原代骨髓基质细胞共培养对K562细胞伊马替尼敏感性及细胞周期的影响

背景：与骨髓基质细胞黏附可介导白血病细胞耐药,而对于黏附功能缺陷的慢性髓细胞白血病而言,骨髓基质细胞在伊马替尼耐药形成中的作用及其机制尚不清楚。 目的：构建慢性髓细胞白血病骨髓基质细胞-K562细胞共培养模型,探讨慢性髓细胞白血病骨髓基质细胞共培养对K562细胞伊马替尼敏感性及细胞周期的影响。 方法：自慢性髓细胞白血病患者骨髓分离、培养骨髓基质细胞,与K562细胞共培养构建骨髓基质细胞-K562细胞共培养模型。MTT法检测伊马替尼IC50,Annexin V-FITC/PI标记暴露于0.5 μmol/L伊马替尼72 h的K562细胞,流式细胞仪检测K562细胞凋亡率。收集与骨髓基质细胞共培养72 h的K562细胞,流式细胞仪检测细胞周期及细胞周期蛋白(Cyclin A、Cyclin D1及cyclin E)的表达。 结果与结论：基质细胞共培养组及悬浮培养组K562细胞伊马替尼IC50分别为(0.52±0.02) μmol/L和(1.27± 0.05) μmol/L,两者比较差异有显著性意义(P < 0.01)。0.5 μmol/L伊马替尼处理72 h,共培养组及悬浮培养组凋亡率分别为(15.48±4.17)%和(32.01±6.83)%,两者比较差异有显著性意义(P < 0.01)。与骨髓基质细胞共培养72 h的K562细胞G₀-G₁期细胞的比例为(48.81±8.27)%,明显高于悬浮培养组(25.78±3.26)%(P < 0.01)。慢性髓细胞白血病骨髓基质细胞共培养能介导K562细胞对伊马替尼耐药,其机制可能与基质细胞共培养使K562细胞发生G₀/G₁细胞周期阻滞有关。中国组织工程研究杂志出版内容重点：干细胞;骨髓干细胞;造血干细胞;脂肪干细胞;肿瘤干细胞;胚胎干细胞;脐带脐血干细胞;干细胞诱导;干细胞分化;组织工程全文链接：     

白血病骨髓基质细胞黏附对Jurkat细胞周期及调控的影响

目的观察白血病骨髓基质细胞-Jurkat细胞共培养模型中Jurkat细胞的化疗敏感性,探讨基质细胞黏附对Jurkat细胞周期及其调控蛋白表达的影响。方法常规分离、培养骨髓基质细胞,Jurkat细胞与^60Co照射的基质细胞层黏附培养,构建基质细胞-Jurkat细胞共培养模型,扫描电镜观察,通过MTT法测定Jurkat细胞DNR的IC50,流式细胞仪检测Jurkat细胞周期分布,Westernblot检测黏附培养4、24和48h Jurkat细胞周期调控蛋白cyclin A、cyclin E及p27的表达。结果悬浮培养Jurkat细胞的IC50为0．45μmol／L,而白血病基质细胞及正常基质细胞黏附组IC50分别为2．30μmol／L和1．78μmol／L。Jurkat细胞与基质细胞黏附培养24h,Go—G1期细胞的比例明显升高（48．74％±8．77％）,与悬浮对照组（27．83％±1．86％）比较差异有统计学意义P〈0．01,G2-M期细胞比例明显降低为2．01％±1．17％,与悬浮对照组（20．33％±1．84％）比较差异有统计学意义P〈0．01;Western Blot检测发现cyclin A、cyclin E的表达在Jurkat细胞黏附培养4h时即有所下调,24h和48h尤为明显,而p27的表达则出现上调,以48h最为明显。结论白血病基质细胞黏附能介导白血病细胞耐药,其机制可能与白血病细胞周期改变有关。     

液氮喷雾治疗传染性软疣123例

我院采用手提式液氮治疗机喷雾冷冻治疗传染性软疣取得了满意疗效。 临床资料:123例均为门诊病例,其中男性68例,女性55例,年龄3～38岁之间,3～22岁79例,占64.2％,病程14天—6个月。 治疗效果 皮损少者治疗1次,皮损多者治疗2～3次,每次间隔15天,结果全部治愈。治愈后于1—3个月期间复发者有12例,占9.7％。治愈后皮损处部分病人留有色素斑,无需处理,三个月后逐渐恢复。 治疗方法:喷射口距皮肤损害处1.5公分,对准     

