远端缺血后处理对大鼠全脑缺血再灌注损伤的影响

目的 探讨远端缺血后处理对大鼠全脑缺血再灌注损伤的影响.方法 健康成年雄性SD大鼠128只,体重为200～ 250 g,采用随机数字表法,将其随机分为4组(n=32):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、I/R+远端缺血后处理组(I/R+ RIPoC组)以及远端缺血再灌注组(RI/R组).采用改良的Pulsinelli四动脉阻断法建立大鼠全脑缺血再灌注模型.S组不制备全脑缺血再灌注模型;I/R+ RIPoC组于再灌注开始行双侧股动脉缺血15 min,再灌注15 min,共计3个循环;RI/R组仅行双侧股动脉缺血15 min,再灌注15 min,共计3个循环.于再灌注24、48 h时取脑组织,行海马CA1区和额叶皮层凋亡细胞计数,测定海马CA1区Bcl-2和Bax的表达水平,并于再灌注48 h测定超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)的活性及丙二醛(MDA)的含量;再灌注4d时行Morris水迷宫实验;再灌注7d时取脑组织,计算海马CA1区和额叶皮层神经元密度.结果 与S组比较,I/R组再灌注时凋亡细胞计数升高,Bcl-2和Bax表达上调,神经元密度、SOD和CAT活性降低,MDA含量升高,逃避潜伏期明显延长,穿越原平台次数与第2象限停留时间百分比降低(P≤0.Ol),RI/R组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05);与I/R组比较,I/R+ RIPoC组再灌注时凋亡细胞计数降低,Bcl-2表达上调,Bax表达下调,神经元密度、SOD和CAT活性升高,MDA含量降低,逃避潜伏期缩短,穿越原平台次数与第2象限停留时间百分比升高(P＜0.01).结论 远端缺血后处理可减轻大鼠全脑缺血再灌注损伤,其机制与抑制脂质过氧化反应,调节Bcl-2与Bax的平衡抑制细胞凋亡有关.     

瑞芬太尼复合丙泊酚或七氟醚麻醉在颅内手术中的应用比较

目的比较TCI微泵靶控输注瑞芬太尼／丙泊酚全凭静脉麻醉以及瑞芬太尼／七氟醚静吸麻醉对颅内肿瘤切除术后苏醒时间、苏醒质量的影响。方法选用100例ASAⅠ～Ⅱ级择期行颅内肿瘤摘除术的患者,分为瑞芬太尼／丙泊酚组（RP组,n=50）和瑞芬太尼／七氟醚组（RS组,n=50）。2组均用TCI微泵靶控输注瑞芬太尼;RP组靶控输注异丙酚而RS组吸入七氟醚。观察并记录不同时段血流动力学的变化及术后麻醉恢复的时间,苏醒期不良反应的发生率。结果2组患者术中均能维持足够的麻醉深度（BIS值=55±5）,术中血流动力学平稳;2组患者在围苏醒期恢复时间,RP组均短于RS组;麻醉恢复期RP组不良反应发生率明显少于RS组。结论瑞芬太尼复合异丙酚静脉麻醉在颅内手术围术期血流动力学稳定,拔管条件优,并发症少。     

PI3K/Akt信号通路在七氟醚后处理减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中的作用

目的 评价磷脂酰肌醇3激酶/蛋白质丝氨酸苏氨酸激酶(PI3K/Akt)信号通路在七氟醚后处理减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤中的作用.方法 雄性SD大鼠64只,体重300～350 g,随机分为4组(n=16):局灶性脑缺血再灌注组(IR组)、七氟醚后处理组(SP组)、七氟醚后处理+Wortmannin组(SW组)和Wortmannin组(W组).采用电凝法阻断左侧大脑中动脉,夹闭双侧颈总动脉60 min恢复灌注的方法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型.再灌注即刻SP组和SW组吸入2.5%七氟醚60 min,夹闭双侧颈总动脉30 min时SW组和W组股静脉输注Wortmannin 0.6 mg/kg.于再灌注24、48、72 h时行神经功能评分,最后1次评分后处死大鼠取脑,测定脑梗死体积,采用Western blot法检测左侧脑组织磷酸化Akt(p-Akt)和磷酸化Bad(p-Bad)的表达水平.结果 与IR组相比,SP组和SW组各时点神经功能评分升高,再灌注72 h时脑梗死体积比降低,脑组织p-Akt和p-Bad表达上调(P＜0.05),W组上述指标差异无统计学意义(P＞0.05);与SP组相比,SW组各时点神经功能评分降低,再灌注72 h时脑梗死体积比升高,脑组织p-Akt和p-Bad表达下调(P＜0.05).结论 PI3K/Akt信号通路激活后p-Bad表达上调可能参与了七氟醚后处理减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的过程.     

