乳腺癌组织miR-23a、miR-1247-5p表达与临床病理特征及预后的关系

目的检测微小RNA（miR）-23a、miR-1247-5p在乳腺癌组织中的表达情况,并分析miR-23a、miR-1247-5p表达与乳腺癌患者临床病理特征及预后的关系。方法收集2012年1月至2013年12月在昆山市第二人民医院行手术切除的150例乳腺癌患者术后的乳腺癌组织及癌旁正常组织样本,采用RT-PCR法检测组织样本中miR-23a、miR-1247-5p表达水平。单因素分析miR-23a、miR-1247-5p表达水平与患者临床病理特征的关系;Kaplan-Meier生存曲线分析不同miR-23a、miR-1247-5p表达水平患者的术后生存情况;ROC曲线分析miR-23a、miR-1247-5p对患者预后的预测价值。结果与癌旁正常组织相比,乳腺癌组织miR-23a表达水平较高、miR-1247-5p表达水平较低（均P＜0.05）。乳腺癌组织miR-23a表达水平与肿瘤直径、分子分型、淋巴结转移、TNM分期有关（均P＜0.05）,miR-1247-5p表达水平与组织病理分级、分子分型、淋巴结转移、TNM分期有关（均P＜0.05）。miR-23a高表达、miR-1247-5p低表达患者的术后5年总生存率及中位生存时间均分别低于miR-23a低表达、miR-1247-5p高表达患者（均P＜0.05）。检测乳腺癌组织miR-23a、miR-1247-5p表达水平对患者预后预测的AUC分别为0.709（95%CI：0.625~0.793）、0.690（95%CI：0.606~0.775）,灵敏度分别为0.812、0.749,特异度分别为0.637、0.622。结论乳腺癌组织miR-23a表达上调,miR-1247-5p表达下调,且与患者预后有关。检测乳腺癌患者术后癌组织miR-23a、miR-1247-5p表达水平对患者预后预测有一定的临床价值。     

可吸收止血纱布在乳腺微创术中的应用

目的探讨可吸收性止血纱布在乳腺微创手术中的应用效果。方法 43例患者(对照组)经乳腺微创切除纤维瘤或肿块活检后,局部无任何特殊处理,只行术后弹力加压包扎;45例患者(观察组)操作相同,但改进创面处理方法,将可吸收性止血纱布(强生公司生产)填塞创面,比较以上两种方法术后血肿发生率。结果术后血肿发生率两组差异有统计学意义(χ2=3.98,P<0.05)。结论可吸收性止血纱布止血效果可靠,能有效降低术后血肿发生率,可作为乳腺微创手术时止血的理想选择。     

金龙胶囊和蛇毒对小鼠子宫颈癌(U14)抗复发和转移的观察

目的 观察鲜动物药金龙胶囊和蛇毒制剂对实验性手术后肿瘤局部复发和转移的作用。方法 以小鼠子宫颈癌（Ｕ１４）高转移肿瘤模型为对象，用金龙胶囊和蛇毒制剂进行实验性治疗，抑瘤率和抑制转移率为主要指标，与化疗组和对照组进行对比观察。结果 金龙胶囊对局部肿瘤复发两次抑制率各为５４．８％和６６．３％；对转移抑制率各为５０％和５４％。蛇毒对局部肿瘤复发两次抑制率各为５４．４％和６８．３％；对转移抑制率各为４５．     

猪脂肪干细胞与脱细胞真皮基质的生物相容性

背景：脱细胞真皮基质已广泛应用于器官或组织缺损的修补。 目的：观察猪脂肪源性干细胞与脱细胞真皮基质的相容性。 方法：酶消化法原代培养猪脂肪源性干细胞,利用流式细胞仪和多向诱导分化方法鉴定脂肪干细胞,将其与脱细胞真皮基质共培养。 结果与结论：实验成功培养出猪脂肪源性干细胞,流式细胞仪检测结果显示阳性表达CD44和CD105,不表达CD34和CD45;在诱导培养基条件下,可向脂肪细胞、成骨细胞分化。苏木精-伊红染色及扫描电镜发现干细胞能在脱细胞真皮基质表面黏附生长。脂肪源性干细胞与脱细胞真皮基质具有良好的相容性,将两者体外复合培养后,有望将复合物植入体内进行缺损组织、器官的修复。     