肺癌的肺外表现(附17例病例分析)

肺癌多数病人就诊时已属晚期,而肺癌的肺外表现往往是原发性肺癌的早期表现之一,近年来才引起临床上注意。本文仅就见到的肺外临床表现作一分析,对早期肺癌的发现可能有所裨益。临床资料我院胸外科自1973—1979年共收治肺癌151例,有肺外表现者17例,其中肺性肥大性骨关节病16例(其中合并男性女乳2例),癌     

68例胃冠状静脉栓塞术的护理

河南省人民医院、大连市第三人民医院,自1985年以来,采用胃冠状静脉栓塞术治疗门脉高压68例,取得较好效果。现将护理体会报告如下。一、术前护理 1.饮食的选择,门脉高压病人由于病程长、消化吸收能力差,需给予易消化、高维生素、高糖饮食,有利于肝脏的修复和改善机体的情况。对有食道静脉曲张的患者应给予软食;有腹水的患者,应给低盐或无盐饮食;肝功能受损害的病人应给予低蛋白饮食;出血急诊病人应暂禁食;对呕血和便血的病人须在出血停止48～72小时酌情给予流质饮食。     

ZNRD1小干扰RNA对HL-60/VCR细胞耐药性逆转的研究

目的:探讨转录相关锌带蛋白基因(zincribbondomaincontaining1protein,ZNRD1)作为靶分子进行白血病多药耐药基因治疗的可行性。方法:Westernblot检测ZNRD1在白血病细胞中的表达;构建ZNRD1基因的小干扰RNA载体并将其转导入HL60/VCR细胞,G418筛选稳定转染细胞株;MTT法检测细胞转染前后生长速度和药物敏感性的变化;Westernblot检测细胞转染前后凋亡相关蛋白bcl2、Bax和耐药相关蛋白Pgp、MRP的表达变化。结果:ZNRD1在HL60/VCR细胞中的表达明显高于HL60细胞;成功建立了低表达ZNRD1的白血病细胞模型;转染后的细胞对长春新碱和阿霉素的敏感性增强,且低表达Pgp和bcl2。结论:该小干扰RNA真核表达载体能在一定程度上逆转了白血病细胞的耐药性。     

电穿孔转染K562细胞的效率研究

目的:探讨脂质体转染与电穿孔转染的效率,观察电转染对K562细胞凋亡的影响。方法:以GFP为报告基因,通过脂质体转染及电穿孔两种方式转染K562细胞,荧光显微镜下观察并计算转染效率,Annexin V和PI观察细胞凋亡率。结果:电转染较脂质体转染K562细胞的效率高,电穿孔转染效率10%左右,脂质体转染效率小于1%。电穿孔时K562细胞凋亡率为40%。结论:电转染较脂质体转染K562细胞的效率高,但细胞凋亡率也高。     

42例淋巴瘤尸检多脏器浸润的病理变化

为了解淋巴瘤病人脏器的病理变化,对因淋巴瘤死亡并做尸检的42例,将各脏器的病理改变进行了总结。结果表明,42例尸检病例中肺部发生病理变化39例,占92·8%,其中胸腔积液24例,胸膜炎症2例,肺播散18例,肺充血水肿17例,肺内感染12例,肺萎缩9例,肺出血3例;心脏改变24例,占全部病例的57·1%,其中心包积液21例,心包播散7例,心壁播散7例;胃肠道播散14例,占33·3%,其中肠穿孔5例。结论:淋巴瘤病人出现呼吸功能障碍、心功能不全、肠梗阻及其他胃肠道症状时,临床常常很难明确原因,通过本组病例,明确了上述症状均由淋巴瘤肿瘤细胞多脏器广泛浸润所致。了解这些脏器的病理变化特点,对淋巴瘤的诊治有一定的临床指导意义。     

血清降钙素原在恶性血液病感染中的变化及临床意义

我们对恶性血液病发热患者进行了降钙索原（procalcitonin，PCT）测定，并对其临床意义分析如下。     

自身免疫性溶血性贫血的临床分析

本文对我院2000～2004年75例自身免疫性溶血性贫血（autoimmune hemolyticanemia，AIHA）患者的临床资料进行回顾性分析如下。