乳腺癌细胞中miR-1246、ZO-1、vimentin的表达及相关性研究

目的 检测miR-1246、ZO-1、vimentin在乳腺正常上皮细胞MCF10A和乳腺癌癌细胞MCF7、MDA-MB-231中的表达,并探讨miR-1246在促进乳腺癌上皮-间质化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)中的作用。 方法 用荧光定量PCR法检测乳腺正常上皮细胞MCF10A、乳腺癌细胞MCF7、MDA-MB-231中miR-1246的相对表达量,用免疫印迹法检测乳腺正常上皮细胞MCF10A、乳腺癌细胞MCF7、MDA-MB-231中紧密连接蛋白ZO-1、波形蛋白vimentin的表达情况。采用SPSS 16.0统计软件分析,用U检验、t检验和Spearman相关分析分析数据。 结果 miR-1246和ZO-1在恶性乳腺癌细胞中的表达明显降低(P＜0.05),vimentin在恶性乳腺癌细胞中的表达明显增加(P＜0.05),miR-1246与ZO-1表达呈正相关(r=0.940,P＜0.05),miR-1246与vimentin表达呈负相关(r=-0.714,P＜0.05)。 结论 miR-1246表达水平与EMT标志物ZO-1、vimentin的表达水平存在一定的相关性,提示miR-1246在促进乳腺癌EMT过程中扮演重要角色。      

熊果酸对肺癌细胞株A549及SPCA1细胞周期的抑制作用

目的 研究熊果酸(ursolic acid,UA)对肺癌细胞株A549及SPCA1细胞周期的抑制作用,探讨其分子机制。方法 采用MTS法检测不同浓度UA作用不同时间对A549及SPCA1细胞的增殖抑制作用;光镜下观察细胞形态学变化;流式细胞仪检测不同浓度UA对A549及SPCA1细胞周期分布的影响;实时荧光定量PCR分析UA作用下A549及SPCA1的相关分子表达情况。结果 MTS结果显示UA对A549及SPCA1细胞具有增殖抑制作用,且呈时间和剂量依赖性。经UA作用后,光镜下可见A549及SPCA1细胞增殖受到抑制,细胞出现变圆、回缩和脱落。流式细胞仪结果显示在UA作用后,A549及SPCA1细胞周期抑制在G₀/G₁期,S期和G₂/M期的比例降低。实时荧光定量PCR结果表明,UA作用后A549及SPCA1细胞cyclinD1 mRNA、cyclinE mRNA、Ankrd17 mRNA表达水平降低,p27 mRNA、p16 mRNA表达增加,Ankrd17 mRNA表达变化差异无统计学意义。结论 UA能明显抑制A549及SPCA1细胞增殖,呈时间和剂量依赖性,该作用是通过将细胞周期抑制在G₀/G₁期实现的。其分子机制可能与上调p27和p16的表达,下调cyclinD1和cyclinE的表达有关。     

RT-PCR检测结肠癌患者外周血CEA mRNA的意义

目的　了解结肠癌患者外周血CEAmRNA的水平。方法　采用荧光定量RT PCR技术 ,检测结肠癌患者 73例 ,健康志愿者 30例外周血CEA mRNA的水平。结果　 73例结肠癌患者外周血CEAmRNA的水平为 (10 6 0 0 .0± 2 0 6 6 7.5 )copies/ml,其中38例阳性 ,阳性率为 5 2 .1%。健康志愿者未检测到CEAmRNA。CEAmRNA水平与肿瘤病理分期和分化程度相关 ;血清CEA阳性组中CEAmRNA的阳性率显著高于CEA阴性组 (P <0 .0 1) ;结论　外周血CEA mRNA可作为结肠癌辅助诊断指标 ,定量检测外周血CEA mRNA有助于结肠癌微转移的监测     

六西格玛法在缩短门诊患者生化检验报告等待时间中的应用

运用六西格玛管理法,对检验科生化检验报告流程进行调查、分析,找出影响患者等待时间长短的主要原因并予以分析,提出改进措施。改进后门诊患者生化报告等待时间由改进前的平均155.9分钟缩短至115.9分钟,明显节约了患者时间,提高了患者对检验服务的满意度。     

腹腔镜与部腹卵巢切除术对血清白细胞介素—6和C—反应蛋白水平的比较

白细胞介素-６(ｉｎｔｅｒｌｅｕｋｉｎ-６，ＩＬ-６)是诱导肝细胞合成Ｃ-反应蛋白(Ｃ-ｒｅａｃｔｉｖｅＰｒａｔｅｉｎ，ＣＲＰ)的主要细胞因子,择期手术后血清ＩＬ-６和ＣＲＰ水平是反映手术损伤程度的敏感指标［１］。作者对比腹腔镜卵巢切除术(ＬＯ)与剖腹卵巢切除术(００)手术前、后血清ＩＬ-６和ＣＲＰ反应水平,以比较两种不同卵巢切除手术方式的手术损伤程度。资料和方法一、一般资料选择卵巢良性肿瘤择期行单纯卵巢切除术患者４０例,随机分为ＬＯ组和００组各２０例。两组病例全身情况评估按美国麻醉医师协会(ＡＳＡ)分类方法［２］…     

原花青素对三阴性乳腺癌增殖和糖酵解的影响

目的 探讨原花青素对三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231增殖和糖代谢的影响.方法 加入不同浓度原花青素处理的三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-231和乳腺细胞MCF-10A,24h后CCK-8试剂盒检测2株细胞活性;分别检测原花青素处理后,MDA-MB-231细胞乳糖和ATP的生成以及己糖激酶和丙酮酸激酶活性;蛋白质印迹法...     

