GSTT1及CYP1A1基因多态性与肺癌易感性关系

目的 探讨细胞色素P4501A1(CYP1A1)和谷胱甘肽硫转移酶T1(GSTT1)基因多态性与肺癌易感性的关系.方法 用等位特异性PCR(AS-PCR)及多重PCR技术分析106例肺癌患者和250名健康人的CYP1A1、GSTT1基因多态性、基因型分布频率和交互作用.结果 携带CYP1A1(Val/Val)/GSTT1(-)基因型的人患肺癌的风险明显增加(P=0.025);吸烟与肺癌易感性有关(P=0.037),吸烟者患肺癌的风险明显增加(OR=1.628.95%CI=1.028～2.577);携带CYP1A1(Val/Val)基因的吸烟者较携带CYP1A1(Ile/Ile)基因型的不吸烟者易患肺癌(P=0.033);携带GSTT1(-)的吸烟者患肺癌的风险明显增加(P=0.045).结论 CYP1A1突变型和GSTT1(-)基因型是肺癌的可疑易患因素,二者对肺癌的发生有协同作用,但单独携带CYP1A1突变型或GSTT1(-)基因型肺癌易感性差异无统计学意义,吸烟与肺癌易感性有关;CYP1A1突变型、GSTT1(-)基因型与吸烟在肺癌的发生上有相互促进作用.     

黄芪合剂抗尼古丁和焦油作用的研究

目的研究黄芪合剂对尼古丁和焦油引起小鼠超氧化物歧化酶活性和脂质过氧化物含量变化的影响.方法以超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)活性和脂质过氧化物(Lipid peroxidation,LPO)为指标,采用邻苯三酚自氧化法和荧光法测定SOD的活性和LPO的含量.结果1%LD50尼古丁组的SOD活性为(418.4±78.0)U/(g,Hb),黄芪合剂加1%LD50尼古丁组的SOD活性为(571.5±48.7)U/(g,Hb).2%LD50尼古丁组的SOD活性为(375.1±56.1)U/(g,Hb),黄芪合剂加2%LD50尼古丁组的SOD活性为(476.9±12.5)U/(g,Hb).1%LD50焦油组的SOD活性为(209.6±17.7)U/(g,Hb),黄芪合剂加1%LD50焦油组的SOD活性为(462.6±16.2)U/(g,Hb).2%LD50焦油组的SOD活性为(227.9±23.1)U/(g,Hb),黄芪合剂加2%LD50焦油组的SOD活性为(431.2±21.2)U/(g,Hb).1%LD50尼古丁组的LPO含量为(2.8140±1.3691)nmol/ml,黄芪合剂加1%LD50尼古丁组的LPO含量为(0.4823±0.0032)nmol/ml.2%LD50尼古丁组的LPO含量为(2.7328±1.3902)nmol/ml,黄芪合剂加2%LD50尼古丁组的LPO含量为(0.3420±0.1018)nmol/ml.1%LD50焦油组的LPO含量为(1.1566±0.603)nmol/ml,黄芪合剂加1%LD50焦油组的LPO含量为(0.3671±0.1223)nmol/ml.2%LD50焦油组的LPO含量为(1.4468±0.5940)nmol/ml,黄芪合剂加2%LD50焦油组的LPO含量为(0.5050±0.3101)mnol/ml.黄芪合剂可使不同浓度的尼古丁和焦油降低的SOD活性升高,可使不同浓度的尼古丁和焦油升高的LPO降低.结论黄芪合剂有抗脂质过氧化作用,对尼古丁和焦油引起小鼠超氧化物歧化酶活性和脂质过氧化物含量的改变有保护作用.     

