逆行交锁髓内钉治疗股骨远端骨折31例分析

目的探讨逆行交锁髓内钉治疗股骨远端骨折的疗效与特点。方法 2003年1月-2005年1月间对31例股骨远端骨折患者采用逆行交锁髓内钉进行手术治疗,术后持续被动运动功能锻炼。结果所有病例进行半年以上的随访,骨折愈合良好,膝关节功能较满意。结论逆行交锁髓内钉治疗股骨远端骨折结合膝关节持续被动运动功能锻炼可以获得满意疗效。 更多还原     

青蒿琥酯对肿瘤细胞损伤修复基因表达的影响

目的运用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术研究青蒿琥酯对肿瘤细胞DNA损伤修复基因表达的影响。方法用青蒿琥酯处理K562细胞72 h,倒置光显微镜下观察细胞形态变化,Trizol法提取总RNA,RT-PCR检测DNA依赖性蛋白激酶(DNA-PK)的表达变化。结果倒置光显微镜观察到青蒿琥酯处理的K562细胞出现不同程度的皱缩,核分裂相减少,细胞密度下降,漂浮细胞增多。RT-PCR检测结果显示DNA-PK表达下调。结论青蒿琥酯可通过下调K562细胞DNA-PK表达,诱导K562细胞凋亡发挥其抗癌作用。     

慢性失眠障碍患者血清丙二醛、谷胱甘肽过氧化物酶水平及其影响因素

目的探讨慢性失眠障碍患者血清丙二醛（MDA）和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）水平及其影响因素。方法收集慢性失眠障碍患者110例（患者组）和睡眠正常的健康者90例（健康对照组），采用匹兹堡睡眠质量指数问卷（PSQI）对慢性失眠障碍患者的睡眠质量进行评定，采用汉密尔顿抑郁量表（HAMD-24）和汉密尔顿焦虑量表（HAMA-14）对慢性失眠障碍患者的焦虑、抑郁水平进行评定，受试者血清MDA水平采用比色法（TBA法）进行测定，血清GSH-PX水平采用酶联免疫吸附法（ELISA）进行测定。结果患者组患者的血清MDA水平明显高于健康对照组，血清GSH-PX水平明显低于健康对照组，差异均有统计学意义（均P＜0.05）。多元线性回归分析结果显示，患者组患者的PSQI总分为血清MDA水平的独立影响因素（标准化茁=0.354，P=0.008），另外患者组PSQI总分和BMI是血清GSH-PX水平的独立影响因素（标准化茁=-0.393，P=0.002；标准化茁=0.254，P=0.025）。结论慢性失眠障碍患者体内存在血清MDA、GSH-PX水平异常，氧化应激可能是慢性失眠障碍引起的病理生理变化之一。     

慢病毒载体介导SPROUTY2基因过表达对多发性骨髓瘤RPMI8226细胞增殖作用的影响

目的 探讨慢病毒表达载体介导的人SPROUTY2基因过表达对多发性骨髓瘤RPMI8226细胞增殖、克隆性生长和细胞外调节蛋白激酶（ERK）抑制剂敏感性等生物学特性的影响.方法 克隆人SPROUTY2基因,构建SPROUTY2基因与绿色荧光蛋白（GFP）的重组慢病毒表达载体LV-S-GFP及对照载体LV-GFP.脂质体法包装病毒;优化慢病毒感染RPMI8226细胞的条件;荧光显微镜观察GFP表达;反转录聚合酶链反应（PCR）、蛋白质印迹法（Western blot）方法分别检测目的基因及其蛋白的表达,CCK-8法检测RPMI8226细胞增殖及其对ERK 1 /2抑制剂AS703026敏感性的影响,软琼脂克隆形成实验检测细胞的克隆性生长能力.结果 成功地构建了共表达SPROUTY2基因和报告GFP的高滴度慢病毒颗粒.LV-S-GFP实验组RPMI8226细胞中SPROUTY2的表达明显高于LV-GFP对照组,灰度值分别为（230.85±32.12）％和（140.35±36.62）％（P＜ 0.05）.过表达SPROUTY2基因对骨髓瘤细胞增殖具有抑制作用,并可以增强ERK1/2抑制剂AS703026对RPMI8226细胞的杀伤作用.过表达SPROUTY2基因可明显抑制RPMI8226细胞的克隆性生长.结论 慢病毒载体系统可高效介导SPROUTY2基因在RPMI8226细胞中的表达,抑制骨髓瘤细胞增殖及克隆性生长,并能够提高其对ERK抑制剂的敏感性.     