同源重组构建临床分离金黄色葡萄球菌rbf基因阴性突变株

目的利用同源重组技术敲除金黄色葡萄球菌rbf基因,构建金黄色葡萄球菌临床分离株金黄色葡萄球菌20(SAU20)rbf基因的阴性突变株。方法构建pBT2-Δrbf质粒后将之电转入金黄色葡萄球菌RN 4220中,再次将pBT2-Δrbf质粒转入金黄色葡萄球菌临床分离株SAU20;利用pBT2载体对温度敏感的特点,使含重组质粒的SAU20在40℃多次传代,最终筛选出金黄色葡萄球菌rbf基因的阴性突变株。结果成功构建pBT2-Δrbf质粒,pBT2-Δrbf质粒被转入SAU20后,筛选到可疑突变株,经PCR及DNA测序证实SAU20 rbf基因被ermB基因置换。结论利用同源重组技术敲除了金黄色葡萄球菌rbf基因,完成了金黄色葡萄球菌临床分离株SAU20 rbf基因的阴性突变株的构建,为今后研究金黄色葡萄球菌生物膜形成过程中rbf基因的作用及其机制提供了实验载体。     

宫颈脱落细胞hTERC基因扩增在宫颈病变筛查中的应用与意义

目的探讨FISH(原位荧光杂交)技术在宫颈病变筛查中的意义。方法应用FISH技术检测正常女性45名,宫颈异常病变患者208例宫颈脱落细胞hTERC(人端粒酶)基因的扩增,并通过与病理检查结果和液基薄层形态结果的对比分析FISH技术在宫颈病变筛查中的应用与意义。结果在生理盐水涂片、直接涂片标本和TCT(液基薄层)三种可选标本中,以TCT低渗制片操作方法简单快速,玻片背景最为清晰,杂交成功率最高。以TCT分组的受试者中,正常组、ASC组、LSIL组、HSIL组、SCC组分别为2.2%(1/45)、4.8%(2/41)、73.0%(84/115)、95.2%(20/21)、100%(31/31);以病理活检分组的受试者中,正常者组、炎症者组、CINⅠ组、CINⅡ期组、CINⅢ期组、SCC组分别为2.2%(1/45)、4.8%(2/41)、70.5%(31/44)、82.5%(33/40)、100%(21/21)、100%(31/31);在CINⅠ期、CINⅡ期、CINⅢ期、SCC组中hTERC基因扩增杂交信号≥3∶3型的异常细胞数占总异常细胞数的百分比分别为26.0%、52.1%、65.9%、90.7%,呈渐进上升趋势。结论 FISH检测宫颈脱落细胞hTERC基因扩增,以TCT低渗制片法最简便实用;宫颈脱落细胞中hTERC基因的异常扩增随着宫颈病变程度的加深呈现趋势性上升,FISH检测hTERC基因扩增可望成为宫颈病变筛查新的措施。     

台州地区5613例孕早期妇女TORCH三项病原体感染情况调查分析

目的:了解台州地区孕早期妇女TORCH[包括弓形虫(TOX)、风疹病毒(RV)、巨细胞病毒(CMV)]的感染情况。方法:应用化学发光免疫分析法测定5613例孕早期妇女血清中TORCH-IgM及IgG抗体水平。结果:TOX-IgM、RV-IgM、CMV-IgM抗体阳性率分别为0.75%、1.64%、0.96%。调查发现,弓形虫及风疹病毒相对高发于秋冬季节而巨细胞病毒感染在夏秋季节发病率较高。在TORCH-IgG抗体中,CMV-IgG的阳性率最高,达90.45%。结论:台州地区育龄妇女存在一定的TORCH感染率,因此在孕早期或孕前进行TORCH-IgM抗体检测非常必要。     

脑膜炎患者血清和脑脊液C-反应蛋白水平的变化

为观察各型脑膜炎患者血清和脑脊液（ Ｃ Ｓ Ｆ）中 Ｃ 反应蛋白（ Ｃ Ｒ Ｐ）浓度变化情况，应用速率散射比浊法对 ８３ 例各型脑膜炎患者和１６ 例正常对照进行检测。结果化脓性脑膜炎（化脑）、结核性脑膜炎（结脑）患者血清和 Ｃ Ｓ Ｆ中 Ｃ Ｒ Ｐ与正常对照组比较均显著增高（ Ｐ＜ ０００１），化脑显著高于结脑（ Ｐ＜ ０００１），病毒性脑炎（病脑）与正常对照比较无显著差异（ Ｐ＞ ００５）。血清 Ｃ Ｒ Ｐ升高幅度较 Ｃ Ｓ Ｆ大。结果表明血清和 Ｃ Ｓ Ｆ中 Ｃ Ｒ Ｐ检测对于颅内感染的诊断、鉴别诊断以及疗效观察有一定的参考价值。