表位依赖型急性期戊型肝炎诊断抗原的制备与抗原性分析

目的 原核表达制备表位依赖型戊型肝炎诊断抗原,并对其抗原性及其在急性戊肝诊断的性能进行评价.方法 以包含密码子优化的GST、HEV优势表位的H15质粒为模板,PCR获取GST-HEV优势表位片段,将其插入表达质粒pET 43.1a中,在大肠杆菌中进行表达;利用亲和层析和阴离子交换层析纯化目的蛋白;利用Western Blotting技术对目的蛋白抗原性进行鉴定;建立HEV-IgM抗体检测ELISA方法,初步评价其对阴、阳血清样本的鉴别能力.结果 获取高度均质的表位依赖型急性戊肝诊断抗原;WB实验表明目的蛋白不但可以被anti-GST单克隆抗体识别,还可以被戊肝急性期血清相应抗体所识别;分别对60份戊肝急性期血清、阴性血清进行检测,发现其与临床和实验室诊断结果一致性较高.结论 原核表达与层析纯化可以获取抗原性优异的表位依赖型急性戊肝诊断抗原,偶联HRP后可应用于HEV-IgM ELISA血清学检测.     

肝病毒表面抗原“a”决定簇病毒样颗粒的构建和鉴定

目的 构建一个以乙肝核心抗原为骨架的病毒样颗粒,乙肝表面抗原＂a＂决定簇呈现在该病毒样颗粒的表面.方法 乙肝adr血清型的HBsAg蛋白＂a＂抗原决定簇（aa139～148,CSKPTDGNCT）插入到HBcAg的第78位天冬氨酸和第79位脯氨酸之间,密码子优化之后基因合成,酶切后连接到表达载体上,在大肠埃希菌中进行表达,纯化后对蛋白进行电镜观察、ELISA检测抗原性、免疫兔后检测免疫原性.结果 构建得到预期的原核表达质粒,并在大肠埃希菌中表达,纯化后电镜观察为病毒样颗粒,ELISA检测证实具有良好的抗原性和免疫原性.结论 成功获得预期的带乙肝表面抗原＂a＂决定簇的病毒样颗粒,为其应用奠定基础.     

止眩宁治疗椎-基底动脉供血不足眩晕临床观察

目的:观察止眩宁治疗椎基底动脉供血不足眩晕患者的临床疗效。方法:将40例椎-基底动脉供血不足眩晕患者随机分为治疗组(止眩宁治疗组)22例、对照组(西比灵治疗组)18例。结果:治疗组、对照组总有效率分别为86.36%、72.22%。结论:两组比较,治疗组有效率高于对照组(P<0.05),由此证明止眩宁治疗此病的疗效优于西比灵的治疗。     

RGD修饰的低分子量鱼精蛋白/CpG ODN复合物的制备及抗肿瘤活性

目的 利用RGD修饰的低分子量鱼精蛋白(low molecular weight protamine, LMWP)包裹CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG oligodeoxynucleotide, CpG ODN)制备复合物,评价其对CpG ODN抗肿瘤活性的影响。方法 基于静电引力将RGD-LMWP与CpG ODN以不同质量比共孵育制备复合物,并利用凝胶阻滞实验分析RGD-LMWP对CpG的缩合能力;使用zeta电位/粒度仪对RGD-LMWP/CpG复合物的粒径和zeta电位进行表征;采用体外细胞实验评价RGD-LMWP/CpG复合物对肿瘤细胞的摄取效率和细胞毒性。结果 采用共孵育法成功制备了RGD-LMWP/CpG复合物。当RGD-LMWP与CpG的质量比为3∶1时,RGD-LMWP能完全压缩CpG。此时,复合物的平均粒径和zeta电位分别为119.7±1.2nm和47.9±0.5mV。体外细胞实验表明,与游离CpG比较,RGD-LMWP/CpG(3∶1)复合物能显著提高人子宫颈癌细胞株(HeLa)细胞对CpG的摄取效率,抑制HeLa细胞的增殖。结论RGD-LMWP与CpG结合形成的复合...