乳腺癌患者术中保留肋间臂神经的临床意义

目的探讨在乳腺癌根治性手术中保留肋间臂神经（ICBN）的可行性及其临床意义。方法在46例乳腺癌根治性术中施行保留肋间臂神经手术,其中完整保留肋间臂神经24例（保留组）,切除肋间臂神经22例（切除组）。结果保留组感觉方面并发症发生率（20.83%）低于切除组的发生率（86.36%）（P〈0.01）。保留组疼痛的发生率（16.7%）要远低于切除组中疼痛的发生率（90.9%）（P〈0.01）。保留组平均手术时间为（90.00±1.76）min;切除组平均手术时间为（80.00±2.08）min,两组手术时间差异具有显著性（P〈0.01）。术后平均随访12个月,46例均未见局部复发。结论在乳腺癌根治性手术中通过手术技巧的改进,保留肋间臂神经是可行的,亦是必要的,它保存了患侧上臂内侧及腋部皮肤的感觉功能,提高患者生活质量。     

细胞培养操作中常见问题及处理对策

细胞培养技术广泛用于科研、教学及临床研究实验,这项技术看似简单又不太容易操作.首先从概念上说,细胞是生命的最小单位,离体以后失去了生命体给予的一切复杂的机体内环境,在实验室内能够生长并形成一定生长规律,是研究者们经过长期研究摸索总结得到的科研成果.     

囊泡运输相关蛋白VAP-33在小鼠树突状细胞肉瘤细胞株DCS细胞中的表达及其功能

目的 探讨囊泡运输相关蛋白VAP-33在小鼠树突状细胞肉瘤细胞株DCS细胞中的表达及其功能.方法 用1%TritonX-114提取DCS细胞膜蛋白,用已制备的DCS细胞多克隆抗体(pAb)及蛋白A+G琼脂糖进行免疫沉淀,所得样品利用质谱技术进行分析,检测到VAP-33蛋白在DCS细胞中有表达,继而DCS细胞经不同量抗原(150、850、1500μl)刺激24、48、72 h后观察细胞形态及吞噬能力的变化,同时通过间接免疫荧光、共聚焦显微镜、Western blot等方法检测了VAP-33的分布及表达变化.0.5 mol/L胰岛素刺激DCS细胞20 min后,采用Western blot检测DCS细胞全蛋白、胞质蛋白、膜蛋白中VAP-33、葡萄糖转运蛋白4(GLUT-4)的表达变化,共聚焦方法观察胰岛素刺激前后VAP-33和GLUT-4在DCS细胞中的表达及定位变化.实验中均以常规培养的DCS细胞作为对照.结果 VAP-33蛋白主要表达在DCS细胞膜和胞质中;在外来抗原刺激下,随抗原量的增加及作用时间的延长DCS细胞趋向成熟树突状细胞,VAP-33表达量降低,对辣根过氧化物酶的吞噬能力增强.胰岛素刺激后,VAP-33与GLUT-4有共定位.结论 VAP-33在树突状细胞来源的肿瘤细胞中表达,与树突状细胞的抗原加工有关,在葡萄糖的转运中起一定作用.     

