Runx3-flag基因重组腺病毒载体的构建及其在前列腺癌细胞中的表达和定位分析

目的:构建携带Runx3-flag的腺病毒载体,通过感染PC-3前列腺癌细胞,分析其在PC-3中的表达及定位.方法:将Runx3-flag连接至pShuttle-CMV上构建出pShuttle-CMV-Runx3-flag,线性化后转化至E.coli BJ 5183-AdEasy-1内进行同源重组,抽提质粒鉴定正确的即为pAd-Runx3-flag,Pac I酶切回收后转染人胚肾293细胞,经过包装、扩增和纯化后,半数组织感染量法(TCID50)测定病毒滴度.以pAd-Runx3-flag感染PC-3细胞,western blot检测Runx3-flag的表达,间接免疫荧光分析其定位.结果:构建了包含Runx3-flag的腺病毒,即pAd-Runx3-flag,测病毒滴度为1.1×108 TCID5/mL.Western blot显示Runx3-flag表达于PC-3细胞中,间接免疫荧光显示其表达于细胞核中.结论:成功构建出包含Runx3-flag的腺病毒载体,证实Runx3-flag可表达于PC-3细胞核中.     

NPHS2基因C（-601）T-C357T单倍型与IgA肾病的相关分析

目的：本研究充分利用大样本病人探讨NPHS2基因C（-601）T-C357 T单倍型对IgA肾病的影响。方法：选择经肾活检病理诊断确诊的原发性IgA肾病患者537例及年龄、性别、地域匹配的健康对照组494例,采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）方法检测NPHS2基因C（-601）T、C357 T多态性,同时选取单纯血尿和大量蛋白尿的IgA患者各16例进行PCR产物测序,对酶切结果进行验证。结果：①IgA肾病患者和健康对照中NPHS2基因C（-601）T、C357T基因型和等位基因频率分布均符合Hardy-Weinberg平衡定律（P〉0.05）。②将NPHS2基因C（-601）T、C357T多态性构建单倍型,发现NPHS2基因T-T单倍型在IgA肾病患者中的比例较健康对照组明显增高（0.062759 vs 0.1032438,P=0.00198）。结论：本研究发现T-T单倍型在IgA肾病患者中的比例明显增高,提示NPHS2基因T-T单倍型对临床IgA肾病的发生及严重程度具有重要作用,为IgA肾病遗传背景的研究以及进一步阐明NPHS2基因的功能均提供了重要线索。     

亚急性甲状腺炎41例临床分析

目的分析亚急性甲状腺炎的发病原因、临床特征、诊断方法和治疗措施。方法对41例亚急性甲状腺炎住院患者的流行病学特点、临床特征、治疗方法和结果进行回顾性分析。结果亚急性甲状腺炎以40~50岁女性多见,秋冬季为多,约占60%;病因可能和病毒感染有关;多数患者有发热、头痛等全身症状,单侧甲状腺肿大和触痛很常见,68.3%患者有高代谢表现,血沉明显增快,大于50%患者出现血清TT3、TT4、FT3、FT4高于正常。90.2%患者的24 h甲状腺摄131I率小于10%;糖皮质激素和非甾体类抗炎药物对本病的疗效显著,少数患者出现糖皮质激素相关的高血压、血糖升高、低钾麻痹和精神症状。结论亚急性甲状腺炎的发病率近年来有所增加,临床表现易与多种疾病混淆,需认真评判甲状腺功能并结合组织活检准确诊断。肾上腺皮质激素对于该病疗效好,需仔细观察、及时处理一些可能的并发症。     

索拉非尼治疗转移性肾癌疗效与不良反应的关系

目的:探索索拉非尼在治疗转移性肾细胞癌（mRCC）患者中的不良反应与疗效之间的关系。方法:回顾性研究西京医院接受索拉非尼治疗的mRCC患者63例，利用卡方检验分析肿瘤控制率与不良反应的发生频率和严重程度的相关性，利用Kaplan-Meier方法分析16种不良反应，筛选出与患者PFS，OS相关的不良反应，将P＜0.05变量纳入多变量Cox比例风险回归模型进行进一步的多因素分析，确定独立预后因素。结果:63例接受索拉非尼治疗的患者中，完全缓解2例（3.2％），部分缓解16例（25.4％），疾病稳定37例（58.7％），疾病进展8例（12.7％）。中位PFS为12.0个月，中位OS为24.0个月。卡方检验结果示肿瘤控制率与不良反应的发生频率和严重程度相关（均P＜0.05）。多变量分析显示，更好的PFS的独立预后因素包括腹泻（OR 0.255,95％CI 0.130~0.500,P=0.000）和皮疹（OR 0.235,95％CI 0.114~0.482,P=0.000）。OS的独立预后因素包括腹泻（OR 0.454,95％CI 0.246~0.839,P=0.012），皮疹（OR 0.405,95％CI 0.211~0.776，P=0.006）和高血压（OR 0.373,95％CI 0.177~0.784,P=0.009）。结论:索拉非尼治疗mRCC患者的疗效与不良反应的发生频率和严重程度呈正相关。皮疹和腹泻是影响PFS的独立保护因素，皮疹，腹泻和高血压是影响OS的独立保护因素。这一结论仍需大量前瞻性研究证实。     

口岸生物因子突发事件应急演练的实践与思考

正近年来,国际国内恐怖主义层出不穷,严重威胁着人民群众生命健康安全。经济与和平研究所(Institute for Economics and Peace)公布的《全球恐怖主义指数(Global Terrorism Index)(2014)》显示,"9.11"事件后,全球恐怖主义活动增加了近5倍,随着IS等恐怖组织的猖獗,这一数据将持续增大。生物恐怖即是恐怖分子利用生物因子的致病作用,人为地施放,引起疾病的暴发、流行,造成目标人群死     

