两种不同分离方法对羊骨髓间充质干细胞生物活性的影响

背景：近几年关于鼠、兔等小型动物骨髓间充质干细胞的研究较多,如何获得大型动物羊的骨髓间充质干细胞的报道还较少。目的：观察全骨髓培养法和密度梯度离心法对羊的骨髓间充质干细胞生物活性的影响。方法：取健康2月龄的阿勒泰大尾羊,麻醉后于髂后上棘穿刺抽取骨髓,分别采用全骨髓培养法和密度梯度离心法提取羊骨髓间充质干细胞,倒置荧光显微镜观察原代骨髓间充质干细胞的细胞形态及贴壁情况,记录两组细胞首次传代时间,流式细胞仪检测CD44抗原表达,MTT法测定细胞的生长曲线,VonKossa’s染色检测成骨诱导的分化潜能。结果与结论：两种分离方法均能得到较均一的梭形,三角形和多边形的BMSCs,胞核大胞浆丰富,CD44抗原表达阳性。全骨髓培养法较密度梯度离心法的细胞数量较多,传代时间略早。骨髓间充质干细胞诱导培养至第14～21天,两组的VoKossa染色均阳性。其中首次传代全骨髓贴壁法的传代细胞较密度梯度离心法的细胞贴壁较快,活力较好。提示全骨髓培养法是一种简单有效的提取方法。     

呼吸机相关性肺炎集束化护理方案实施不佳原因的质性研究

目的了解ICU护士预防呼吸机相关性肺炎集束化护理方案临床实施不佳的原因,为护理管理提供参考。方法采用质性研究的现象学方法,对在我中心ICU工作1年以上的19名护理人员进行深入访谈,按现象学研究方法整理分析资料。结果通过阅读、分析、反思、分类,提炼4个主题,包括病情限制不能实施相关护理、低学历低年资护士缺乏业务知识和临床经验、护理任务繁重而人员相对短缺的困扰、医嘱执行中的不规范问题。结论 ICU护士预防呼吸机相关性肺炎集束化护理方案实施不佳的主要原因有多方面,需引起护理管理者的重视,采取有效应对来促进护理质量持续改进。     

淫羊藿素联合达拉菲尼抑制黑素瘤增殖和转移

目的探讨淫羊藿素联合达拉菲尼对人黑素瘤A375细胞增殖和转移的抑制作用及可能的机制。方法采用不同浓度淫羊藿素和达拉菲尼单独及联合作用于A375细胞;CCK-8法检测细胞生长抑制率,进行协同性分析;Transwell和划痕实验检测细胞迁移和侵袭能力;qPCR及Westernblot检测MMP-2、MMP-9、Vimentin和E-cadherin的表达情况。结果淫羊藿素和达拉菲尼均能下调A375细胞MMP-2、MMP-9和Vimentin的表达,上调E-cadherin的表达,抑制其增殖、迁移和侵袭,且两药低浓度联合具有协同效应。结论淫羊藿素能协同达拉菲尼抑制A375细胞MMP-2、MMP-9和Vimentin的表达,促进E-cadherin的表达,抑制黑素瘤细胞的增殖和转移。     

青春期前尿道下裂解剖数据测量：多中心病例系列研究

目的 研究青春期前尿道下裂各项相关人体测量学指标,数据化描述尿道下裂的解剖异常。方法 选择2021年3月—12月3个医学中心收治且符合选择标准的516例青春期前（TannerⅠ级）尿道下裂初次手术患儿作为研究对象,患儿年龄10～111个月,平均32.6个月。尿道下裂按照尿道缺损所达位置分型,远段型（尿道缺损在冠状沟或以远）47例（9.11%）,中段型（尿道缺损在阴茎体段）208例（40.31%）,近段型（尿道缺损在阴茎阴囊交界部或近侧）261例（50.58%）。测量以下指标：术前和术后即刻阴茎长度,重建尿道长度和尿道总长度;阴茎头区形态指标,包括术前阴茎头高度和宽度、AB、BC、AE、AD、有效AD、CC、BB、冠状沟尿道板宽度以及术后阴茎头高度和宽度、AB、BE和AD,其中A点为舟状沟顶点、B点为舟状沟侧方隆突、C点为阴茎头冠腹外侧隆突、D点为阴茎头冠背侧中点、E点为冠状沟腹侧中线;包皮帽形态指标,包括包皮帽宽度、内板和外板长度;阴囊形态指标,包括左侧、右侧和前方阴茎阴囊距;肛殖距,包括肛门阴囊距1(anoscrotal distance 1,ASD1)、ASD2、肛门阴茎距1(an...     

