云南白纹伊蚊盖塔病毒的分离鉴定

目的:对我国云南省边境线获得的未知病毒进行分离鉴定。方法:将样本进行随机聚合酶链式反应,纯化链接到载体中进行序列的测定,确定病毒为甲病毒属类盖他病毒,然后用特异性引物进行衣壳蛋白基因和3’UTR区序列进行DNA测序,分析比较该病毒的分子生物学遗传特征,绘制系统发育树。结果:该病毒为盖塔病毒。结论:该病毒与韩国分离株和河北两株亲缘关系较近,而与MM2021马来西亚原始毒株亲缘关系较远。     

云南战区首株印第安纳沙门菌的分离鉴定与药物敏感分析

目的对从云南战区腹泻患者中分离的沙门菌进行系统鉴定,并对菌株进行毒力试验和耐药情况研究。方法采集腹泻患者新鲜粪便标本,用亚硒酸盐亮绿（SBG）磺胺增菌液增菌后,在sS和科玛嘉沙门菌显色培养基上分离获纯培养菌,采用肠杆菌科细菌微量生化编码管（GYz—11e系列）进行鉴定,再用法国梅里API-20E生化编码系列进行复核,用沙门菌属诊断血清进行血清分型。小白鼠腹腔注射测定毒力、药敏试验采用K—B法。结果经鉴定该菌为印第安纳沙门菌（SalmonllaIndiana）,毒力试验能使小自鼠发病死亡,药敏试验筛选出了敏感、中度敏感和耐药三种药敏谱。结论本分离菌是印第安纳沙门菌,为云南战区首次发现的菌型,具有较强的毒力。筛选出的药敏谱可为临床治疗此菌感染提供重要参考。     

赖型钩体弱毒株外膜蛋白基因的序列分析

目的：探讨赖型钩体弱毒株外膜蛋白基因的特点及其与强毒株的差别。方法：对问号钩体赖型56601株的外膜蛋白基因进行PCR扩增得到外膜蛋白基因进行了全基因序列测定，并与我国特有的强毒株017株进行Omp11基因核苷酸序列、推导的氨酸序列以及亲水性和疏水性和二级结构的比较。结果：赖型钩体56601株和017株Omp11基因核苷酸序列及推导的氨基酸序列同源性均为99％。结论：赖型钩体56601株和017株Ompll基因核苷酸在较小判别，可能与毒力强弱有关。另外，两株钩体Ompll基因的核苷酸序列及推导的氨基酸序列同源性很高，从分子水平上说明了同型弱毒疫苗可对强毒株产生完全的免疫保护。     

首次发现一株与EHEC O157：H7血清交叉凝集的维罗纳气单胞菌温和生物变种

2002年夏季，我们对云南战区部队感染性腹泻病原监测时，从1例腹泻患者粪便标本中分离到1株氧化酶阳性，能与EHEC O157：H7诊断血清发生强凝集反应的维罗纳气单胞菌温和生物变种(Aeromonas Veronni biovar sobria)，国内未见报道，现将结果报告如下。     

某犬场犬型钩端螺旋体的分离与鉴定

目的：对疑为钩端螺旋体病的军犬病科进行致病性钩端螺旋体分离和鉴定，为钩端螺旋体病的诊断提供理论依据。方法：对病犬进行解剖观察，用犬尿液接种柯索夫培养基进行钩体的分离，然后对分离到的钩体进行菌型鉴定并用钩体外膜蛋白基因引物进行PCR检测。结果：从尿液中分离到1株钩体，经鉴定为犬群犬型，PCR扩增结果为阳性。结论：从病犬中分离到1株犬型致病钩体。     

云南省边境地区禽流感H5N1亚型病毒基质蛋白2基因进化分析

目的 了解2008-2012年云南省边境地区禽流感H5NI亚型病毒基质蛋白2(M2)和离子通道蛋白基因变异特征及遗传进化关系.方法 于2008-2012年采集云南省边境地区(越南、老挝、缅甸与云南省交界处)家禽和野生鸟类棉拭子样品1240份,经H5N1亚型特异性多重RT-PCR检测,对阳性样品病毒M基因进行扩增,克隆至pMD18-T载体测序,获得M2基因序列,并与已知参考毒株序列进行序列比对及系统发育分析.结果 自1240份样品中检出H5N1亚型阳性样品71份,阳性率为5.72％；选择其中的30份阳性样品进行病毒M2基因测序,共获得14种不同序列,存在3个不同进化分支:1.2.1、1.2.2、2,各有5、7、2份.通过基因系统发育分析发现,M2基因与HA基因呈现不同进化关系；M2蛋白涉及表位、金刚烷胺抗性和禽源、人源毒株的关键性氨基酸位点存在替代或突变.结论 2008-2012年期间云南边境H5N1亚型病毒M2基因具有遗传差异,M2基因进化分支1.2.2毒株已成为当地流行的优势毒株.     

鲎试剂用于检测人血白蛋白内毒素

药品中经常遇到的热原是细菌内毒素.在GMP条件下生产的药品的质量控制中,人们可以接受的观点是,不存在内毒素意味着不存在热原.与传统的热原质检查法——家免热原检查法相比,鲎试验法检测细菌内毒素具有特异性高、灵敏度高、快速、简便等优点.但由于血液制品中存在着干扰因素,产生抑制或增强作用,影响内毒素检测,因此,需对此干扰作用加以排除.本工作采用稀释法,并对用鲎法检测70多批人白热原的结果与家兔法进行对比.1 材料与方法1.1 材料 特异性鲎试剂(厦门鲎试剂厂,批号970520,灵敏度标示值:0.125EU/ml);细菌内毒素工作品(厦门鲎试剂厂,批号970401,10EU/安瓿),10%人血白蛋白(深圳卫武光明生物制品厂);旋涡混合器(上海医科大学仪器厂, 型号XW-80A).1ml吸管、试管等均经去热原处理.1.2 方法     

类固醇性结核病60例临床分析

目的 对60例类固醇性结核病的临床特点及激素对疗效的影响进行探讨。方法 60例类固醇性结核病初治病例与同期随机抽取的60例普通结核病初治病例,就发病类、空洞形成、病灶范围、结核菌阳性率、病死率及抗结核治疗2个月时结核菌阴转率进行比较。结果 重症结核发生率、空洞形成率、肺病灶超过2/3肺野、结核菌阳性率、病死率,类固醇组与普通组分别为18.3%与1.67%;51.7%与35%;38.3%;53.3%与20%;1.67%与0%。除空洞形成率外,各组差异均有显著性。抗结核治疗2个月时结核菌阴转率;类固醇组应用激素者76.2%,停用激素者36.4%,普通组66.7%,差异无显著性。结论 类固醇性结核病重症多,病灶广泛,结核菌阳性率、病死率高,并发症多。激素对结核菌阴转时间无影响。     

精制抗眼镜王蛇毒血清的制备

 目的研制抗眼镜王蛇毒血清,以解决被眼镜王蛇咬伤后的救治问题。方法以眼镜王蛇毒为免疫原免疫马获得免疫血浆,经盐析制备IgG,IgG再经酶解、疏水柱纯化后得到F(ab′)₂活性片段,并以免疫扩散、ELISA测定其抗体特异性,以小鼠实验法测定其中和眼镜王蛇毒能力。结果得到的抗血清F(ab′)₂冻干品纯度达90%以上。结论研制出了特异性强、效价高的抗眼镜王蛇毒血清。