单侧外固定架结合辨证用药治疗股骨干骨折39例体会

作者采用单侧外固定架结合骨折三期辨证用药治疗股骨干骨折 39例 ,结果全部愈合 ,平均愈合时间 3.5月 ,半年后随访 ,肌肉无委琐 ,膝关节伸屈活动自如     

shRNA真核表达质粒介导的RNA干扰对人结肠癌LoVo细胞mTOR基因表达的抑制作用

目的探讨shRNA真核表达质粒介导的RNA干扰技术对人结肠癌LoVo细胞哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）基因表达的抑制作用。方法合成编码shRNA的特异性DNA序列，连接到质粒pGenesil-1，采用脂质体Lipofectamine^TM 2000转染LoVo细胞，G418筛选4周。根据转染质粒的不同，实验分为3组：A组（正常对照组）为未转染的正常培养LoVo细胞，B组（阴性对照组）为转染pGenesil-1空载体质粒，C组（阳性实验组）为转染质粒pGenesil-1-mTOR。采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法检测LoVo细胞mTOR基因mRNA表达，免疫印迹（Western blot）法检测mTOR蛋白表达。结果双酶切产物琼脂糖凝胶电泳显示，重组质粒pGenesil-1-mTOR和空载体质粒pGenesil-1分别切出一条410、350bp大小的片段。G418筛选的转染细胞在倒置荧光照相显微镜下可观察到绿色荧光。C组LoVo细胞mTOR基因mRNA表达水平明显低于A组（P〈0.05），表达抑制率为73．0％。C组LoVo细胞mTOR蛋白表达水平明显低于A组（P〈0．05），表达抑制率为72．5％。结论shRNA真核表达质粒介导的RNA干扰可明显抑制人结肠癌LoVo细胞mTOR基因表达。     

希罗达与草酸铂治疗老年中晚期胃癌疗效分析

目的观察希罗达与草酸铂治疗老年中晚期胃癌的近期疗效和不良反应。方法治疗组希罗达2000mg/m2·d分两次口服,1～14d、草酸铂85mg/m2静脉滴注第1d,21d为1周期,对照组将希罗达改为5-氟脲嘧啶600mg/m2·d静脉滴注,第1～5d,并加用亚叶酸钙增敏,其余同治疗组。结果两组均无CR,治疗组PR20例,总有效率55.6%,总临床受益69.4%;对照组PR18例,总有效率52.9%,总临床受益67.6%;不良反应主要是消化道反应、骨髓造血功能抑制、末梢神经炎、肝功能受损,治疗组分别是22例、17例、16例、11例,各占61.1%、47.2%、44.4%、30.6%;对照组分别是29例、30例、16例、13例,各占80.6%、88.2%、47.1%、38.2%。结论希罗达与草酸铂组治疗老年中晚期胃癌疗效较5-氟脲嘧啶组略高,不良反应轻,是一种安全、简便、有效、可行的治疗方案,但P〉0.05,无统计学差异。     

