人结肠癌裸鼠原位移植瘤模型的建立

目的 建立人结肠癌裸鼠原位移植瘤模型.方法 使用对数生长期的人结肠癌细胞(lovo)在8只裸鼠结肠浆膜至黏膜逐层注射,以完成原位移植瘤模型的制备,同时皮下种植8只裸鼠作为对照组.分别于第4、6、8、12周各组分别处死裸鼠2只,观察原位种植肿瘤的成瘤率、生长情况、转移率和腹水出现率.结果 16只裸鼠实验期间无1只死亡,成瘤率为100%, 原位种植成瘤率为100%(8/8),区域淋巴结转移率100%(8/8),肝转移率为100%(8/8),肺脏转移率为75.0%(6/8),腹膜转移率为75.0%(6/8),腹水出现率为27.5%(3/8).皮下种植组未见转移.结论 本实验成功建立了人结肠癌裸鼠原位移植瘤模型,该模型的生物学行为与临床病程非常相似,为研究人结肠癌转移机制和干预措施提供了较为理想的动物模型.     

糖皮质激素受体αsiRNA真核表达载体的构建与鉴定

目的 构建糖皮质激素受体α(GRα)小干扰RNA(siRNA)的真核表达载体,并检测其抑制结肠癌细胞株Lovo中糖皮质激素受体α表达的效果.方法 根据基因文库中GRα的cDNA序列,设计并合成两段siRNA,分别插入到pGenesil-1质粒中,并对重组质粒(命名为pGenesil-1/GRα1和pGenesil-1/GRα2)进行测序鉴定.脂质体介导下转染Lovo细胞株,RT-PCR和Western Blot检测转染后GRα的表达.结果 成功构建GRαsiRNA 真核表达载体(pGenesil-1/GRα1和pGenesil-1/GRα2);pGenesil-1/GRα2转染(脂质体法)Lovo细胞后,RT-PCR和Western blot检测细胞内GRα的表达显著降低.结论 GRαsiRNA真核表达载体的成功构建为进一步研究GR在结肠癌化疗中的作用奠定了重要的实验基础.     

ILKmRNA在结肠癌细胞株中的表达及其稳定表达的RNA干扰载体构建

[目的]检测结肠癌细胞株中ILK的mRNA水平，并构建针对ILK基因的特异性RNA干扰（RNAi）表达载体。[方法]通过RT—PCR检测ILK基因在三种结肠癌细胞株（SW480、LO—VO及HT29）mRNA的表达：根据GenBank提供的ILK基因mRNA序列，设计具有小发夹结构的两条DNA序列，化学合成后经退火形成双链DNA片段，连接到经HindⅢ／BglⅡ酶切线性化的pSUPER—neo—EGFP／H1（pSNE／H1）质粒上，形成重组载体pSNE—ILK，转化大肠杆菌DH5d，提取质粒经HindⅢ／EcoRⅠ双酶切鉴定和测序鉴定，稳定转染结肠癌细胞HT29。[结果]①RT—PCR检测．ILK基因在三种结肠癌细胞株中均有表达，ILK／β-actin电泳条带强度比：SW480为0．63，HT29为0．65，LO-VO为0.33。②成功构建了针对ILK基因的特异性RNA干扰载体pSNE—ILK和对照的无关基因载体pSNE-Control，并稳定转染结肠癌细胞株HT-29。[结论]成功构建了针对ILK基因的特异性RNAi载体．并稳定转染HT29细胞，能有效抑制ILK基因，为下一步探讨ILK基因在结肠癌进程中的作用和结肠癌的基因治疗奠定了基础。     

黏附分子在肿瘤多细胞耐药中的研究进展

肿瘤细胞耐药是影响化疗敏感的主要原因之一。细胞黏附分子（cell adhesion molecules,CAMs）是细胞黏附功能的执行者,与“细胞-细胞”或“细胞-基质”相互作用所致整个细胞群体的耐药表型改变有关。此现象被称之为“多细胞耐药（multicellular resistance,MR）”或“群集耐药”。细胞黏附分子介导的多细胞耐药（或群集耐药）是目前细胞耐药领域研究的热点。大量实验研究表明,多种细胞黏附分子参与肿瘤多细胞耐药,为逆转肿瘤细胞耐药开辟了新的药物靶点。本文就细胞黏附分子在实体肿瘤中多细胞耐药的研究进展做一综述。     

肿瘤淋巴管生成与肿瘤淋巴道转移研究进展

侵袭和转移是恶性肿瘤患者致死的主要原因之一。临床及病理观察发现 ,当实体肿瘤生长到 1～ 2mm3的体积时 ,一般需要新生血管的生成 ,为肿瘤细胞提供营养 ,从而促进肿瘤组织进一步生长 ,并为肿瘤的转移提供血行通道。但大部分恶性肿瘤最初的转移并不是通过血管 ,而是通过淋巴道     