MSCT多平面重建对十二指肠憩室及其主要合并症的诊断价值

目的 探讨MSCT多平面重组对十二指肠憩室及主要合并症的诊断价值。方法 回顾性分析十二指肠憩室患者69例影像学资料,多平面重组评价憩室发生部位、大小、憩室内表现,以及是否合并肝内外胆管结石、胆管炎症、胆囊结石、胆囊炎、胰腺炎等合并症。结果 69例患者共检出十二指肠憩室89个,单发54例,双发12例,多发3例。发生在十二指肠降段61例,水平段4例,升段1例,降段与水平段多发憩室3例。主要合并症：憩室炎症5例;肝内外胆管结石58例并肝内外胆管扩张;胆管炎症9例;胆囊结石并胆囊炎8例;急性胰腺炎2例;单纯性胆总管扩张5例。结论 MSCT多平面重组能从不同方位对憩室本身进行评价,还可同时评价合并的胆胰疾病以及腹腔内其他病变,并初步判断是否与憩室有关。     

抗人CD3单链抗体/p53四聚功能域融合基因的构建及表达

目的：构建抗人CD3单链抗体(scFv)／p53四聚功能域融合基因，并进行真核表达及活性测定。方法：在已经构建抗人CD3 scFv和人IgG3上游铰链区／p53四聚功能域融合基因基础上，将抗人CD3 scFv克隆入载体pUC18／IgG3／p53中，构建抗人CD3 scFv／p53四聚功能域融合基因。经酶切鉴定及序列测定证实后，将融合基因克隆入真核表达载体pSecTag2-B中，并转染Hela细胞进行表达。表达产物纯化后，利用流式细胞仪进行活性测定。结果：获得了抗人CD3 scFv／p53四聚功能域融合基因，基因全长为882 bp，可编码294个氨基酸，与已发表的抗人CD3 scFv、人IgG3上游铰链区和人p53四聚功能域基因cDNA序列相一致。表达产物经SDS-PAGE和Western blot证实，为Mr约35000的特异蛋白条带。纯化后经流式细胞仪检测，可特异性地结合人外周血单个核细胞(PBMC)，亲和力高于scFv。结论：获得了可与PBMc特异性结合的抗人CD3 scFv四聚体，为进一步临床应用奠定了基础。     

3D腹腔镜联合胃镜手术治疗贲门失弛缓症疗效分析

目的 评估3D腹腔镜联合胃镜食管Heller肌层切开+Dor胃底折叠术治疗贲门失弛缓症的临床价值.方法 回顾性总结从2013年11月至2015年7月北京同仁医院胸外科进行的16例3D腹腔镜联合胃镜食管Heller肌层切开+Dor胃底折叠术治疗16例贲门失弛缓症的临床资料.结果 所有患者均顺利完成手术,手术时间40~100 min,平均手术时间60 min,术中出血量均小于30 ml,无严重术后并发症,全部治愈出院,术后住院时间6~12 d.术后1个月行上消化道造影,食管最大直径均较术前明显减少.术后1个月复查24 h食管压力测定及pH值监测,无反流性食管炎发生.随访时间10~30个月,16例临床症状均完全消失,无明确复发病例.结论 3D腹腔镜联合胃镜食管Heller肌层切开+Dor胃底折叠术治疗贲门失弛缓症是一种安全易行且有效的外科治疗手段,临床上具有广泛的推广价值.     

肌肉脂化率主观评分法的稳定性与可靠性研究

目的:比较3位阅片者肌肉脂化率主观评分结果的一致性,分析主观评分法与客观评分法的相关性,评价抗肌萎缩蛋白病中肌肉脂肪浸润主观评分法的稳定性及可靠性.方法:搜集本院2012年1月-2015年8月抗肌萎缩蛋白病患者194例,行双下肢横轴面T1WI及IDEAL-Quant序列扫描.在横轴面T1WI图像中,由3位不同阅片者分别对所有患者下肢肌肉脂肪浸润程度进行两次主观盲法评分;在IDEAL-Quant脂肪图中测量得出肌肉脂化率.利用kappa检验分析各位阅片者自身及不同阅片者之间主观评分结果的一致性,使用spearman相关模型分析主观评分与IDEAL-Quant序列脂化率定量结果的相关性.结果:在对所有大腿肌肉脂肪浸润的主观半定量评估中,三位阅片者两次阅片评分结果自身比较Kappa值分别为0.75、0.54、0.55;三位阅片者之间阅片评分结果Kappa值分别为0.54、0.23、0.22.主观评分结果与客观定量结果相关(r=0.60～0.92,P＜0.05).但主观评分估计的脂肪浸润程度高于客观定量结果.结论:主观评分法的结果相对稳定、可靠,但与临床经验有关;主观评分法会高估肌肉脂肪浸润程度.     

超微经皮肾镜取石术在直径1.5～2.5cm肾及输尿管上段结石患者中的应用

目的 探讨超微经皮肾镜取石术(UMP)应用于直径1.5～2.5 cm肾及输尿管上段结石患者中的安全性和有效性.方法 回顾性分析2018年6月-2020年6月宿迁市第一人民医院收治的60例直径为1.5～2.5 cm肾及输尿管上段结石患者的临床资料,均采用UMP治疗,分析患者手术时间、住院时间、手术成功率、结石清除率、并发...