miRNA-200c通过抑制Akt通路提高胃癌SGC7901/DDP细胞对顺铂的敏感性

目的:研究miRNA-200c对人胃癌耐药SGC7901/DDP细胞顺铂敏感性的影响及其机制。方法:Western blotting检测SGC7901/DDP及其亲代SGC7901细胞E-cadherin、PTEN、p-Akt及总Akt蛋白的表达;瞬时转染miRNA-200c前体(miR-NA-200c precursor,Pre-200c)提高SGC7901/DDP细胞miRNA-200c的表达,MTT法检测转染后SGC7901/DDP细胞对顺铂的敏感性,并分析p-Akt表达的改变;应用Akt通路抑制剂LY94002处理SGC7901/DDP细胞抑制Akt磷酸化,检测处理后细胞对顺铂的敏感性。结果:与SGC7901细胞相比,SGC7901/DDP细胞中p-Akt蛋白的表达量显著增高(1.02±0.09 vs 0.17±0.02,P<0.05),E-cadherin、PTEN蛋白的表达量显著降低(0.10±0.03 vs 0.47±0.06,0.18±0.06 vs 0.87±0.06;均P<0.05)。转染Pre-200c后,顺铂对SGC7901/DDP细胞的IC50显著低于对照组[(7.52±0.19)vs(12.18±0.29)mg/L,P<0.05],细胞中p-Akt蛋白的表达量也显著低于对照组(0.22±0.04 vs 0.69±0.09,P<0.05);LY94002处理后,SGC7901/DDP细胞p-Akt蛋白的表达显著抑制(0.18±0.06 vs 0.66±0.10,P<0.05),顺铂对细胞的IC50显著低于对照组[(6.80±0.28)vs(11.94±1.73)mg/L,P<0.05]。结论:SGC7901/DDP细胞的耐药可能与E-cadherin和PTEN蛋白的表达缺失及Akt通路的异常激活有关,而miRNA-200c提高该细胞对顺铂的敏感性可能是通过抑制Akt通路而发挥作用。     

食管癌三维适形放疗联合TP方案同步放化疗的临床研究

食管癌有早期扩散和转移的倾向,有资料表明即使临床或手术认定为局限性癌肿者也有40%～75%已发生亚临床转移或邻近器官受累,对于不能手术或不愿手术的食管癌患者,放射治疗是最主要的治疗手段.     

短发夹状RNA对人肝癌细胞环氧合酶-2的抑制作用

目的:构建针对人环氧合酶-2(COX-2)基因编码区的短发夹状RNA(shRNA)真核表达载体质粒,观察其在不同时间点对人不同肝癌细胞株COX-2表达的影响.方法:以人COX-2mRNA编码区作为RNA干扰靶点,构建shRNA真核表达载体质粒WBH1和WBH2,应用阳离子脂质体分别转染人肝癌细胞株HepG2和Bel7402,利用逆转录聚合酶链反应和Westernblot法分别观察两株细胞转染后24,48,72,和96hCOX-2mRNA和蛋白的表达变化,检测抑制效果.结果:质粒在HepG2细胞和Bel7402细胞中的转染率分别约为60%和54%.WBH1导入细胞24,48,72和96h后,逆转录聚合酶链反应检测COX-2mRNA表达抑制率,HepG2细胞分别为18.5%,88.6%,52.8%和42.4%(P<0.01).Bel7402细胞分别为9%,45.1%,70.1%和56.3%(P<0.01).Westernblot法检测蛋白表达抑制率,HepG2细胞分别为10.3%,80.5%,45.3%和39.0%(P<0.01);Bel7402细胞分别为8.3%,40.2%,66.4%和35.6%(P<0.01).质粒WBH2对COX-2的表达无影响(P>0.05).结论:针对人COX-2的shRNA能高效特异的抑制不同肝癌细胞株的COX-2表达.HepG2细胞和Bel7402细胞分别以48h和72h抑制效果最明显.56.3%(P<0.01).Westernblot法检测蛋白表达抑制率,HepG2细胞分别为10.3%,80.5%,45.3%和39.0%(P<0.01);Bel7402细胞分别为8.3%,40.2%,66.4%和35.6%(P<0.01).质粒WBH2对COX-2的表达无影响(P>0.05).结论:针对人COX-2的shRNA能高效特异的抑制不同肝癌细胞株的COX-2表达.HepG2细胞和Bel7402细胞分别以48h和72h抑制效果最明显.     