盐酸托烷司琼治疗顺铂引发恶心呕吐的疗效与安全性评价

【目的】比较国产盐酸托烷司琼和国产盐酸格拉司琼在治疗顺铂所引起的食欲减退、恶心、呕吐反应的疗效及安全性。【方法】采用随机、双盲、对照的方法将48例接受含顺铂化疗方案的恶性肿瘤患者分为两组进行研究,于化疗前1d开始给予盐酸托烷司琼(5mg/次,1次/d)或格拉司琼(3mg/次,1次/d),连用7d,同时观察患者食欲减退、恶心、呕吐等不良反应以及相关安全指标。【结果】国产盐酸托烷司琼和国产盐酸格拉司琼在治疗顺铂引起的食欲减退、恶心、呕吐反应方面以及安全性指标检测方面均无显著性差异(P>0.05)。【结论】国产盐酸托烷司琼治疗顺铂引起的食欲减退、恶心、呕吐反应的疗效和用药安全性与国产盐酸格拉司琼相当。     

耐药肿瘤细胞β-1整合素表达及对细胞凋亡的影响研究

目的：探讨耐药肿瘤粘附分子β－1整合素的表达以及其对细胞凋亡的影响。并寻找逆转耐药的途径。方法：采用人肺腺癌细胞株A549及耐阿霉素细胞株A549－ADR，免疫组化方法检测耐药细胞β－1整合素的表达；TUNEL法检测其对细胞凋亡的影响。结果：耐药细胞β－1整合素表达水平高于敏感细胞（P＜0．01）；敏感细胞及耐药细胞FN后其凋亡率较未结合FN细胞明显降低（P＜0．01）；用抗β－1整合素抗体阻断与FN结合耐药细胞株β－1整合素，其凋亡率与未阻断β－1整合素，但与FN结合的耐药株相比，有显著差异（P＜0．001）。结论：耐药肿瘤细胞β－1整合素表达增加，成为耐药表型；其机制主要通过抑制细胞凋亡产生耐药；阻断其作用可以逆转肿瘤耐药。     

细胞凋亡和PCNA表达与肝细胞癌分化状态关系的研究

无论在何阶段,肿瘤的生长速度由细胞增殖和丢失的比值所决定.本文利用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)介导的d-UTP缺口末端标记技术(TUNEL)和增殖细胞核抗原(PCNA)SP免疫组化方法对肝细胞癌(HCC)组织中细胞凋亡和细胞增殖现象进行研究,以探讨二者与HCC临床病理特征的关系.     

恶性肿瘤患者化疗前后血型抗原和抗体分析

目的　了解恶性肿瘤患者化疗对红细胞血型抗原和抗体的变化。方法　检测 1 0 4例患者化疗前后ABO血型抗原效价、抗 A、抗 B抗体效价 ,A型和O型患者化疗前后抗原抗体效价与积分做了比较 ;抗原检测法 ,将标准血清做倍比稀释加患者的红细胞 ,离心肉眼观察 ,不凝集的前 1管为抗原效价 ,同时以健康人的红细胞做对照 ;抗体检测方法 ,将A型者的血清做倍比稀释后加对应的红细胞 ,观察结果同抗原方法。结果　O型抗 A、抗 B效价与积分无差异 ,A型血型抗原化疗前后有显著性差异 ,化疗后明显低于化疗前 ,P <0 .0 5。O型、A型、B型男女患者抗原抗体效价与积分进行比较 ,O型与B型男女抗原抗体、效价与积分无差异 ;A型男女抗 B抗体效价与积分有显著性差异 ,女性明显高于男性。结论　提示在给肿瘤患者 ,特别是A型患者配血、鉴定血型时遇有正反不符、前后不符时要考虑是A抗原减弱 ,在给这些患者配血时 ,最好输注O型红细胞 ,已防输错血 ,防止发生意外。     

重视对肿瘤多细胞耐药的研究

肿瘤细胞耐药是影响化疗疗效和患者预后的主要原因之一。为克服肿瘤耐药 ,多年来人们对肿瘤的耐药机制进行了大量研究 ,并在细胞乃至分子水平有了诸多进展 ,这其中包括某些耐药基因 (如ＭＤＲ)和细胞表面蛋白 (如 ρ 糖蛋白和多药耐药相关蛋白等 )等介导的多药耐药[1 ] 。然而针对这些耐药机制所设计的治疗方法 ,尽管在体外研究中非常有效 ,但在临床上却难以奏效 ,特别对实体瘤的治疗更是令人失望。因此不难想象体内情况下肿瘤作为一个细胞群集体 ,其生物学特性和对药物的敏感性可能与体外单层培养时的单个癌细胞有着明显的差异。纵观既往的…