表达胰高血糖素样肽1重组腺伴随病毒载体的构建

背景:胰高血糖素样肽1(glucagon-like peptide-1,GLP-1)在人体内半衰期过短限制了其应用.目的:构建可表达GLP-1的重组腺伴随病毒.方法:将NT4-GLP-1融合基因插入腺伴随病毒包装质粒pSSHG-CMV中,构建pSSHG/NT4-GLP-1重组腺伴随病毒包装质粒.采用磷酸钙共沉淀法将辅助质粒pAAV/Ad、腺病毒质粒pFG140及pSSHG/NT4-GLP-1转染至293细胞系,用其感染Hela细胞.结果与结论:重组质粒pSSHG/NT4-GLP-1经限制性内切酶EcoRⅠ酶切鉴定可见342 bp的目的片段,说明NT4-GLP-1融合基因已经成功重组于腺伴随病毒包装质粒pSSHG-CMV内.免疫细胞化学结果显示,转染pSSHG/NT4-GLP-1重组腺伴随病毒包装质粒的Hela细胞内有大量棕黄色颗粒,阳性率达到70%以上,说明NT4-GLP-1重组腺伴随病毒在细胞中可以表达GLP-1.     

新护士急救技能的学习曲线分析

目的建立新护士急救技能培训的学习曲线,为科学设计培训方案提供参考。方法随机选取2016年新入职护士40名进行中心吸氧、院外CPR、心电监护、经口/鼻吸痰四项急救技能操作的培训,每名新护士每项操作8次,比较每项操作8个轮次的操作得分、操作合格率及操作时间。结果四项急救技能8个轮次操作得分、操作合格率及操作时间比较,差异具有统计学意义(P0.05);绘制学习曲线显示,5个轮次培训后,中心吸氧、院外CPR的操作得分、操作合格率及操作时间出现拐点而后趋于平稳;7个轮次培训后,心电监护、经口/鼻吸痰的操作得分、操作合格率及操作时间出现拐点而后趋于平稳。结论新护士中心吸氧、院外CPR两项急救技能的学习曲线约为5次;心电监护、经口/鼻吸痰的学习曲线约为7次。     

Notch信号通路在漆姑草醇提物诱导NB4细胞分化中作用

目的探讨Notch信号通路在漆姑草(HSJ)醇提物诱导人急性早幼粒白血病细胞(NB4)分化中的作用。方法实验设对照组和低、中、高剂量漆姑草组(30、60、120μg/m L);作用NB4细胞48 h后,采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)比色法检测NB4细胞增殖抑制率;Wright-Giemsa染色法观察NB4细胞形态;Real time-PCR检测Jagged1、Notch1、c-myc m RNA表达;Western blot法检测Jagged1、Notch1、c-myc蛋白表达。结果漆姑草作用NB4细胞后,细胞增殖受到明显抑制;与对照组比较,漆姑草组NB4细胞形态向成熟细胞改变,可见核/浆比例减小,核形呈肾形核或分叶核;与对照组比较,30、60、120μg/m L漆姑草组NB4细胞中Jagged1 m RNA表达量[分别为(0.78±0.10)、(0.32±0.15)、(0.07±0.02)]降低,Notch1 m RNA表达量[分别为(1.27±0.14)、(1.39±0.23)、(1.53±0.30)]升高,c-myc m RNA表达量[分别为(0.88±0.05)、(0.67±0.02)、(0.47±0.16)]降低,差异均有统计学意义(均P0.05);与对照组比较,30、60、120μg/m L漆姑草组NB4细胞中Jagged1蛋白表达量[分别为(0.95±0.10)、(0.69±0.02)、(0.59±0.01)]降低,Notch1蛋白表达量[分别为(0.56±0.08)、(0.81±0.03)、(1.33±0.14)]升高,c-myc蛋白表达量[分别为(0.82±0.14)、(0.70±0.07)、(0.65±0.20)]降低,差异均有统计学意义(均P0.05)。结论漆姑草能诱导NB4细胞向成熟细胞方向分化,其分化诱导作用机制可能与Notch信号通路有关。     

