CCC-HPF-2细胞基因组DNA可作为STR分型标准物质

目的 检测细胞培养传代过程中的基因稳定性,筛选符合中国人遗传特性的DNA标准物质,建立DNA标准细胞库.方法 通过显微镜下观察、免疫组织化学、核型分析检测细胞传代过程中形态、分子表达及核型是否稳定；应用PCR方法检测细胞的外源微生物及种属来源；STR检测验证细胞在传代过程中STR表达谱的平衡性及稳定性.结果 CCC-H...     

芳香化酶抑制剂在晚期乳腺癌中的临床应用

目的观察来曲唑(芙瑞)治疗绝经后晚期乳腺癌的疗效和不良反应。方法47例晚期乳腺癌患者13服来曲唑2．5mg，每天1次，4周为1个周期。结果可评价疗效的47例患者中，完全缓解(CR)4例(8．5％)，部分缓解(PR)21例(44．7％)，病情稳定(SD)19例(34．1％)，病情进展(PD)3例(6．38％)。结论来曲唑能有效治疗晚期乳腺癌，不良反应轻，患者耐受性良好。     

癌细胞粘附,位移和水解酶活性综合测定方法的建立

癌细胞粘附、位移和水解酶活性综合测定方法的建立李存玺顾蓓高进癌细胞粘附、位移和水解酶活性综合测定方法的建立@李存玺@顾蓓@高进...     

抗CD20单链抗体融合显性抗原肽的原核表达和其抑瘤活性研究

目的:人工设计并表达美罗华(C2B8)单链可变区抗体与李斯特菌溶细胞素O(Listeriolysin O,LLO)显性抗原表位构成的重组融合蛋白(Sc Fv-p LLO),初步分析其抗淋巴瘤细胞活性。方法:查询数据库获得美罗华(C2B8)单抗VH和VL基因序列,构建抗CD20单链抗体(Sc Fv)基因序列,选取LLO的2个CD4+T细胞表位,构建单链抗体融合抗原表位的重组蛋白基因序列,克隆至原核表达载体,经诱导表达纯化,流式细胞术和免疫共沉淀分析其与淋巴瘤细胞结合能力,细胞增殖实验测定其对淋巴瘤细胞生长的影响,凋亡实验分析其诱导淋巴瘤细胞凋亡的能力,淋巴细胞增殖实验分析其免疫原性。结果:成功诱导表达重组蛋白Sc Fv-p LLO。Sc Fv-p LLO可不同程度地靶向结合不同淋巴瘤细胞系,并明显抑制Raji细胞生长和诱导其凋亡。Sc Fv-p LLO可刺激免疫小鼠脾细胞增殖。结论:重组蛋白Sc Fv-p LLO保留了Sc Fv的功能,可靶向结合和抑制CD20阳性淋巴瘤细胞的生长,同时可激活机体免疫应答,为进一步研究其模拟瘤细胞表面抗原和作为瘤细胞疫苗佐剂的功能奠定基础。     

重组人EPO对rhIL-6诱导HepG2细胞和人原代肝细胞Hepcidin mRNA表达的抑制作用

本研究探讨EPO对人肝细胞株和原代肝细胞Hepcidin表达的影响和rhEPO在慢性病贫血治疗方面的机制。在HepG2人肝癌细胞及人原代肝细胞培养液中加入不同浓度的rhIL-6、rhEPO并作用不同时间。提取mRNA，行RT—PCR后进行紫外荧光显像，以Hepcidin与G3PDH的mRNA比值进行半定量分析；比较不同条件下人原代肝细胞及肝肿瘤细胞Hepcidin的表达水平。结果表明：rhIL-6能刺激HepG2细胞和人原代肝细胞Hepcidin mRNA表达升高，rhEPO对IL-6刺激Hepcidin mRNA表达有抑制作用，单纯rhEPO对HepG2细胞Hepcidin表达基本无影响。结论：重组人IL-6能刺激HepG2细胞和人原代肝细胞Hepcidin mRNA表达升高，并在一定范围内呈时间、剂量依赖效应．rhEPO对这一作用有抑制作用。     

