损毁弓状核致大鼠肥胖型无排卵机制探讨

目的:探讨注射谷氨酸钠损毁弓状核致大鼠肥胖后对其不孕的影响.方法:给新出生雌性Wistar大鼠皮下注射谷氨酸钠(实验组),连续5天,以损毁其弓状核建立肥胖模型.对照组注射等量0.9%氯化钠液,连续5天.最终筛选出实验组肥胖不孕大鼠模型20只和对照组大鼠20只.观察两组神经肽Y(NPY)、瘦素受体(leptin R)及促性腺激素释放激素(GnRH)在其下丘脑弓状核的表达变化;并测定血清雌二醇(E2)、睾酮(T)、瘦素(leptin)、卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)的水平.结果:在实验组大鼠中,血清E2、T、leptin水平较对照组明显升高(P<0.05),FSH、LH水平较对照组明显降低(P<0.05);下丘脑弓状核NPY表达较对照组增强(P<0.05),而leptin R及GnRH免疫阳性胞体及纤维表达较对照组减弱(P<0.05).结论:损毁弓状核致大鼠肥胖由于神经内分泌-代谢失调而引起GnRH水平降低,导致下丘脑-垂体-卵巢轴功能失调性无排卵而引起不孕.     

部分背根切断对备用背根节神经元Bax、Bcl-2及Caspase-3表达的影响

目的　研究部分去背根对备用背根节 (DRG)神经元 Bax、Bcl- 2、Caspase- 3表达的影响。方法　制作单侧备用背根模型 ,3d、7d和 14 d后取备用背根节分别用兔抗 Bax、Bcl- 2及 Caspase- 3行免疫组化 ABC法染色 ,同时另设一正常对照组。分别计数单位面积内各组大、中小阳性神经元的数量。结果　正常组 Bax、Bcl- 2、Caspase-3阳性反应物主要分布于背根节的中小神经元和少数大神经元。术后 3d,Bax总阳性神经元数较正常组明显增加(P<0 .0 5 ) ,至术后 14 d Bax总阳性神经元数下降并恢复到正常水平。各时间段 Bcl- 2总阳性神经元数无显著性差异。3d组 Caspase- 3总阳性神经元数与正常组比较显著增加 (P<0 .0 5 ) ;7d组、14 d组与 3d组无显著差异。 Bax、Bcl- 2和 Caspase- 3阳性大神经元数在各时间段均无显著性差异 ,阳性中小神经元数的变化规律与总阳性神经元数的变化规律相同。结论　部分去背根主要对备用 DRG中小神经元 Bax、Bcl- 2、Caspase- 3表达有影响 ,三因子表达高峰可能在术后 3～ 7d。     

部分背根切断对备用背根节神经元CNTF、PDGF表达的影响

目的　研究部分去背根对备用背根节神经元睫状神经营养因子 (CNTF)和血小板源性生长因子(PDGF)表达的影响。方法　制作猫备用背根模型 ,分别在 3d、7d及 14 d时取备用背根节用 CNTF抗血清、PDGF抗血清行免疫组织化学 ABC法染色。分别计数各组阳性神经元总数以及大、中小阳性神经元的数量。结果　两因子在备用背根节的大、中小神经元均有表达。 CNTF阳性神经元总数及中小阳性神经元数均在 3d时明显减少 (P<0 .0 5 ) ,7d、14 d时与正常比较无差异 ,大阳性神经元在各个时间段与正常相比无差异。PDGF阳性神经元总数及中小阳性神经元数在 3d、7d时均较正常显著减少 (P<0 .0 5 ) ,14 d时与正常无差异 ,大阳性神经元数各个时间段均无差异。结论　部分背根切断对备用背根节内不同神经元表达 CNTF、PDGF有不同的影响。     

应用组织学与胚胎学教材（案例版）的几点体会

通过近两年应用组织胚胎学教材(案例版)的教学实践,结合对学生的问卷调查,总结了应用组织胚胎学教材(案例版)后的几点体会:与以往的教材相比,该教材的应用,有利于学生的课前预习、培养兴趁;有利于课堂教学,提高效率;有利于学生的课后复习,况固提高;有利于低年级医学生临床思维的培养.同时,该教材也有不足之处,有待于今后进一步改进.     

露蜂房纯化蛋白对白血病细胞形态学影响的研究

目的 观察中药露蜂房纯化蛋白Ⅱ(nidus vespae protein-Ⅱ,NVP-Ⅱ)对人早幼粒白血病细胞株HL-60和急性髓系白血病(AML)患者骨髓单个核细胞(BMMNC)形态学的影响.方法 采用体外细胞培养,加入不同浓度NVP-Ⅱ作用于HL-60细胞和AML患者BMMNC, 培养72 h后,生长曲线法测定NVP-Ⅱ对白血病细胞增殖的影响,倒置显微镜下观察细胞生长状况,并收集细胞常规制备超薄切片,透射电子显微镜下观察HL-60细胞和AML患者BMMNC的超微结构.结果 光镜下NVP-Ⅱ处理组白血病细胞数量明显减少,并出现细胞碎片;透射电镜下,NVP-Ⅱ处理组白血病细胞出现核固缩,染色质浓缩边集,呈新月状、块状或碎裂为质膜包绕的团块,形成凋亡小体;线粒体基质深染,出现空泡样变.结论 NVP-Ⅱ有明显诱导白血病细胞凋亡的作用,并呈现典型的细胞凋亡形态学改变.     