奥利司他对肥胖伴非酒精性脂肪性肝病的作用及危险因素的影响

探讨奥利司他(orlistat)在治疗肥胖伴非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)中的作用。选择体重指数(BM I)在25和32之间,伴有肝功能异常的NAFLD患者30例,给予奥利司他120mg,日三次口服,治疗24周。治疗结束后,所有患者的体重、BM I、腰围、腰臀比及血压明显下降(P值均<0.001);肝功能中ALT、AST、GGT、Tch、TG及IR与治疗前相比有明显改善(P值均<0.001);肝脏CT密度值及肝/脾CT密度比值均显著增加(P值均<0.001)。奥利司他可有效地减少NAFLD患者肝脏内脂肪沉积,改善肝功能和相关代谢综合征,可作为肥胖伴NAFLD的药物治疗选择。     

盐酸利多卡因应用于会阴切开缝合术中的止痛效果分析

目的探讨盐酸利多卡因应用于会阴切开缝合术中的止痛效果。方法 100例产妇,根据随机抽取的方法分为对照组和观察组,每组50例。对照组采用盐酸利多卡因注射液行会阴神经阻滞麻醉术,按常规程序缝合;观察组采用盐酸利多卡因注射液行会阴神经阻滞麻醉术,缝合伤口前加盐酸利多卡因局部麻醉止痛。比较两组患者止痛效果以及依从率。结果观察组中、重度疼痛比例分别为16.00%、6.00%,均低于对照组的38.00%、22.00%,轻度疼痛比例78.00%高于对照组的40.00%,差异均有统计学意义(P<0.05)。观察组患者依从率96.00%高于对照组的72.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论盐酸利多卡因应用于会阴切开缝合术中的止痛效果显著,可以提高缝合的依从率。     

流动儿童预防接种服务利用状况及影响因素分析

目的调查了解现阶段流动儿童预防接种服务利用状况,并分析其影响因素。方法由专业人员参考以往文献及数据,设计统一的问卷调查,遵循分层随机抽样原则,筛选获得1604名无当地户籍且7岁及7岁以下的流动儿童,收集其预防接种的相关数据,并对其监护人进行问卷调查,获得监护人基本信息、获得预防接种通知情况及其形式及接种单位的地址及咨询方式,并运用单因素分析方法得出以上数据与流动儿童建证数据相关情况。结果收集获得有效问卷1574份,其中1574名无当地户籍且7岁及7岁以下流动儿童中持有预防接种证的占78.54%,接种证在原籍的占10.95%,没有接种证的占10.51%;获得预防接种通知情况及其形式、接种单位的地址及咨询方式均具有明显的统计学意义;监护人文化程度越高,流动儿童建证率越高;家庭月收入水平越高,流动儿童建证率越高;预防接种部门服务态度、管理秩序较差,接种等待时间较长。结论针对影响流动儿童对预防接种的相关影响因素,建议通过完善流动儿童预防接种通知模式,提升预防接种部门的服务水平及提高监护人人员的接种意识,来逐步提高本地区流动儿童预防接种服务利用状况。     

rL-RVG体外抑制肺癌细胞增殖并促进其凋亡

目的将表达狂犬病毒糖蛋白的重组LaSota株新城疫病毒疫苗(rL-RVG)感染至A549肺腺癌细胞,观察其对肺癌细胞增殖和细胞凋亡的影响。方法采用直接感染的方法将rL-RVG感染至A549细胞,采用Western blot法检测rL-RVG中RVG和NDV蛋白在A549细胞内的表达;MTT法检测rL-RVG对细胞增殖的影响,TUNEL法检测rL-RVG对A549细胞凋亡的影响;AnnexinⅤ-FITC/PI染色结合流式细胞检测术检测A549细胞凋亡情况;Western blot法检测caspase-3的表达,并与对照组LaSota株进行比较,PBS组为空白对照组。结果 A549细胞感染rL-RVG后RVG蛋白和NDV蛋白都稳定表达,MTT法结果显示细胞增殖明显被抑制,rL-RVG组抑制率高于LaSota组。A549细胞凋亡增多,其中流式细胞检测术中显示rL-RVG组早期凋亡细胞较其他2组增多,差异有统计学意义(P0.05),TUNEL检测凋亡指数增加,rL-RVG组较其他2组增多,差异有统计学意义(P0.05)。Western blot法显示促凋亡蛋白caspase-3表达增加,加入caspase抑制剂Z-VAD-FMK后,caspase-3蛋白表达明显降低。结论 rL-RVG感染A549细胞后能在细胞内稳定表达,rL-RVG可抑制肺癌细胞生长、促进肺癌细胞凋亡,效果优于野生LaSota株。