猿猴病毒40 T抗原转化的人脐静脉内皮细胞系PUMC-HUVEC-T1的建立

目的 建立猿猴病毒40（SV40）T抗原转化的人脐静脉内皮细胞（HVUEC）模型,为内皮研究提供可利用资源。方法 分离人脐静脉内皮细胞,原代培养。感染含有SV40大T、小T抗原的慢病毒,连续传代培养。对感染后的HUVEC,RT-PCR检测大T的表达,免疫细胞化学检测vWF、CD31、CD34的表达及结合凝集素能力,透射电镜观察内皮细胞的超微结构,Matrigel检测管状成型,进行染色体核型分析,皮下接种BABL/c-nu裸鼠检测致瘤性,PCR法进行种属鉴定及支原体检测,短串联重复序列（STR）检测鉴定细胞身份。结果 转化后的人脐静脉内皮细胞命名为PUMC-HUVEC-T1,扁平多角状,汇合时典型铺路石排列,体外传代40代以上（1∶3～4）;细胞中有SV40LT mRNA的表达;vWF、CD31、CD34表达均阳性,可结合荆豆凝集素-1（UEA-1）;电镜可见WP小体;不同代数细胞核型正常稳定,裸鼠体内接种不成瘤。PUMC-HUVEC-T1种属鉴定为人源性,STR结果与原代HUVEC一致,无支原体的污染,国家实验细胞资源共享平台收藏。结论 建立了易获得、背景清楚、质量可靠的SV40 T抗原转化的HUVEC细胞系PUMC-HUVEC-T1。     

中药筋脉通对高糖培养雪旺细胞增殖及NGF表达的影响

目的:从细胞生物学水平观察筋脉通含药血清对高糖培养雪旺细胞(SC)的增殖及其分泌神经生长因子(NGF)的影响。方法:体外培养大鼠SC,采用血清药理学方法制备筋脉通含药血清,观察筋脉通含药血清对高糖培养SC增殖活性的影响,检测筋脉通含药血清对高糖培养SC分泌NGF的影响。结果:高糖培养条件下,SC增殖及分泌NGF的能力明显减弱,筋脉通含药血清可增强高糖培养SC的增殖能力,上调NGF的表达水平,作用与神经妥乐平含药血清相似。结论:中药筋脉通可有效促进高糖环境培养的SC的增殖能力及其分泌NGF的水平。     

小鼠子宫颈癌U14细胞系的建立及生物学特性研究

目的:建立小鼠宫颈癌肿瘤细胞系,观察其生物学特性。方法:采用肿瘤原代培养法对小鼠U14肿瘤进行体外传代培养,定期对培养细胞进行形态学观察,进行免疫组织化学鉴定、细胞周期检查、染色体检测、细胞生长测定,进行615、C57BL/c小鼠移植观察体内成瘤情况,并用pEGFP-N1质粒转染U14细胞。结果:细胞呈贴壁和悬浮混合生长,CK阳性特征。体外连续培养10个月,传代50代,细胞倍增时间为21.83小时,细胞周期测定G1期为34%,G2期为26.4%,S期为39.6%。培养U14细胞3-4天处于对数生长期,染色体为亚四倍体核型,众数为64～84条。615小鼠、C57BL/c小鼠移植成瘤率均为100%,无支原体污染。建立了GFP( )的U14-GFP单克隆细胞株。结论:成功建立了小鼠U14子宫颈癌细胞系及GFP标记的U14-GFP细胞株,体内移植可建立常规及带荧光标记的肿瘤模型,可用于体内体外相结合的肿瘤研究。     

人胚胎肝细胞的体外培养及表型观察

目的观察体外培养的人胚胎肝细胞的特性。方法采用胰酶分步消化法体外分离人胚胎肝细胞,在培养的不同代数,收集培养上清液测定甲胎蛋白、白蛋白及5种特异性酶(ALT、AST、GGT、ALP、LDH)的分泌量,用免疫组化法测定细胞内细胞色素C的表达情况。观察诱导分化剂丁酸钠对该细胞的作用效果。结果体外分离培养的肝细胞在DMEM培养基中呈单层多边形上皮样生长,常规传代可维持约5个半月(30代),在传代过程中具有分泌白蛋白及5种特异性酶的生理功能。结论建立的人胚胎肝细胞系,保持了肝细胞的表型及分泌多种特异性酶。     

卵巢Brenner瘤1例并文献分析

1病例资料患者,女,54岁,因"绝经3年,阴道出血4天"入院。患者3年前自然绝经,绝经后无阴道异常排液及出血,4天前无诱因出现阴道少量出血,量少,鲜红色,持续4天后自行停血,无腹痛、腹胀,大小便正常,无发热,分泌物正常,就诊当地医院,自诉做CT检查示右卵巢巧克力囊肿,建议复查(具体不详),故2018年3月28日于本院就诊,复查多普勒彩色超声示:右卵巢内囊实性混合回声(巧克力囊肿不除外)。