含结核分枝杆菌Ag85A基因的2型重组腺相关病毒的构建和免疫原性

目的构建含结核分枝杆菌Ag85A基因的2型重组腺相关病毒并初步研究其免疫原性。方法采用PCR法从结核杆菌H37Rv株扩增Ag85A基因，将PCR扩增产物克隆于2型腺相关病毒（AAV-2）表达质粒pSNAV中，构建重组质粒pSNAV-Ag85A；用脂质体转染的方法将重组质粒转入BHK-21细胞中，G418筛选得到能表达目的基因混合细胞系BHK—Ag85A；用具有rAAV-2包装功能的辅助病毒感染BHK-Ag85A，纯化后得到rAAV-2-Ag85A：Western blotting检测重组病毒Ag85A基因在BHK-21细胞中的表达；rAAV-2-Ag85A免疫Balb／c小鼠．ELISA法检测血清中抗-Ag85A抗体，^51Cr释放分析检测细胞毒性T淋巴细胞（CTL）活性。结果PCR扩增的Ag85A基因序列与GenBank公布的序列一致，纯化后得到的rAAV-2-Ag85A滴度为1×10^12 virus particles／ml；Western blotting检测到rAAV-2-AgSSA在BHK-21细胞中能够表达出一相对分子质量为32000的多肽；rAAV-2-Ag85A免疫的Balb／c小鼠．抗-Ag85A抗体的滴度可达1：1024，同时还可激发Ag85A特异性的CTL产生。结论rAAV-2-Ag85A构建成功．rAAV-2-Ag85A免疫小鼠可以同时诱导体液和细胞免疫反应的出现。rAAV-2-Ag85A对于防止结核分枝杆菌感染．尤其是作为结核病的治疗性疫苗可能具有潜在的应用价值，值得进一步深入研究。     

冠状动脉血管直径测量方法的研究

心脏是人体生命活动的重要器官，能否正常工作主要是由心血管系和心传导系决定。冠状动脉是给心脏供血的唯一途径，心肌能否得到足够的营养、保持连续有节奏地运动，完全取决于冠状动脉是否能不断地供给其营养。冠状动脉直径的测量以及血管直径参数对于反映心脏功能和疾病的诊断具有重要意义。文中提出一种新型的、简便的血管直径测量方法，利用计算得到的血管直径，我们就可以判别心血管狭窄位置。     

不同造模方法所致“热毒血瘀证”模型家兔血液流变学改变的比较研究

本文通过金葡菌、大肠杆菌内毒素、地塞米松加内毒素等三种不同的攻毒方法复制了“热毒血瘀证”的动物模型。结果提示三种模型在血凝学指标上均表现为KPTT、PT明显缩短,而在血液流变学指标上则有不同。金葡菌所造模型表现为明显的高粘状态,内毒素模型则表现为明显的低粘状态,地塞米松加内毒素模型则改变不明显。     

血清和尿液中22种真菌毒素的高效液相色谱——四极杆轨道阱质谱筛查方法建立

目的 建立血液、尿液中22种常见真菌毒素的液液萃取-高效液相色谱四极杆轨道阱质谱测定方法。方法 基于高效液相色谱-四极杆轨道阱质谱技术,首先建立22种常见真菌毒素的色谱质谱数据库。然后取血清和尿液样品,用0.10 mol/L NaOH 溶液调节至碱性,加入乙酸乙酯涡旋混合萃取,萃取液用弱的氮气吹至近干,残渣加甲醇水溶液（50∶50,v/v）复溶,经过滤后进 LC - MS/MS 分析。在一定识别标准下与数据库比对进行定性筛查。结果 尿液和血液检出限（limit of detection,LOD）分别为2.61×10 - 3～50.0 ng/ml和2.07×10 - 3～50.0 ng/ml,定量限（limit of quantitation,LOQ）分别为8.70×10 - 3～1.67×102 ng/ml和 6.91×10 - 3～1.67×102 ng/ml。尿液测定日内相对标准偏差（relative standard derivations, RSDs）为2.34%～8.40%,日间RSDs为4.80%～10.9%;血液测定日内RSDs为2.10%～10.6%,日间RSDs为3.07%～11.6%。结论 建立的快速筛查方法操作简单,具有高通量、高灵敏度和高准确性的特点,符合生物样品中毒物分析鉴定的要求,同时可以更好地发现新型毒物和未知毒物。     