IL-2、IL-4在流产大鼠黄体的表达及意义

目的 研究IL-2、IL-4在溴隐亭致流产大鼠卵巢黄体的表达,探讨其与流产发生的关系.方法 将20只孕雌性Wistar大鼠随机分为2组,正常孕组、注射溴隐亭组,两组均于孕12 d时,经心脏灌注固定取材,免疫组化SP法检测IL-2、IL-4在各组大鼠卵巢黄体的表达并进行图像分析,分别对上述结果进行单因素方差分析及t检验.结果 注射溴隐亭后,IL-2水平较正常孕组升高(P＜0.05)、IL-4水平较正常孕组降低(P＜0.05).结论 给孕鼠注射溴隐亭致大鼠流产后,IL-2、IL-4在卵巢黄体的表达有一定改变,此改变可能与流产的发生有一定的关系.     

CD44在大鼠脊髓半横断损伤后的表达变化

目的 通过观察CD44在大鼠脊髓半横断损伤(hemisection of Spinal Cord Injury,hSCI)位点头尾段的表达,了解它与脊髓损伤的关系.方法 免疫组化SP法检测大鼠脊髓半横断损伤后CD44的表达变化情况.制备大鼠脊髓损伤模型.SD大鼠随机分为假手术对照组和脊髓半横断损伤3天、7天和14天组.应用免疫组织化学和图像分析技术检测脊髓组织CD44的表达.结果 CD44阳性产物主要定位于细胞外基质.神经元和神经胶质细胞的胞浆中也有分布.损伤后CD44的表达较对照组明显增多[P<0.05].结论 脊髓半横断损伤后,表达增加的CD44参与损伤后轴突生长被抑制这一过程.     

组织学与胚胎学实验教学改革探索与实践

组织学与胚胎学是一门重要的基础医学课程，如何让学生以轻松的方式学好这门课，是专业教师长期以来一直探索的问题。文章从改革教学方法、编写同步教材、使用多媒体教室、改革考核方式等多方面阐述了如何结合当代社会对人才的要求进行教学。     

内源性GDNF、NT-4对针刺猫脊髓备用根背根节神经元的作用

为了解部分背根切除和针刺及内源性GDNF和NT-4对体外培养备用背根节(DRG)的作用,本研究对5只成年猫进行双侧备用根手术(切除双侧L1~L5和L7~S2DRG,其中L6DRG作为备用背根)。术后当日开始针刺一侧L6脊神经后肢分布区的两组穴位,即足三里和悬钟、伏兔和三阴交,每天一次,每次30min,连续针刺7d后无菌条件下取出双侧L6DRG进行体外培养,24h后全量换液,并将针刺侧的一部分培养孔的培养液分别用含有200ng/ml抗GDNF和NT-4抗体培养液替换,分别作为抗GDNF和NT-4抗体封闭组。7d后终止培养,于显微镜下用显微测微尺测量神经突起的长度;并用抗NSE抗体行免疫细胞化学ABC法染色进行神经元鉴定。结果显示:(1)免疫细胞化学染色可见体外培养的细胞95%以上为NSE阳性细胞,且为典型的体外培养的DRG神经元;(2)体外培养备用根组和抗GDNF抗体组神经突起的平均长度比针刺组的短(P<0.05);(3)而针刺组神经突起的平均长度与抗NT-4抗体组间无差异(P>0.05);两抗体组平均突起长度比备用根组的突起长(P<0.05)。本研究结果提示,针刺可促进体外培养DRG神经元突起的生长,进而可能与脊髓可塑性密切相关;内源性GDNF有促进DRG神经元突起生长的作用;而内源性NT-4在DRG神经元突起生长中发挥的作用却不明显。     

针刺对部分背根切断备用背根节生长的影响

目的探讨针刺对部分背根切除备用背根节(DRG)生长的影响。方法健康成年雄猫10只。随机分为正常对照组、备用根模型组及针刺备用根模型7d组(摘除双侧L1~L5,L7~S2DRG,保留L6DRG为备用背根,其中针刺一侧备用根支配区的两组穴位即为针刺组,非针刺侧为备用根模型组),每组5只。两组动物在无菌条件下取出双侧L6DRG进行体外培养。分别于1、3、5、7d250倍光镜下随机测量20个视野的细胞突起长度。用抗神经元特异性烯醇化酶(NSE)抗体行免疫组织化学ABC法染色对神经元进行鉴定。结果培养的DRG细胞经抗NSE抗体行免疫细胞化学ABC法染色,可见95%以上呈NSE阳性反应,且为典型的体外培养的DRG神经元。在相应时间段正常组DRG神经元的神经突起长度小于备用根组(P<0.05)、备用根组小于针刺组(P<0.05)。结论部分背根切断可致备用DRG神经元突起再生活性增强,针刺备用根所支配的穴位后可进一步促进备用DRG神经元的突起再生。