影像学检查在骨肿瘤诊治中的应用价值

目的 探讨骨肿瘤诊治中的影像学检查的价值.方法 回顾性分析110例骨肿瘤患者的影像学及病理学资料.110例患者中102例行数字化X射线摄影(DR)检查,其中42例患者行计算机体层摄影术(CT)检查,40例患者行磁共振成像(MRI)检查,比较骨肿瘤的影像学特征,比较影像学与病理学诊断结果及对良恶性骨肿瘤的诊断正确率.结果 DR和CT在显示骨质增生、破坏、硬化和病灶边界等方面结果类似,但是DR在颅、脊柱、骨盆病灶、细微病灶、软组织阴影不如CT;DR在骨膜反应中表现良好,MRI在骨髓水肿和软组织的影响上特异性最强,但是在显示骨膜增生、硬化、破坏、钙化等方面情况较差.DR诊断的正确率为91.20%,CT诊断的正确率为90.48%,MRI诊断正确率为95.00%.3种影像学检查方法对良恶性骨肿瘤的鉴别诊断正确率方面没有统计学差异(P>0.05).结论 DR平片为骨肿瘤的首选的检查方法,CT主要显示肿瘤的范围和细微结构,MRI对软组织及骨髓水肿具有一定的优势,三者相结合对骨肿瘤诊治过程中的判断具有优势互补的作用.     

人参囊泡调控肿瘤免疫微环境的活性成分研究

目的 探讨人参Panx ginseng来源的细胞外囊泡（ginseng-derived nanoparticles,GDNPs）在调控肿瘤相关巨噬细胞表型及抑制黑色素瘤生长方面的潜在物质基础。方法 采用纳米颗粒跟踪分析仪、透射电镜测试及紫外-可见分光光度法全面表征GDNPs及其主要成分（蛋白质、多糖和皂苷）的含量;通过qRT-PCR和流式细胞术检测GDNPs与其含有的多糖、皂苷成分对骨髓来源巨噬细胞（bone marrow-derived macrophage,BMDM）表型的调控影响。收集不同极化程度的BMDM条件培养基（conditional medium,CM）孵育小鼠皮肤黑色素瘤B16F10细胞,CCK-8法测定不同CM处理后B16F10细胞活力,验证活性成分对肿瘤免疫微环境的调控作用;通过PMP柱前衍生法定量分析GDNPs活性成分组成。结果 透射电镜下观察GDNPs形态结构良好,含量测定结果为2.46×10¹¹颗粒的GDNPs含有4.31 mg蛋白质、4.46 mg多糖、1.22 mg皂苷。qRT-PCR和流式细胞术实验结果显示GDNPs多糖可以逆转M2型巨噬细胞表型,向M1方向极化。GDNPs多糖诱导巨噬细胞极化后的CM显著抑制了B16F10细胞活力。PMP柱前衍生法分析GDNPs多糖成分由葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成,其物质的量比为4.72∶1.07∶2.15。结论 揭示了GDNPs中多糖成分在调控肿瘤免疫微环境的关键作用,为进一步的机制研究和临床应用提供了实验依据。     

基于网络药理学探讨复方鲜石斛颗粒防治酒精性肝病的作用机制及实验验证

目的 结合网络药理学方法和实验验证探讨复方鲜石斛颗粒防治酒精性肝病(ALD)的作用靶点及潜在机制。方法 借助TCMSP、ETCM、BATMAN-TCM数据库及文献报道检索复方鲜石斛颗粒的化学成分,利用Swiss ADME数据库筛选优效目标化合物,并通过Swiss Target Prediction数据库对活性成分靶点进行预测。通过GeneCards、OMIM、DrugBank、DisGeNET数据库获取ALD相关疾病靶点,采用String数据库和Cytoscape软件构建靶点相互作用网络图(PPI)及“中药-活性成分-靶点-疾病”网络图,将预测的潜在作用靶点通过DAVID数据库进行GO/KEGG功能富集分析预测作用机制。构建酒精性肝损伤小鼠模型,通过病理染色、ELISA检测、qPCR及Western blot来验证网络药理学富集分析结果。结果 通过数据库及文献报道共筛选获得73个关键活性成分,与ALD交集靶点有720个,根据P<0.05,FDR<0.05的GO注释分析得到789个BP信息,93个CC信息,204个MF信息,194个KEGG信号通路,主要涉及代谢过程、PI3K...     

中药辛夷及其近缘种的DNA条形码分子鉴定

目的 应用DNA条形码技术对中药辛夷及其近缘种进行分子鉴定,建立快速、准确、便捷的辛夷药材鉴定方法。方法 提取21份辛夷药材基原植物及其近缘种基因组DNA,扩增ITS、ITS2、psbA-trnH、matK和rbcL基因序列并进行双向测序;运用MEGA7.0软件进行序列比对,基于Kimura-2-Parameter(K2P)模型计算种内、种间的遗传距离以评估Barcoding gap,构建邻接(NJ)系统发育树反应鉴定结果。结果 5个引物序列中,psbA-trnH和matK序列的2个引物能正常扩增目的基因,测序成功率均大于98%,rbcL测序成功率较低,只有38.1%;其中matK具有最多的变异位点,psbA-trnH较matK和rbcL的Barcoding gap明显;NJ系统发育树显示,psbA-trnH+matK组合条形码序列能够准确鉴别9个品种,将辛夷药材及其近缘种很好地区分,并首次将其应用到玉兰嫁接砧木品种的分子鉴定。结论 应用psbA-trnH+matK的序列组合能够实现辛夷药材的准确鉴定,并且可以应用于玉兰嫁接砧木品种的快速鉴别。