以坏死并血管侵犯为关键要素的肝细胞癌T“N”M分期系统的建立及其准确性初步评估

目的:通过分析肝细胞癌(肝癌)关键预后因素尝试建立新的肝细胞癌临床分期系统。方法:收集中南大学湘雅医院和广西医科大学附属肿瘤医院肝癌组织标本338例,检测肿瘤坏死和微血管侵犯的发生率;检索的相关文献,分析肝癌伴淋巴结转移的发生率;基于湘雅医院236例肝癌患者随访生存数据,以肿瘤坏死与血管侵犯为变量对肝癌患者复发与生存率进行分析;将肿瘤坏死是否并血管侵犯为要素整合入AJCC第8版肝癌TNM分期系统中,构建T(肿瘤)"N"(坏死+血管侵犯)M(转移)肝癌分期系统,用生存分析比较T"N"M分期与第8版TNM分期的预后判断效力。结果:两组队列中,肿瘤坏死发生率分别为75.4%(177/236)、61/102(59.8%),微血管侵犯检出率分别为71.6%(169/236)、86.2%(88/102),而文献报道肝癌伴淋巴结转移发生率仅为0.8%～8.33%。坏死和血管侵犯联合预测复发及1、3、5年整体生存的ROC曲线下面积分别为0.940、0.834、0.748、0.721。T"N"M分期系统能够清晰区分Ia和Ib、IIIa和IIIc期肝癌患者预后差异。T"N"M分期系统5年生存率的C指数(0.672)和线性趋势χ~2检验值(0.732)高于第8版TNM分期系统对应值(0.537和0.626),而AIC值(1 798.142)则小于TNM分期系统对应值(1 806.256)。结论:所建立的T"N"M分期系统是一个基于肝癌临床病理特征、简单有效的分期系统,可弥补TNM分期系统N分期预测效能的不足,更符合临床实际情况。     

不同温度热疗逆转人肺癌细胞A549/CDDP耐药性的研究

目的 探讨不同温度的热疗对人肺腺癌细胞A549/CDDP耐药逆转作用及可能机制.方法 采用体外细胞培养技术,培养人肺腺癌细胞系A549及其耐药株A549/CDDP.设计不同温度(37、40、41、42、43℃)热疗2 h,联合2μg/mL CDDP处理A549/CDDP细胞,检测其对化疗药物CDDP的敏感性,流式细胞仪间接免疫荧光法检测CDDP、热疗处理前后细胞中P-糖蛋白(P-gp)的表达及细胞内荧光药物CDDP的聚集量.结果 A549/CDDP细胞抑制率在39-42℃范围内随热疗的温度升高而升高,42℃时最高(P<0.05).热疗合用顺铂时,A549/CDDP细胞P-gP表达下降,胞浆内CDDP荧光强度增强.结论 热疗能部分逆转人肺腺癌细胞A549/CDDP的耐药效应,其机制可能与抑制P-gP表达,增加细胞内化疗药物积聚有关.     

SEMA3F蛋白在肝细胞癌中的表达及其预后价值

目的 研究SEMA3F蛋白在肝细胞癌(hepatocelluar carcinoma,HCC)中的表达及其预后价值.方法 采用Western Blotting法检测32例HCC及相应癌旁肝组织标本中SEMA3F蛋白的表达.运用免疫组织化学法检测38例HCC以及其相应癌旁组织中的SEMA3F蛋白的表达和微血管密度(microvassel dainty,MVD)值,分析SEMA3F蛋白表达水平与MVD的相关性.结果 SEMA3F蛋白在32例HCC组织中的表达明显低于相应的PCLT(447.78±48.26比618.93±61.23,P＜0.05).SEMA3F在HCC组织中的表达水平与肿瘤的结节数目及是否具有包膜结构密切相关(P＜0.05).SEMA3F低表达组的复发转移率显著高于高表达组(P＜0.01)而其术后生存率则显著低于高表达组(P＜0.01).SEMA3F高表达组的MVD值明显低于低表达组(86.56±17.94比115.6±30.38,P＜0.01).结论 SEMA3F在HCC组织中表达下调与肝癌复发转移率高和预后差密切相关,提示其可能是一个潜在的HCC预后分子标志物.