荧光标记肿瘤转移体内模型的建立

目的 建立一种带荧光标记的肿瘤转移模型并探讨其应用价值.方法 人胃癌MGC-803细胞和小鼠宫颈癌U14细胞进行体外传代培养,转染pEGFP-N1质粒,24h检测转染效率,用无限稀释法筛选稳定表达绿色荧光蛋白(GFP)的单克隆细胞株MGC-803-GFP和U14-GFP.分别体内移植于BALB/c-nn裸鼠和C57BL/6J小鼠,观察成瘤潜伏期,绘制体内生长曲线,利用活体荧光成像系统活体连续观察GFP在体内的表达,观察肺部和淋巴结的转移情况,计算转移率.免疫组织化学检测与转移相关的分子CD44和E-cadherin在移植瘤中的表达.结果 MGC-803细胞和U14细胞pEGFP-N1转染24 h后的转染效率分别为30%和60%.获得了GFP(+)的单克隆MGC-803-GFP细胞株和U14-GFP细胞株.MGC-803-GFP在BALB/c-nu裸鼠和U14-GFP在C57BL/6J小鼠移植成瘤的潜伏期分别是3～5 d和2～4 d,成瘤率均为100%.利用活体荧光成像系统连续观察,可以清楚直观地观察表达GFP的MGC-803-GFP移植瘤在体内的生长,接种后第60天处死全部荷瘤鼠,解剖后仅有1只可见同侧腋窝下淋巴结的转移.接种U14-GFP后,分别在第28、37和52天观察了荷瘤小鼠肿瘤转移的发展过程.在U14-GFP原发瘤体积达到≥5 cm3时,肺部和淋巴结转移率分别为67%和100%.在MGC-803-GFP和U14-GFP的移植瘤中都可以检测到CD44的表达,而无E-cadherin的表达.结论 成功建立了表达绿色荧光蛋白单克隆细胞株MGC-803-GFP和U14-GFP,体内移植建立了荧光标记的肿瘤转移模型.该模型可用于可视化肿瘤体内的研究.     

ω-3多烯酸乙酯对肿瘤恶病质的影响及其机制

目的临床上肿瘤恶病质的治疗十分棘手,初步的研究提示ω-3多不饱和脂肪酸本身作为免疫营养素具有改善肿瘤恶病质的功能。本研究应用在心血管疾病中广泛使用的ω-3多烯酸乙酯口服制剂来干预荷瘤小白鼠,探讨其对肿瘤恶病质的改善作用及机制。方法使用小白鼠结肠癌细胞株C-26皮下注射Balb/c小白鼠,构建荷瘤小白鼠肿瘤恶病质模型,将小白鼠分为3组:对照组(无荷瘤小白鼠组)、荷瘤无干预组和荷瘤ω-3多烯酸乙酯干预组,荷瘤ω-3多烯酸乙酯干预组小白鼠给予ω-3多烯酸乙酯(DHA、EPA>80%)灌胃(2 g.kg-1.d-1,体积<0.1 ml)。连续2周记录小白鼠饮食量、体质量及腓肠肌重量等指标,并比较各组肿瘤组织炎性因子IL-1β、IL-6的mRNA表达差异。结果ω-3多烯酸乙酯干预组相对于荷瘤无干预组可显著改善荷瘤小白鼠的体质量减轻程度,减少瘦肉体(腓肠肌)的丢失,并降低肿瘤组织的炎性因子IL-1β、IL-6的mRNA表达水平。结论口服ω-3多烯酸乙酯可以降低组织炎性因子表达,达到改善肿瘤恶病质的作用。     

小鼠树突状细胞肉瘤细胞系的细胞功能鉴定

本实验目的是通过功能试验进一步鉴定ＤＣＳ细胞的组织来源，我们建立的ＤＣＳ细胞系经酶组织化学及免疫组织化学鉴定初步确定来源于小鼠脾交错树突状细胞。本实验研究了ＤＣＳ细胞吞噬、胞饮和诱导淋巴细胞增殖反应等功能试验，发现ＤＣＳ细胞不具有吞噬及胞饮功能。这些功能试验进一步表明该细胞系来源于小鼠脾交错树突状细胞。