黄芪合剂对被动吸烟引起的SOD和LPO变化的影响

目的：研究黄芪合剂对被动吸烟引起小鼠超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性和脂质过氧化物（lipid peroxide，LPO）含量的影响。方法：以超氧化物歧化酶活性和脂质过氧化物为指标，采用邻苯三酚自氧化法和荧光法测定SOD的活性和LPO的含量。站果：黄芪合剂可使被动吸烟降低的SOD活性升高，可使被动吸烟升高的LPO降低。结论：黄芪合荆有抗脂质过氧化作用，对被动吸烟引起小鼠超氧化物歧化酶活性和脂质过氧化物含量的改变有保护作用。     

中药降血脂作用的研究进展

高血脂可引起严重的心血管疾病,利用中药治疗高脂血症是现在较为有效的方法。本文介绍了高脂血症的发病机制、降血脂中药的种类及作用机制,并综合近几年来的研究,对单味中药及复方制剂降血脂作用的实验研究进行了探讨,为其在临床中的应用提供参考。     

植物生物反应器生产药物蛋白的研究进展

利用植物生物反应器生产药物蛋白已成为目前研究的热点.随着分子生物学新技术的发展,植物生物反应器将会成为抗体、血液替代品、疫苗生产的有效途径.本文综述了植物生物反应器生产药物蛋白的研究进展,并对提高药物重组蛋白在转基因植物中表达的研究策略进行了探讨.     

烟焦油对小鼠肺多环芳烃受体和细胞色素P4501 A1基因mRNA水平的影响

目的研究烟焦油对小鼠肺多环芳烃化合物受体(AHR)、细胞色素P4501A1(CYP1A1)基因表达的影响.方法以5.29、10.58、15.87 mg/kg的烟焦油腹腔注射分别染毒小鼠,用提纯RNA试剂盒提取小鼠肺脏的RNA,用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测AHR和CYP1A1基因的表达,以β-actin作为内对照,分析不同处理剂量和不同处理时间后AHR和CYP1A1基因表达情况.结果以5.29 mg/kg烟焦油染毒小鼠72 h,AHR基因表达量的相对值为0.554±0.023,与吐温-80组(0.484±0.045)比较,差异有统计学意义(P＜0.05).以10.58、15.87 mg/kg的烟焦油染毒小鼠48和72 h,AHR基因表达量的相对值分别为0.555±0.014、0.606±0.051和0.566±0.014、0.684±0.069,分别与吐温-80组(0.486±0.060、0.484±0.045)比较,差异有统计学意义(P＜0.05或P＜0.01).CYP1A1基因表达量的相对值分别为1.535±0.021、1.643±0.046和1.624±0.056、1.739±0.038,分别与吐温-80组(1.436±0.016、1.404±0.036)比较,差异有统计学意义(P＜0.01).结论烟焦油在一定的浓度和时间内可使AHR和CYP1A1基因的表达增加,烟焦油对AHR基因表达的调控早于CYP1A1基因.     

基于系统药理学探讨乌头生物碱治疗类风湿性关节炎的分子机制

目的:基于系统药理学探讨乌头生物碱中化学成分对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症反应的影响及其机制。方法:TCMSP数据库结合口服生物利用度(OB)≥30%,类药性(DL)≥0.18搜集草乌化学成分,通过Pubchem数据库以及Swiss Target Prediction数据库预测各化学成分的潜在作用靶点;从GeneCards数据库搜集类风湿性关节炎(RA)靶点,两者取交集,DAVID数据库进行基因本体(GO)分类富集分析和Pathway富集分析。Cytoscape构建"化学成分-潜在作用靶点-信号通路-疾病"网络拓扑图;结合STRING数据库和Cytoscape软件构建蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络。体外实验通过LPS刺激RAW264.7巨噬细胞,建立体外巨噬细胞炎症模型,采用蛋白免疫印迹法检测乌头生物碱中化学成分对LPS诱导的RAW264.7细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α),环氧化酶(COX-2)蛋白表达的影响以及对JAK激酶(Janus kinase),核转录因子-κB(NF-κB)信号通路主要蛋白表达的影响。结果:通过TCMSP数据库检索以及查阅文献共得到27个化学成分,经筛选后(OB≥30%,DL≥0.18)得到12个化学成分,通过数据库预测并筛选后得到177个潜在作用靶点,与4 329个RA靶点取交集后得到97个靶点作为治疗RA的潜在作用靶点。通过DAVID数据库富集到生物过程(BP)经筛选后共32条(P<0.01,FDR<0.01);所处细胞中的位置(CC)经筛选后共有5个位置(P<0.01,FDR<0.01);分子功能(MF)经筛选后得到12种分子功能(P<0.01,FDR<0.01)。通过构建网络拓扑图说明乌头生物碱在治疗RA时不同的化学成分可作用于相同靶点,同一化学成分也作用于不同的靶点;乌头生物碱既可通过不同靶点与同一通路相连接,也可通过同一靶点与不同通路相连接,说明不同的靶点具有协同作用,充分体现了乌头生物碱多成分、多靶点、多通路的复杂机制。加入不同浓度的LPS刺激(质量浓度为0~200μg·L-1)能够显著上调RAW264.7巨噬细胞COX-2蛋白表达水平(P<0.05),说明炎症模型成功。与正常组比较,RAW264.7细胞炎症模型中TNF-α,COX-2蛋白表达显著增加(P<0.05);与模型组比较,BLA,songorine,yunaconitine,karacoline各组TNF-α,COX-2蛋白表达水平不同程度降低(P<0.05)。与正常组比较,RAW264.7细胞炎症模型中白细胞介素-1受体相关激酶4(IRAK-4),NF-κB,JAK1,信号转导与转录激活因子3(STAT3)水平显著增加(P<0.05);与模型组比较,BLA,songorine,yunaconitine,karacoline各组IRAK4,NF-κB,JAK1,STAT3水平显著降低(P<0.05)。结论:基于系统药理学和体外实验对相关靶点和信号通路进行分析,为了解RA的发病机制,揭示乌头生物碱治疗RA的分子机制提供新见解,也为蒙药在现代医学中的应用提供新思路。     