小鼠胚胎及人包皮成纤维细胞按比例制成混合饲养层上的人胚胎干细胞生长状态★

目的：人胚胎干细胞传代培养的关键是抑制其自发分化、保证细胞的全能性。欲解决以小鼠胚胎成纤维细胞或人包皮成纤维细胞为常规饲养层培养人胚胎干细胞时存在的问题，观察两者按一定比例制成的混合饲养层上人胚胎干细胞的生长状态。 方法：实验于2006-04/2007-07在海南医学院附属医院生殖医学中心完成。①对象：包皮来自于行包皮环切的儿童，由海南医学院附属医院泌尿外科提供，儿童家属对治疗及实验均签署知情同意书，实验经医院医学伦理委员会批准。人胚胎干细胞系HN-1由本实验室从人类囊胚中分离培养并鉴定。清洁级孕12.5~14.5 d的胎鼠11只，实验过程中对动物的处置符合动物伦理学标准。②实验方法：将去除头、四肢和内脏的胎鼠按常规胰蛋白酶反复消化法获得细胞悬液进行接种培养，待生长汇合后冻存部分原代细胞，用丝裂霉素C处理2.0~3.0 h后，按1×108 L-1密度接种于明胶包被的中心皿内，即小鼠胚胎成纤维细胞饲养层。人包皮成纤维细胞的分离培养与饲养层制备同上。上述两种成纤维细胞分别计数后，按1∶0，3∶1，1∶1， 1∶3，0∶1比例混合，然后以1×108 L-1密度接种于明胶包被的中心皿内，即混合饲养层。③实验评估：观察体外传代培养的人胚胎干细胞在3种不同饲养层上的生长状态。并对生长在混合饲养层上的人胚胎干细胞进行碱性磷酸酶检测、OCT-4表达免疫组化检测、OCT-4及端粒酶mRNA表达RT-PCR检测。撤除饲养层，观察人胚胎干细胞体外分化情况。 结果：①不同饲养层上人胚胎干细胞的生长状态比较：生长在小鼠胚胎成纤维细胞和人包皮成纤维细胞上的人胚胎干细胞克隆扁平、不饱满，而生长在混合饲养层上的人胚胎干细胞克隆饱满、厚实，其克隆形态显著好于其他两种饲养层。②人胚胎干细胞在不同比例混合饲养层上的生长状态比较：小鼠胚胎成纤维细胞：人包皮成纤维细胞按1∶1混合时，人胚胎干细胞显著堆积生长，克隆边缘清晰、隆起明显且饱满，按1∶3混合时无明显变化，优于其余3种混合比例。③混合饲养层上人胚胎干细胞未分化状态的检测：碱性磷酸酶染色及OCT-4抗原表达均呈强阳性，分别在200~300 bp和300~400 bp处可见OCT-4和端粒酶 mRNA表达的特异性条带。④体外分化实验：能形成拟胚体，贴壁后人胚胎干细胞可分化为多种形态的细胞。 结论：①与小鼠胚胎成纤维细胞或人包皮成纤维细胞常规饲养层相比，二者混合饲养层能够更好的支持人胚胎干细胞的体外传代培养，获得更佳的克隆形态。②小鼠胚胎成纤维细胞与人包皮成纤维细胞的混合比例为1∶1时效果较好。     

高渗盐水注射提高对小鼠肝癌冷冻疗效的实验研究

目的　探讨冷冻联合高渗盐水提高对小鼠肝癌疗效的可行性。方法　H2 2肝癌小鼠随机分为 5组 :Ⅰ组为根治性冷冻组 ,Ⅱ组为姑息性冷冻组 ,Ⅲ组为高渗盐水注射组 ,Ⅳ组为姑息性冷冻联合高渗盐水治疗组 ,Ⅴ组为对照组。结果　Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组均能显著抑制肿瘤生长 ,抑瘤率分别为 99.7%、83.6 %、78.9%、99.3%,以上各组与Ⅴ组比较 ,差异均有显著性。Ⅰ组与Ⅳ组比较 ,无显著性差异 (P >0 .0 5 )。结论　冷冻与高渗盐水联合治疗是一种有效的肝癌综合治疗模式。     

鼻咽癌误诊为颅底斜坡脊索瘤1例

<正>病人,男,41岁。头痛、视物模糊4月余。曾于外院行MRI检查示:颅底斜坡区见2 cm×1.8 cm×1.6 cm占位病变,T1WI信号不均匀,以低信号为主,斜坡皮质骨信号中断,髓质骨高信号区消失,代之以不均匀信号的软组织肿块影,T2WI表现为不均匀高信号,诊断为颅底斜坡脊索瘤,     

肝硬化腹水并发低钠血症102例临床分析

低钠血症是肝硬化腹水患者常见并发症之一 ,发生率高达5 9 .4%[1] ,且症状和体征常被肝硬化的症状所掩盖。为了加强对低钠血症的认识 ,我们对 2 0 8例肝炎后肝硬化腹水患者进行了回顾性分析 ,现报告如下。1　临床资料1.1　一般资料2 0 8例肝炎后肝硬化腹水患者为我院 1991年 1月～ 2 0 0 1年6月间部分资料完整的住院病人 ,男 16 7例 ,女 41例 ,年龄 2 3～6 8岁 ,腹水病程 1周～ 5年。诊断符合 1990年上海病毒性肝炎学术会议修订的标准。Ｃｈｉｌｄ Ｐｕｇｈ分级[2 ] :Ａ级 6 8例 ,Ｂ级 6 7例 ,Ｃ级 73例。 2 0 8例患者并发低钠血症 10 2例 ,…     