Graves病患者外周血可溶性白细胞介素2受体水平的研究

目的：探讨Graves病患者的血清可溶性白介素2受体（SIL－2R）在治疗前后的变化。方法：应用放射免疫法（RIA）对89例Graves病患者治疗前后的血清SIL－2R和各种甲状腺激素水平进行检测,比较并逐步回归。结果：治疗后Graves病患者除促甲状腺激素（TSH）外,各种甲状腺激素水平显著降低（P＜0．05）,并与SIL－2R的上升、下降显著相关。结论：SIL－2R水平能反映淋巴细胞的活化状态,可作为Graves病患者免疫活化的一项有用指标。     

成人特发性局灶节段性肾小球硬化病248例临床病理分析

目的 重新评价肾活检标本中特发性局灶节段性肾小球硬化病（FSGS）的发生率、主要临床及病理特点。方法 收集1994年7月～2000年7月间248例特发性FSGS的患者,观察肾组织的光镜、 荧光及电镜的特点,根据肾小球病变将特发性FSGS分为3种亚型。结果 248例成人特发性局灶节段肾小球硬化占同期肾活检的12.4%,占成年人原发性肾小球疾病的19.0%,以18～30岁为发病高峰年龄（约占44.4%）。临床表现为不同程度的蛋白尿,以肾病综合征为表现者143例（占57.7%)。FSGS的3种病理亚型中,经典型FSGS仍占绝大多数（91.5%),尖端型为4.4%,塌陷型为4.1%,肾活检时,约1/3以上为肾功能不全（约占35.1%）。13例尿毒症中76.9%病理亚型为塌陷型。结论 局灶节段性肾小球硬化病约占原发性肾小球病1/5,FSGS患者肾活检时,除表现为蛋白尿、肾病综合征外,肾功能不全也较常见。塌陷型FSGS常表现为进行性的不可逆的肾功能衰竭,其预后差。     

中国热带医学的未来十年

医学发展总是与人类文明、社会进步双相同步的。随着经济全球化、知识经济时代和信息化的齐步到来,对我国未来热带医学的发展必将产生深远的影响。新中国成立以来,在热带医学的研究方面,特别对传染病的防制方面已取得了举世瞩目的成就,是属于热带病控制比较成功的一个发展中国家．但与发达国家和我国的经济发展要求还有一定的距离。随着我国综合国力的不断增强,展望今后十年我国热带医学发展的前景,将是挑战与机遇并存,前途一片光明。 国家医疗体制改革不断深化,医学社会化的方向更加明确：初级卫生保健将全面展开,健康教育列为首…     

全能营养液对低出生体重新生儿生长激素及免疫功能的影响

分别使用放免法、ELISA法、APAAP桥联酶标技术测定低出生体重新生儿全能营养液(TNA)组与对照组患儿生长激素、IL-6及T细胞亚群.结果,TNA组生长激素、IL-6水平较对照组均明显升高(P＜0.01);TNA组CDf细胞百分比明显高于对照组(P＜0.01),而CD8+细胞百分比明显低于对照组(P＜0.01),CK4+/CD8+比值亦明显高于对照组(P＜0.01).结果表明,TNA对低体重新生儿具有促进生长发育及增强免疫功能的作用.     

对喹诺酮类药物耐药的志贺菌gyrA基因突变的研究

目的研究福氏志贺菌对喹诺酮类药物的耐药机制。方法对38株耐药的福氏志贺菌gyrA基因的N末端编码区进行PCR扩增后,用SSCP方法检测突变,然后测序。结果福氏志贺菌gyrA基因PCR-SSCP显示有8株突变,测序结果揭示存在2个导致氨基酸改变的基因点突变:83位TCG(Ser)→TTG(Leu)突变和87位GAC(Asp)→GGC(Gly)突变。结论gyrA基因点突变与福氏志贺菌对喹诺酮类药物的高水平耐药有密切关系。