献所描述的红发夫酵母形态和生化试验结果基本相吻合。结论本实验为今后开展红发夫酵母的鉴定研究奠定了基础。     

小鼠放射性免疫低下模型的研究

目的保健食品功能性评价中放射性免疫低下模型建立的研究。方法采用30～34g的健康雄性昆明种小鼠90只,随机分成6个组,每组15只,包括3个照射组和3个相应的对照组。对照射组分别以3Gy、4Gy、5Gy剂量γ射线一次性全身照射后,观察照射后3、7、14、21天,小鼠细胞免疫(迟发型变态反应)、体液免疫(血清溶血试验)、单核巨噬细胞系统(鸡红细胞吞噬试验)、NK细胞活性试验等四个方面的变化情况。结果与结论(1)一次性全身3Gy、4Gy、5Gy照射后,在一定的时间范围内,小鼠的免疫系统处于免疫低下状态。(2)不同免疫指标损伤开始恢复的时间不同。血清溶血素对辐射损伤最敏感且损伤恢复最慢,至辐照后21天尚未恢复,腹腔巨噬细胞对辐射损伤恢复最快,在辐照后7d即恢复并代偿性增强。(3)经3Gy、4Gy、5Gy一次性全身照射后3d,体重增长值、脏器指数、足趾肿胀度、血中半数溶血值、腹腔巨噬细胞鸡红细胞吞噬指数均处于低下状态,可以建立放射性免疫低下模型,以评价保健食品的对辐射损伤具有辅助保护功能、免疫调节功能和减低放疗毒副作用的动物模型。(4)脾NK细胞活性指标不适于放射性免疫低下模型的建立。     

保健食品抗辐射功能评价中存在的问题及对策

保健食品抗辐射功能评价自确立以来至今已有 6年 ,在评价中得到了详实的数据和结果。但目前抗辐射保健食品评价审批工作中遇到许多问题 ,本文就其中存在的几个问题提出修改意见。1　抗辐射保健食品功能评价中存在的问题日前 ,卫生部法监司颁布的“保健食品功能学评价程序和检测方法一抗辐射作用”中规定亚急性试验、亚慢性试验或慢性试验。亚急性试验的试验原则是一次性大剂量全身6 0 Co -γ射线照射引起的急性辐射损伤。结果判定是亚急件试验项目中 2项结果为阳性 ,则可判定该受试物对较高剂量一次辐射有拮抗作用。亚慢性或慢性试验原则为…     

离子对高效液相色谱法分析米曲霉发酵液中的曲酸

为建立米曲霉培养液中曲酸的离子对高效液相色谱法 ,采用 0 0 1mol L磷酸氢二钠及 2mmol四丁基溴化胺做流动相 ,选择 2 2 6nm紫外吸收波长 ,测定米曲酶发酵液中的曲酸 ,曲酸在C1 8色谱柱上获得良好的分离。本方法检出限为 0 0 1 2 μg ml;麦芽汁 蛋白胨、麦芽汁 酵母膏、马铃薯 酵母膏 蔗糖三种培养液中回收率分别为 98 2 %、1 0 3 4%、97 2 % ;RSD分别为 0 51 %、0 45 %、0 43 %。     

玉米中四种黄曲霉毒素的关系

目的了解我国玉米中黄曲霉毒素B1（AFB1）、黄曲霉毒素B2（AFB2）、黄曲霉毒素G1（AFG1）和黄曲霉毒素G1（AFG1）污染的关系。方法用统计方法分析玉米中任意两种毒素污染率、污染浓度的相关性;计算AFB1与总黄曲霉毒素（AFs）的数量关系,分析AFB1在AFs中的构成1结果AFB1检出率最高,AFB1没有单独污染,均伴随AFB1。任两种毒素浓度呈正相关（P=0．000）,AFB1、AFB1、AFG1与AFG1的相关系数均大于0．951任两种毒素检出率有相关性（P=0．000）,AFB1和AFBz相关性最强1随AFB1浓度区间增高,AFB1检出率增高,AFG1和AFG1检出率先升高后降低;AFB1与AFs浓度比升高,AFs高于4μg／kg时,浓度比超过0．51结论AFB1和AFBz污染密切相关,AFBz伴随AFB1,二者污染率和浓度呈正向变化。当AFB1浓度较高时,对AFG1和AFG1呈现抑制作用1按照AFs限量是AFB1的两倍,当玉米中AFs限量在4μg／kg以上时,同时制定AFB1和AFs限量,与仅制定AFB1限量相比,不增加管理效力。     

婴儿肠道菌群的建立及其与健康的关系

在漫长的进化过程中,与人体共生的微生物形成了复杂的微生态系统,参与机体的生理功能.肠道菌群是人体重要的微生态系统之一,直接参与人体的消化、营养吸收、能量供应、脂肪代谢、免疫调节等多方面功能,相当于人体的一个重要"器官"[1].研究发现,多种疾病可能与肠道菌群有关,包括胃癌、结肠癌、非炎症性肠病、坏死性小肠结肠炎、免疫性疾病,以及慢性代谢性疾病,例如肥胖、糖尿病等[2-3].     

植物乳杆菌ATCC8014对寄生曲霉NRRL 2999孢子形态及生长与产毒影响的研究

为探讨植物乳杆菌ATCC 80 1 4对寄生曲霉NRRL 2 999生长与产毒的影响 ,将植物乳杆菌与寄生曲霉同时接种到MRS肉汤和预先厌氧培养植物乳杆菌后再接种寄生曲霉孢子 ,2 8℃培养 1 5天。在培养的第3、6、9、1 2和 1 5天测定培养液中的pH值、黄曲霉毒素B1 和菌丝体重量。结果显示 :植物乳杆菌可显著抑制寄生曲霉生长 (P <0 0 1 ) ,抑制的机制在于孢子灭活 ,使其不能发育成菌丝 ,故也不能产生黄曲霉毒素B1 ,在电子显微镜下可观察到寄生曲霉孢子充水肿胀死亡 ,而植物乳杆菌的细胞形态也由长杆状变为椭圆形 ;当植物乳杆菌ATCC 80 1 4接种到已经培养了 3天的寄生曲霉NRRL 2 999培养液中时 ,则植物乳杆菌对其生长与产毒无显著影响。在以乳酸调整的pH4 5MRS肉汤中 ,乳酸对寄生曲霉生长有显著的抑制作用 (P <0 0 1 ) ,但并不影响黄曲霉毒素B1 的合成     

一株解脂假丝酵母菌种的小鼠毒力试验研究

目的观察一株解脂假丝酵母菌种培养物的经口动物毒性。方法将解脂假丝酵母菌种分别接种于马铃薯-酵母膏-蔗糖、麦芽汁-蛋白胨及麦芽汁-酵母膏3种不同的产毒培养基,培养14d后,使用其培养物原液及2.5倍浓缩液,经口一次性灌胃给予ICR小鼠,雌雄各半,并随后连续观察14d中小鼠的中毒表现及死亡情况。结果其培养物对实验动物未见有毒性反应或死亡。结论初步证明了解脂假丝酵母的安全性。