七氟醚迟发性预处理对大鼠局灶性脑缺血 损伤后NF-κB表达的影响

［摘要］目的：比较不同浓度七氟醚诱导的迟发性脑保护效应以及对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后不同时间点NF-κB蛋白表达的影响。方法：健康SD雄性大鼠60只,体质量220～300 g,随机分为缺血再灌注组（I/R组）、2.5%七氟醚组（Sevo 1组）和4.0%七氟醚组（Sevo 2组）。采用大鼠大脑中动脉闭塞(middle cerebral artery occlusion, MCAO) 制备局灶性脑缺血再灌注模型。I/R组于脑缺血前24 h吸入纯氧,而Sevo 1组及Sevo 2组分别于脑缺血前24 h 吸入2.5% 或4.0%七氟醚+氧气混合气体60 min。缺血2 h,再灌注24和72 h后取脑组织,运用2,3,5-氯化三苯四唑（2, 3, 5-triphenyltetrazolium chloride,TTC）染色测算脑梗死体积百分比,免疫组化染色检测NF-κB蛋白表达。结果：与I/R组相比,Sevo 1组和Sevo 2组再灌注24和72 h脑梗死体积显著减少（P＜0.05）。I/R组脑组织顶叶皮层缺血半影区NF-κB表达明显增加,七氟醚能显著抑制脑缺血再灌注后24和72 h缺血半影区NF-κB表达的增加（P＜0.05）。结论：七氟醚对大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤具有迟发性保护作用,其机制可能与降低NF-κB蛋白表达有关。     

利多卡因的脑保护机制

利多卡因具有脑保护作用，其机制与下列因素有关：阻断膜Na+-K+交换,ATP的消耗减少,因而减少自由基的产生,同时抑制缺血脑细胞Ｋ+外流及游离脂肪酸释放；抑制膜上电压依赖性Ca2+通道，减轻H2O2诱导的脂质过氧化反应；有效减轻缺血再灌注时神经细胞离子的紊乱,阻止细胞内Na+浓度的升高,降低突触前的谷氨酸释放；抑制线粒体的有氧代谢,降低线粒体内能量物质代谢速率,趋缓乳酸水平的升高,从而减轻细胞内乳酸的堆积,提高细胞对缺氧的耐受力；抑制缺血脑灌注后脑型肌酸激酶的释放,从而使脑缺血时的神经膜保持稳定；改善细胞渗透压和ATP的利用及Ca2+的清除等,从而起到保护神经的作用。     

线粒体ATP敏感性钾通道在七氟醚预处理减轻大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用

目的 探讨线粒体ATP敏感性钾通道(mito-K_(ATP)通道)在七氟醚预处理减轻大鼠脑缺血再灌注损伤中的作用.方法 健康雄性SD大鼠100只,体重250～300 g,随机分为5组(n=20):假手术组(S组)、缺血再灌注组(I/R组)、七氟醚预处理组(Sevo组)、mito-K_(ATP)通道阻断剂5-羟基葵酸(5-HD)组及5-HD+七氟醚预处理组(5-HD+Sevo组).采用线栓法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注模型,七氟醚预处理方法:吸入2.4%七氟醚60 min后吸入纯氧洗脱15 min,停止吸入七氟醚后24 h时制备脑缺血再灌注模型.分别于再灌注6、24 h时进行神经功能损伤评分,计算脑梗死体积百分比,采用Western blot法测定蛋白激酶Cε(PKCε)膜转位水平.结果 与S组比较,其余各组大鼠再灌注6、24 h时神经功能损伤评分升高,脑梗死体积百分比及脑组织PKCε膜转位水平升高(P<0.05);与I/R组、5-HD组及5-HD+Sevo组比较,Sevo组大鼠再灌注6、24 h时神经功能损伤评分降低,脑梗死体积百分比降低,再灌注6 h时脑组织PKCε膜转位水平升高(P<0.05).结论 mito-K_(ATP)通道介导了七氟醚预处理减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤的作用,其机制可能与调控PKCε膜转位有关.     