Varian直线加速器全碳纤维治疗床对放疗剂量的影响

目的:探讨Varian直线加速器全碳纤维治疗床对放疗剂量的影响。方法:将固体水模置于主床板、衔接处、延长板的中心处,改变机臂角度,从不同角度让不同能量的高能X射线穿透治疗床,通过对比测量计算出穿透因子。利用放射治疗计划系统设计加床和不加床的计划,测量绝对剂量的误差。结果:6、15 MV X线,主床板和延长板的穿透因子在机架角105～120°区间较低,主床板在115°时最小,穿透因子分别为0.954 4、0.968 5;延长板在110°时最小,穿透因子分别为0.914 7、0.924 7;衔接处的穿透因子远小于主床板和延长板,120°时最小,分别为0.484 8、0.586 0。利用TPS设计放射治疗计划加虚拟床后,实测剂量更接近计划中的计算值。结论:随着床板厚度的增加,穿透因子减小;主床板和延长板对剂量的衰减接近,衔接处衰减最大,摆位时应避免射野穿过;能量越高,穿透因子越大;在设计放射治疗计划时,加虚拟床是必要的。     

肠型胃腺癌及不典型增生组织中血管活性肠肽mRNA表达的研究

目的　血管活性肠肽 (VIP)与肿瘤关系密切 ,VIP可促进和 /或抑制一些肿瘤生长 ,而且一些肿瘤细胞有VIP的自分泌调节作用。VIP对胃癌生长的影响 ,胃癌细胞是否分泌VIP及存在VIP自分泌调节作用尚有争议。研究肠型胃腺癌及不典型增生组织中VIPmRNA的表达情况 ,试图探讨VIP在胃腺癌发生发展中的作用。方法　通过RT PCR方法 ,检测 1 5例正常胃窦黏膜、1 6例不典型增生胃黏膜及 2 0例肠型胃腺癌组织中VIPmRNA的表达量 ,通过与恒定表达的β actin(内参照 )mRNA表达量比较 ,计算出VIPmRNA与 β actinmRNA表达量的积分光密度比值 (V/B) ,以V/B值反映各组织中VIPmRNA表达量的高低。结果　肠型胃腺癌组织中V/B值明显高于不典型增生胃黏膜及正常胃窦黏膜 ,其V/B值分别为 :1 .452 2± 0 .32 82 ,0 .962 3± 0 .2 2 5 0 ,0 .951 3± 0 .2 66 9,差异有非常显著性 (P<0 .0 1 )。正常胃窦黏膜与不典型增生胃黏膜中 ,V/B值的差异无显著性 (P >0 .0 5)。结论　肠型胃腺癌组织VIPmRNA表达量明显高于不典型增生胃黏膜 ;VIP可能在肠型胃腺癌的发生发展中起重要的作用。     

苦参碱对放射性肺炎转化生长因子β1表达水平影响的研究

目的观察苦参碱对放射性肺炎不同时期转化生长因子β1(TGF-β1)水平的影响,探讨其防治放射性肺炎的分子机制,寻求防治放射性肺炎的方法。方法成年雌性C57BL/6小鼠90只,随机分为4个组,⑴空白对照组(NT组18只):腹腔注射生理盐水20ml·kg-1·d-1;⑵单纯苦参碱组(SF组18只):腹腔注射30%苦参碱注射液20ml·kg-1·d-1;⑶单纯照射组(XRT组27只):全肺单次照射12Gy+腹腔注射生理盐水20ml·kg-1·d-1;⑷照射+苦参碱组(SF/XRT组27只):全肺单次照射12Gy+腹腔注射30%苦参碱注射液20ml·kg-1·d-1。于照射前1周开始注射,直至照射后2周结束。于照射后1、24和72h、1(潜伏期)、2、4、8、16(肺炎期)和24周(纤维化期)取实验组及相同鼠龄对照组小鼠肺组织,空白对照组与单纯苦参组各2只,单纯照射组与照射+苦参组各3只。左肺留作组织学与免疫组化分析。右肺作总RNA提取及实时定量RT-PCR分析。结果 NT组和SF组动物,其免疫组化评分较低,24h、72h、1周各组肺组织TGF-β1免疫组化评分均无统计差异(P>0.05);2周、4周、8周、16周、24周时SF/XRT组肺组织TGF-β1免疫组化评分较单纯照射组降低,差异有统计学意义(P<0.05),但仍高于NT组和SF组。实时定量PCR结果显示,1周、2周、4周、8周时SF/XRT组肺组织TGF-β1mRNA的相对表达较单纯照射组降低(P<0.05),但仍高于NT组与SF组,差异有统计学意义(P<0.05);16周、24周时SF/XRT组肺组织TGF-β1mRNA的相对表达较XRT组有所下调,但差异无统计学意义(P>0.05),2组均较NT组表达升高(P<0.05)。结论 TGF-β1在放射性肺炎发生、发展过程中起着重要作用,苦参碱可能通过下调TGF-β1表达,对放射性肺炎起到防护作用。     