Abstract：

Objective To investigate the expression of Semaphorin 3F (SEMA3F) protein in hepatocellular carcinoma (HCC) and to demonstrate its relationship with clinicopathological features and prognosis of HCC. Methods Western Blotting was carried out in 32 hepatocellular carcinoma samples and matched perineoplastic tissues to detect the expression of SEMA3F protein. The relationship between SEMA3F protein expression and clinicopathological features as well as prognosis of HCC patients was analyzed. Immunohistochemistry was used to show the location of SEMA3F in HCC cells and its relationship with microvessel density (MVD). Results The expression of SEMA3F protein in HCC tissues was significantly higher than in the perineoplastic tissues (447.78± 48.26 vs 618.93 ±61.23, P＜0. 05) and it was correlated closely with tumor capsulation and tumor nodular number (P＜0.05). Based on the Western Blotting and clinical follow-up data, we found that the survival time of HCC patients with a higher SEMA3F expression level was longer than those with a lower level, and the recurrent/metastatic time of HCC patients was significantly different between these two groups (P＜0.01). Immunohistochemistry demonstrated that SEMA3F protein localized in the cytoplasm of HCC cells and its expression correlated with HCC MVD. MVD in the low-level group was higher than the high-level group (115.6±30.38 vs 86. 56±17.94, P＜0.01). Conclusions SEMA3F expression in HCC was significantly down-regulated and correlated closely with tumor-capsulation, nodular number, and MVD, implicating SEMA3F may play an important role in recurrence and metastasis of HCC. It can be regarded as a prognostic marker in HCC patients.     

SIPA1基因在肝癌中的表达及其与肝癌预后的关系

目的研究SIPAI（signal-induced proliferation-associated gene 1）基因在肝细胞癌（HCC）中的表达情况及其临床意义。方法采用实时定量PCR检测30例新鲜HCC标本中SIPA1 mRNA相对含量。用免疫组织化学S-P法检测86例石蜡HCC标本和8例正常肝组织中SIPA1的表达情况,研究其与HCC临床病理学资料及预后的关系。结果与癌旁组织比较,在癌组织中SIPA1 mRNA表达下调（t=2.216,P=0.045）。86例HCC中,SIPA1在癌组织的阳性表达率和癌旁组织中阳性表达率分别为43.0%（37/86）和87.2%（75/86）（χ^2=36.96,P〈0.01）。有静脉侵袭的肝癌标本中癌旁组织SIPA1呈低表达（U=647.50,P=0.019）。SIPA1蛋白在癌旁组织中表达存在个体差异,低表达组术后复发率较高（P=0.000）,生存期较短（P=0.006）。结论SIPA1在HCC中可能发挥肿瘤抑制基因的作用,且对抑制HCC的复发转移有重要作用。     

AIBP在肝癌细胞中的表达及意义与含AIBP基因及AFP启动子驱动的双自杀基因表达载体构建

目的：探讨载脂蛋白A-I结合蛋白（AIBP）在肝癌细胞中的表达及意义。方法：用RT-PCR与Western blot法分别检测正常肝细胞株L02,AFP阳性人肝癌细胞株HepG2和Hep3B,及AFP阴性人肝癌细胞株SMMC7721中AIBP基因与蛋白的表达;构建AFP启动子驱动的双自杀基因（CD,TK）+AIBP基因过表达载体pcDNA3.1-AFP-AIBP-yCD/TK,并转染Hep3B和SMMC7721细胞,用MTT法检测转染后细胞的增殖能力,用RT-PCR和Western blot法检测细胞AIBP,血管内皮生长因子（VEGF）,VEGF受体2（VEGFR-2）,基质金属蛋白酶9（MMP-9）基因和蛋白的表达。结果：AIBP mRNA和蛋白在正常肝细胞中高表达,而在各肝癌细胞系中均表达下调,且Hep3B和SMMC7721细胞中下调明显。成功构建pcDNA3.1-AFP-AIBP-yCD/TK真核表达质粒并转染入Hep3B和SMMC7721细胞。转染后AFP阳性Hep3B细胞生长到明显抑制,但AFP阴性SMMC7721细胞增殖不受影响;两种细胞的AIBP基因与蛋白表达均明显上调,而VEGFR-2,VEGF和MMP-9基因与蛋白表达明显表达下调。定量指标间的差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论：AIBP在肝癌细胞中表达下调,AIBP与肝癌细胞的侵袭转移能力有关,而与细胞增殖能力无关;成功构建了联合基因载体pcDNA3.1-AFP-AIBP-yCD/TK。

     

老年人肝细胞癌切除术后复发与微血管密度的关系

目的 探讨患者年龄对肝细胞癌(HCC)切除术后无瘤存活率的影响以及老年人HCC复发与微血管密度(MVD)的关系. 方法 回顾性分析71例老年人HCC肝切除术病例,以同期352例非老年HCC病例作对照,结合随访资料分析年龄对无瘤存活率的影响.采用免疫组织化学SABC法检测30例老年人和30例非老年人HCC组织中CD34和endocan的表达情况,研究微血管密度与老年人HCC预后的关系. 结果老年组1、3、5年无瘤存活率分别为75.7%、43.0%、43.0%,非老年组分别为53.6%、38.5%、33.4%,老年组的无瘤存活率大于非老年组,差异有统计学意义(Log Rank值为10.25,P＜0.05).老年组术前血清甲胎蛋白(AFP)阳性率为47.9%,低于非老年组(62.2%),差异具有统计学意义(X2=23.68,P＜0.05).高CD34-MVD组和高endocan-MVD组的中位生存时间分别为260 d和360 d,低CD34-MVD组和低endocan-MVD组的中位生存时间分别为850 d和800 d,差异均有统计学意义(Log Rank值分别为22.18和20.56,P＜0.05). 结论 老年人HCC肝切除术后的长期预后好于非老年组,老年人HCC术后复发转移与血管生成密切相关.     