顺式阿曲库铵和维库溴铵用于妇科腹腔镜手术肌松作用的对比研究

目的比较顺苯磺酸阿曲库铵和维库溴铵在妇科腹腔镜手术麻醉中的肌松作用。方法选择40例妇科腹腔镜手术患者,年龄24～47岁,ASAI或Ⅱ级。分为顺苯磺酸阿曲库铵组（I组,n=20）和维库溴铵组（Ⅱ组,n=20）。分别予顺苯磺酸阿曲库铵或维库溴铵0．15mg／kg诱导,T1恢复5％时追加0．05mg／kg维持。观察心率、血压、全身皮肤、T1、TOF值变化。结果2组无明显血流动力学变化和皮肤潮红等现象。2组肌松作用起效时间、临床肌松维持时间、追加量后临床肌松维持时间、恢复指数差异无统计学意义（P〉0．05）;顺苯磺酸阿曲库铵组肌松药注毕到T1恢复75％时间较短（P〈0．05）。结论顺苯磺酸阿曲库铵与维库溴铵肌松强度相似,恢复更快,是适用于快通道妇科腹腔镜手术麻醉的肌松药选择。     

线粒体KATP通道介导七氟醚预处理对大鼠的脑保护作用

目的 探讨七氟醚预处理对大鼠局灶性脑缺血-再灌注(IR)损伤的保护作用.方法 雄性SD大鼠60只随机均分为七氟醚预处理组(S组)、5-HD+七氟醚预处理组(HS组)、5-羟葵酸(5-HD)组(H组)、IR组和假手术组(C组).采用大脑中动脉线栓法缺血2 h、再灌注24 h制备大鼠局灶性脑IR模型(MCAO).S组于缺血前1 h经半密闭的吸入箱吸入七氟醚(呼气末浓度维持2.4%,持续30 min).HS、H组缺血前或七氟醚预处理前经尾静脉注射5-HD(10 mg/kg).再灌注24 h后用Zea Longa评分法进行神经功能缺陷评分,TTC染色法测大鼠脑梗死容积,免疫组化法测定大脑皮质Bcl-2和Bax蛋白表达.结果 与IR组比较,S组神经功能缺陷评分明显降低,脑梗死容积显著减少(P＜0.05);但HS、H、IR组神经功能缺陷评分和脑梗死容积差异无统计学意义.S组Bcl-2、Bax表达明显高于HS、H、IR组.结论 七氟醚预处理对局灶性脑IR损伤有一定程度的保护作用.其保护作用与mitoKATP通道的激活有关,并可能是通过调控凋亡相关基因Bcl-2和Bax的表达来实现.     

ERK1/2在谷氨酸诱导PC12细胞铁死亡中的作用

目的评价细胞外调节蛋白激酶(ERK)1/2在谷氨酸诱导PC12细胞铁死亡中的作用。方法 PC12细胞采用随机数字表法分为6组(n=21):对照组(C组)、谷氨酸组(Glu组)、谷氨酸+ERK1/2过表达组(Glu+ERK1/2-OE组)、谷氨酸+ERK1/2质粒空载体组(Glu+Vec组)、谷氨酸+ERK1/2敲减组(Glu+si-ERK1/2组)和谷氨酸+ERK1/2 SiRNA阴性对照组(Glu+si-NC组)。Glu组使用终浓度为6 mmol/L的谷氨酸处理72 h, C组加入等量PBS缓冲液处理72 h, Glu+ERK1/2-OE组转染ERK1/2过表达质粒、Glu+Vec组转染质粒空载体、Glu+si-ERK1/2组转染ERK1/2 si-RNA、Glu+si-NC组转染siRNA阴性对照后48 h再使用终浓度为6 mmol/L的谷氨酸处理72 h。采用酶标仪测定细胞存活率、乳酸脱氢酶(LDH)活性、谷胱甘肽(GSH)、铁离子及丙二醛(MDA)含量, 流式细胞仪测定线粒体膜电位(MMP)和脂质活性氧(Lip-ROS)水平。结果与C组比较, Glu组细胞存活率、GSH含量和M...