蒙族和汉族人群 CYP1A1基因MspⅠ位点的多态性

目的研究内蒙古地区蒙族和汉族人群CYP1A1基因Msp Ⅰ位点的多态性。方法应用聚合酶链反应．限制性片段长度多态技术对无血缘关系的80名蒙族和120名汉族个体的基因型进行分析。结果内蒙古地区蒙族和汉族人群CYP1A1基因wt／wt、wt／vt和vt/vt 3种基因型的频率分布分别是：蒙族35．0％、48．7％、16．3％和汉族33．3％、52．5％、14．2％。两者之间经X^2检验差异无统计学意义（P〉0．05）。结论内蒙古地区蒙族和汉族人群CYP1A1 基因Msp Ⅰ的基因型频率分布无明显差异。     

甲基麻黄碱对小鼠记忆障碍的影响

目的：研究甲基麻黄碱对小鼠记忆获得,巩固及再现障碍的影响。方法：采用水迷宫法。结果：表明甲基麻黄碱可以显著改善东莨菪碱所致记忆获得障碍,亚硝酸钠所致记忆巩固障碍及乙醇所致的记忆再现障碍。结论：甲基麻黄碱对小鼠记忆障碍有改善作用。     

蒙药山沉香醋酸乙酯提取物中开环异落叶松树脂酚和总木脂素含量测定

目的：分别建立高效液相色谱法和紫外-可见分光光度法测定蒙药山沉香（Syringa pinnatifolia.）醋酸乙酯提取物中开环异落叶松树脂酚[（-）-secoisolariciresinol,SECO]含量和总木脂素含量。方法：采用95%乙醇对山沉香加热回流提取,采用醋酸乙酯萃取。利用高效液相色谱法,测定山沉香醋酸乙酯提取物中SECO含量。色谱柱：Agilent C₁₈色谱柱,流动相：甲醇-0.1%甲酸溶液,流速：0.5 mL·min^-1,柱温：30℃,检测波长：280 nm。利用紫外-可见分光光度法,以SECO为标准品,于280 nm波长处测定山沉香醋酸乙酯提取物中总木脂素含量。结果：高效液相色谱法中,SECO质量浓度在0.028~0.280 mg·mL^-1范围内与峰面积线性关系良好,线性方程为：Y=2 838.6X+59.354（r²=0.999 7）;平均加样回收率（n=9）为99.27%,RSD为1.55%（n=9）。紫外-可见分光光度法中,SECO质量浓度在0.002 6~0.084 0 mg·mL^-1范围内与吸光度线性关系良好,线性方程为：Y=21.393X+0.03（r²=0.999 4）;平均加样回收率为100.06%,RSD为1.12%（n=9）。结论：该方法操作简便可靠,适用于山沉香醋酸乙酯提取物中总木脂素及有效成分的含量测定及质量控制。