紫杉醇、奥沙利铂联合氟尿嘧啶方案与S1＋奥沙利铂方案在治疗进展期胃癌中的疗效对比研究

目的比较紫杉醇、奥沙利铂联合氟尿嘧啶方案与S1十奥沙利铂方案在治疗晚期胃癌中的临床疗效和安全性。方法选取60例经组织或细胞病理学证实的晚期胃癌患者,随机分为紫杉醇、奥沙利铂联合氟尿嘧啶组（TOF组）和s1十奥沙利铂组（S0x组）,每组30例。TOF组治疗方案为：紫杉醇135mg/m2,第1天,使用前按照说明书要求进行预处理;氟尿嘧啶500rng／m2,化疗泵持续静脉滴注,第1～5天;奥沙利铂100mg／m2,静脉滴注2h,第1天。SOX组治疗方案为：替吉奥胶囊根据体表面积给药,体表面积〈1．25m2,40mg,2次／d;体表面积125～1．50m2,50mg,2次／d;体表面积〉1．50m2,60mg,2次／d,早晚餐后口服,第1～14天;停药7d;奥沙利铂130mg／m2静脉滴注,第1天,21d为一个周期。2个周期后评价疗效并记录毒副作用。结果TOF组客观缓解率为43．3％,疾病控制率为60％,中位无进展生存（PFS）时间为6．5个月;S0x组客观缓解率为36．7％,疾病控制率为56．7％,中位无进展生存（PFS）时间为5．8个月。2组客观缓解率和疾病控制率比较差异无统计学意义。TOF组最常见的不良反应是骨髓抑制、恶心呕吐、口腔黏膜炎,SOX组主要为骨髓抑制。TOF组的不良反应发生率较SOX组更高。结论两种方案治疗进展期胃癌均有成效,紫杉醇、奥沙利铂联合氟尿嘧啶方案不良反应更大,但患者均可耐受。     

RapidArc在前列腺癌放疗中的应用

目的:探讨RapidArc在前列腺癌放疗中的适用性。方法:对6例前列腺癌患者设计双弧RapidArc计划,处方剂量为7600cGy。用COMPASS系统验证剂量。利用剂量体积直方图分析临床靶区、危及器官OARs的各评价指标。结果:CTV的HI、CI分别为1.08±0.03、0.87±0.06,有较好的均匀性和适合度。PTV的HI、CI稍差。膀胱和直肠的V40仅为（18.98±4.82）%和（20.50±3.03）%,平均剂量也较低,在3000cGy左右。股骨头D5%也在4000cGy以内。COMPASS剂量验证所得CTV和PTV各指标差异在4%以内,危及器官评价指标差异在5%以内。等中心处绝对剂量准确率达（99.08±0.66）%,靶区和各危及器官的γ通过率达96%、98%以上。结论:RapidArc能够满足前列腺癌放疗的临床剂量学要求。     

上段食管癌不同放射治疗计划的剂量学研究

目的研究上段食管癌不同放射治疗计划的剂量学差异。方法对22例上段食管癌患者分别设计三维适形(3DCRT)和调强放射治疗计划(IMRT),利用剂量体积直方图来比较2种计划中靶区、危机器官的剂量学差异。结果IMRT与3 DCRT相比,靶区覆盖率V95%更高,Dmean也更接近处方剂量,差异有统计学意义(P0.05);与3 DCRT相比,IMRT的靶区适合度指数(CI)、靶区剂量不均匀性指数(HI)均更接近1;与3 DCRT相比脊髓D01明显降低,为(3779.72±15.19)cGy。结论IMRT技术对上段食管癌进行治疗时,靶区适合度和靶区剂量均匀性更好,危及器官受量能够得到很好的控制。     

体位固定系统在放疗中的剂量学研究

目的探讨体位固定系统在放疗中的质量保证与质量控制方法。方法将体位固定材料放置于固体水模上,固体水模中心放置剂量测量仪的电离室,分别用6MV和15MVX线进行照射,得到一组剂量仪读数,然后拿掉体位固定材料,其他条件不变,再去照射,对2组数据进行比较,得出体位固定材料对X线的穿透因子。结果对不同能量的X线,不同体位固定材料所得的穿透因子不同;对于相同的体位固定材料,穿透因子随着X线能量的增加而增加。结论要确保放射治疗定位和剂量的精度,对于体位固定材料要合理使用,在临床中应对处方剂量进行必要的修正与补偿。