原发性脾脏肿瘤47例的诊治经验

本文总结了我院1985年1月至2004年6月间连续收治的47例原发性脾脏肿瘤的临床资料,探讨其病理特征和诊治对策。临床资料1·一般资料:本组47例,男27例,女20例。年龄10~74岁,平均(45·2±11·6)岁。本组脾脏良性肿瘤28例(60%),包括脾血管瘤、脾囊肿、淋巴管瘤、错构瘤、浆液性囊腺     

抑癌基因Merlin与干细胞标记物Nanog在肝细胞癌中表达的关系及意义

目的:探讨肝细胞癌(HCC)抑癌基因失活与肝癌干细胞(LCSC)的关系及其临床意义。方法:用免疫组化法检测116例HCC组织标本中抑癌基因Merlin与LCSC表面标记物Nanog的蛋白表达,分析两者的表达与HCC患者临床病理因素及预后间的关系。结果:按X-tile软件计算得出的Merlin与Nanog表达量的分界值,116例HCC中Merlin低表达者92例(79.3%),高表达者24例(20.7%);Nanog高表达者36例(31.0%),低表达者80例(69.0%)。单因素分析显示,分化较差,有卫星灶、静脉浸润、出血坏死的HCC组织中Merlin低表达,而Nanog高表达(均P0.05);多因素分析显示,Merlin低表达和Nanog高表达是HCC术后存活和复发的独立的预测指标(均P0.05)。将患者分为低危组(Merlin高表达并Nanog低表达)、中危组(Merlin高表达并Nanog高表达或Merlin低表达并Nanog低表达)、高危组(Merlin低表达并Nanog高表达)分析,3组患者的术后总体生存率(低危组中危组高危组)和复发率(低危组中危组高危组)差异均有统计学意义(均P0.05)。结论:抑癌基因Merlin失活与Nanog高表达有一定关系,两者的消长与HCC患者预后密切相关。     

WAVE2与替代型结直肠癌肝转移生长模式的相关性研究

背景与目的 结直肠癌肝转移（CLM）存在不同的病理生长模式（HGP）,其中替代型HGP（RHGP）与血管选定形成密切相关,直接影响抗血管生成疗法效果,导致不良临床预后。因此,本研究初步探讨HGP的分子病理特征,以期为CLM分子机制研究提供基础。方法 收集2010—2020年中南大学湘雅医院普通外科行手术切除的103例CLM患者临床资料及石蜡标本,其中,58例为促纤维组织增生型HGP（DHGP）、45例为RHGP。根据HGP国际专家共识指南,评估RHGP与CLM患者临床病理因素的相关性。通过免疫组化方法检测WAVE2和CD31的蛋白表达,分析RHGP与血管选定和WAVE2的关系。TIMER2.0数据库分析WAVE2与免疫浸润相关性。KEGG数据库分析WAVE2相互作用分子。结果 HGP与肝转移瘤发生时间和淋巴结转移明显有关（均P<0.05）。DHGP组和RHGP组CD31阳性率分别为27.5%和37.0%,WAVE2蛋白高表达率分别为58.6%和82.2%,差异有统计学意义（P=0.023,P=0.011）。WAVE2表达与B细胞（r=0.258,P=1.41e-07）、CD4+T细胞（r=0.467,P=3.67e-23）、CD8+T细胞（r=0.318,P=5.47e-11）、中性粒细胞（r=0.407,P=2.02e-17）、巨噬细胞（r=0.301,P=6.63e-10）和树突状细胞（r=0.438,P=3.01e-20）免疫浸润明显相关。WAVE2表达与CTTN（r=0.454,P=1.26e-24）、HDAC4（r=0.54,P=5.43e-36）、CYFIP1（r=0.39,P=4.24e-18）、CDC42（r=0.443,P=2.12e-23）、PDGFB（r=0.316,P=4.25e-12）、PRKACA（r=0.363,P=1.05e-15）等下游分子均呈明显正相关。结论 WAVE2表达可能通过促进结直肠癌细胞迁移运动,调节血管选定和肿瘤免疫微环境,参与RHGP的形成。