铝镁加混悬液联合枳术宽中胶囊治疗胆汁反流性残胃炎的临床观察

目的观察铝镁加混悬液联合枳术宽中胶囊治疗胆汁反流性残胃炎的疗效。方法将120例胆汁反流性残胃炎患者用随机数字表法随机分为治疗组和对照组,每组60例。治疗组给予铝镁加混悬液每次1.5 g,3次/d口服;枳术宽中胶囊,每次1.29 g,3次/d口服。对照组给予兰索拉唑胶囊30 mg,每晚1次口服,多潘立酮片10 mg,3次/d口服。两组在治疗6周后比较临床疗效。结果两组患者治疗后临床症状评定比较,治疗组总有效率90.0%,对照组总有效率65.0%,差异有统计学意义(P<0.01)。电子胃镜下总有效率治疗组为78.3%,对照组为46.7%,两组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论铝镁加混悬液联合枳术宽中胶囊治疗胆汁反流性残胃炎疗效确切。     

地塞米松诱导结肠癌细胞凋亡的机制研究

目的：探讨地塞米松（Ｄｅｘ）体外抑制结肠癌细胞株的增殖并诱导其凋亡的作用机制。方法：采用ＭＴＴ及流式细胞仪检测细胞增殖抑制及凋亡,ＲＴ-ＰＣＲ检测ＧＲ、ＩκＢ及Ｂcl-２的表达改变,凝胶迁移或电泳迁移率实验（ＥＭＳＡ）检测Ｄｅｘ作用过程中的ＮＦ-κＢ活性改变。结果：Ｄｅｘ体外作用后,对４种结肠癌细胞株ＬｏＶｏ、ＨＣＴ-１１６、ＨＴ-２９及ＳＷ-４８０均有抑制作用,ＬｏＶｏ和ＨＣＴ-１１６细胞作用最显著。流式细胞仪检测显示,Ｄｅｘ（１×１０^-4mol/L）诱导７２ｈ后,在ＬｏＶｏ和ＨＣＴ-１１６细胞检测到细胞凋亡和坏死峰,明显高于未加Ｄｅｘ的对照组,具有显著性差异。ＲＴ ＰＣＲ检测显示Ｄｅｘ作用后ＧＲα、ＩκＢ表达升高,Ｂｃｌ-２无明显改变,ＥＭＳＡ结果也显示ＮＦ-κＢ活性明显降低。结论：地塞米松可能通过上调ＧＲα、ＩκＢ表达,抑制ＮＦ-κＢ活性来抑制ＬｏＶｏ细胞的增殖,并诱导其凋亡。     

抑制NRP2表达对淋巴管内皮细胞小管成型的影响

目的 探讨抑制神经纤毛蛋白质2(NRP2)基因表达对人淋巴管内皮细胞(LECs)体外形成小管能力的影响.方法从人新鲜包皮中分离纯化LECs,并进行鉴定.实验设NRP2-RNAi/LECs组、mock/LECs组和hECs组,三组分别转染pGensil-NRP2(携带NRP2 siRNA的真核表达载体)、pGensil-1(空载体)及正常LECs细胞.采用RT-PCR和Western blotting检测NRP2 mRNA和蛋白的表达;绘制细胞生长曲线以观察各组细胞生长的差异.对细胞进行三维胶培养,计数小管样结构的数量,并测量小管外径、内径和管壁厚度.结果 与hECs组和mock/LECs组比较,NRP2-RNAi/LECs组NRP2表达水平明显下调(P<0.05),而前两组间无显著差异(P>0.05).生长曲线显示三组细胞的增殖能力无显著差异,均于接种后3～5d进入对数生长期,6～7d进入停滞期.三维胶培养形成的管样结构在NRP2-RNAi/LECs组很少见,其管样结构的数量及小管外径、内径、管壁厚度都明显低于mock/LECs组和hECs组(P<0.05),而后两组间无显著差异(P>0.05).结论 抑制NRP2的表达可抑制LEGs在体外形成小管的能力,并可能抑制肿瘤淋巴管的生成.