丙型肝炎病毒亚单位融合蛋白的表达及免疫原性测定

目的获得高纯度的丙型肝炎亚单位融合蛋白并评价其免疫原性。方法利用原核表达系统,以pET—11d作为载体,在大肠埃希菌BL21（DE3）中经IPTG诱导表达获得融合蛋白,之后采用DEAE阴离子交换和镍离子柱亲和层析进行纯化。通过Western Blot验证融合蛋白的抗原活性。同时以该蛋白免疫实验动物后测定血清中的抗体滴度。结果成功获得很高纯度的丙型肝炎亚单位融合蛋白,EIA显示融合蛋白能够诱生出高滴度的抗体。结论原核表达系统表达的丙型肝炎病毒亚单位融合蛋白具有较强的免疫原性,为丙型肝炎病毒治疗性和预防性疫苗的研制提供了一条新的途径。     

新疆居民HBV基因型的分布及其与临床表现关系的初步研究

目的 了解新疆地区乙肝患者HBV基因型的分布及其与临床表现的关系.方法 从2000余份血清中筛选出HBsAg阳性血清200份.利用巢式PCR法扩增血清中HBV DNA S基因进行测序并分型;统计分析基因型分布及与临床表现的关系.结果 新疆HBV有B、C、D三个基因型,其中B基因型10例（7.8%）,C基因型58例（45.7%）,D基因型59例（46.5%）.C基因型中汉族51例（87.9%）,D型中汉族27例（45.7%）,维吾尔族24例（40.7%）.结论 新疆地区HBV基因型以C、D型为主,少量为B型.C型以汉族为主,D型中汉族和维吾尔族占多数.C型与更严重的疾病及转归有关.     

新疆地区居民乙肝病毒基因型的初步研究

目的 初步确定新疆地区乙肝患者乙肝病毒基因型的基本情况.方法 对在新疆地区采集的2000余份血清中检测得到200份HBsAg阳性的血清,利用巢氏PCR法扩增其S基因并测序,用MEGA3软件将测序结果与GenBank中的HBV标准序列进行分析,构建并绘制系统发生树,分析基因型.结果 在200份样本中.127例(63.5%)成功检出基因型,其中B基因型10例(7.8%),C基因型58例(45.7%),D基因型59例(46.5%).结论 新疆地区HBV基因型以C、D型为主,少量为B型.     

肝病毒表面抗原“a”决定簇病毒样颗粒的构建和鉴定

目的 构建一个以乙肝核心抗原为骨架的病毒样颗粒,乙肝表面抗原＂a＂决定簇呈现在该病毒样颗粒的表面.方法 乙肝adr血清型的HBsAg蛋白＂a＂抗原决定簇（aa139～148,CSKPTDGNCT）插入到HBcAg的第78位天冬氨酸和第79位脯氨酸之间,密码子优化之后基因合成,酶切后连接到表达载体上,在大肠埃希菌中进行表达,纯化后对蛋白进行电镜观察、ELISA检测抗原性、免疫兔后检测免疫原性.结果 构建得到预期的原核表达质粒,并在大肠埃希菌中表达,纯化后电镜观察为病毒样颗粒,ELISA检测证实具有良好的抗原性和免疫原性.结论 成功获得预期的带乙肝表面抗原＂a＂决定簇的病毒样颗粒,为其应用奠定基础.     

重大活动保障传染病核酸检测应急实验室体系建设

传染病核酸检测是各项重大活动保障中至关重要的部分。本研究建立了重大活动保障传染病核酸检测应急实验室体系建设规范及传染病核酸检测流程,同时为确保传染病检测体系顺利运行,建立了重大活动保障传染病检测实验室管理体系及后勤保障规范,为建设和优化重大活动保障体系,降低重大活动传染病传播风险、排除传染病传播隐患,防范国际新发传染病疫情在国内的发生和扩散提供了参考。