不同方法转染人外周血淋巴细胞效率比较

目的 采用不同方法转染原代人外周血淋巴细胞,以寻找一种简便、高效的淋巴细胞转染方法.方法 采用聚蔗糖-泛影葡胺(Ficoll-Hypaque)分离法从健康人外周血中分离出单个核细胞,锥虫蓝检测细胞存活率.单个核细胞在6孔板内培养2h后吸出悬浮的淋巴细胞至24孔板中继续培养.分别采用电穿孔介导载体质粒(PEGFP-N1)转染活化的淋巴细胞、慢病毒(LVGFP)单次感染及慢病毒重复感染方法分别转染静息或活化的淋巴细胞,在荧光显微镜下观察感染后不同时间点细胞绿色荧光蛋白(GFP)表达情况,同时收集细胞用流式细胞术检测GFP阳性细胞的比例,比较不同条件下慢病毒感染淋巴细胞的效率.结果 通过Ficoll-Hypaque分离的单个核细胞的纯度可达95％,其活细胞率＞95％,获得的淋巴细胞占90％～ 95％,形态较均一.“2 100V、10 ms、1个脉冲”电穿孔淋巴细胞后可见散在荧光,但随着时间推移荧光逐渐减弱,72 h基本看不到荧光.慢病毒单次感染静息期淋巴细胞48 h后无绿色荧光,流式细胞术检测GFP阳性细胞＜1％.慢病毒单次感染增殖期淋巴细胞可见绿色荧光,且随着病毒浓度增大,荧光逐渐增强,GFP阳性细胞在1％～5％之间.慢病毒重复感染增殖期淋巴细胞可见较强绿色荧光,GFP阳性细胞在5％～10％左右,随着时间推移荧光逐渐增强.结论 慢病毒重复感染增殖期淋巴细胞,能有效地将外源基因导入淋巴细胞内稳定表达.     

跟骨多方位截骨加植骨与距下关节融合术治疗严重跟骨骨折畸形愈合

目的：观察通过跟骨多方位截骨加植骨与距下关节融合术联合治疗严重跟骨骨折畸形愈合的临床疗效,探讨其手术适应证及优、缺点。．方法：2009年4月至2011年8月,27例跟骨陈旧性骨折患者行跟骨多方位截骨加植骨与距下关节融合术治疗。男21例,女6例,年龄22-47岁,均为单足损伤。采取跟骨外侧入路,取自体髂骨植骨,距下关节外融合及内固定。根据美国足踝外科协会（AOFAS）足与踝关节评分进行功能评价。结果：所有患者术后随访13～21个月,平均18．4个月。患者8周部分负重,14周完全负重。AOFAS评分自术前（35．6±7．9）分升至术后（83．8±7．1）分,手术前、后比较差异有统计学意义（P〈0．05）。X线片显示Bohler角、跟骨丘部高度及跟骨宽度基本恢复正常。结论：跟骨多方位截骨加植骨与距下关节融合术的联合治疗是治疗严重跟骨骨折畸形愈合的一种有效方法,可明显降低行走疼痛的发生率,恢复后足的外形与功能。     

脊髓髓内肿瘤的显微外科治疗分析

目的探讨髓内肿瘤的临床特点和显微手术疗效,提高早期诊断水平,改善预后。方法回顾性分析2000年3月至2012年8月在华中科技大学同济医学院附属同济医院神经外科经手术治疗并证实为髓内肿瘤的165例患者临床资料。统计学分析采用SPSS 17.0统计分析软件,年龄用均数±标准差(x珋±s)表示,肿瘤定位及病理类型比较采用χ2检验。结果 165例患者共发现171个肿瘤,男性患者肿瘤好发于颈段,女性好发于胸段(χ2=11.97,P0.05);青少年患者病理类型主要为星形细胞瘤,成年患者主要为室管膜瘤(χ2=86.50,P0.001);术前MRI定位诊断准确率97.5%,定性诊断准确率96.4%。术前Mc-Cormick分级Ⅰ级48例,Ⅱ级85例,Ⅲ级21例,Ⅳ级11例。手术采用椎板切开显微切除肿瘤,辅助术中神经电生理监测和术后综合治疗,术后早期随访Mc-Cormick分级判断疗效,术后Ⅰ级139例,Ⅱ级20例,Ⅲ级1例,Ⅳ级5例,症状缓解率96.4%,其中症状完全恢复者139例(84.2%),大部分好转恢复者20例(12.1%),症状同前4例(2.4%),肢体运动功能恶化2例(1.2%)。结论髓内肿瘤起病缓慢,早期症状隐匿易被忽视和误诊,术前MRI定位和定性诊断准确性和特异性高,为早期诊断提供了保证。显微手术切除是治疗髓内肿瘤唯一可靠有效的治疗手段,尤其是近两年来使用神经电生理监测指导显微手术,极大地提高了手术全切率和预后。     

IL-12和IL-18在实验性自身免疫性神经炎中的协同作用机制

目的:研究IL-12和IL-18分别在实验性自身免疫性神经炎(EAN)中的调节机制以及IL-12与IL-18的协同作用.方法:建立P0180-199特异性T细胞系.分别用IL-12或IL-18或者IL-12和IL-18进行体外干预,将不同处理组的T细胞回输到正常的大鼠体内,建立过继免疫的EAN动物模型.应用国际分级标准和临床评分对发病鼠进行临床评定;通过免疫组化检测不同组EAN鼠坐骨神经淋巴细胞浸润;ELISA法检测相关细胞因子的变化.结果:①在IL-12和IL-18共同干预的条件下,特异性T细胞TNF-α和IFN-γ的产生均增加;②与IL-12或IL-18组相比,IL-12 IL-18组大鼠临床发病明显加重,发病时间提前;③在坐骨神经标本中,与对照组相比,IL-12 IL-18组CD4 淋巴细胞浸润数量较多,而IL-12和IL-18组CD4 淋巴细胞浸润较少.结论:经IL-12和IL-18体外干预的P0180-199特异性T淋巴细胞,通过过继免疫给正常大鼠后,诱导出严重的EAN动物模型,表现出协同增强作用.