比格犬口服西格列羧的毒代动力学

目的研究治疗糖尿病新药西格列羧长期毒性剂量下,原形药物在比格犬体内的毒代动力学,以评价西格列羧的全身暴露水平,确定暴露水平与给药剂量和性别的相互关系。方法采用高效液相色谱-紫外检测的方法分析比格犬血浆中的药物浓度。结果比格犬每天给药1次(6,18和54 mg.kg-1)连续14 d,d 1给药后雌性比格犬的平均AUC(0-T)值为3.4,8.4和33.0 mg.h.L-1,雄性比格犬的平均AUC(0-T)值为4.2,5.9和32.3 mg.h.L-1,d 14给药后雌性比格犬的平均AUC(0-T)值为2.5,13.9和16.0 mg.h.L-1,雄性比格犬的平均AUC(0-T)值为2.0,18.6和15.5 mg.h.L-1,对所有的剂量水平和两种性别平均AUC(0-T)值大部分与剂量相关。平均cmax值大部分也与剂量相关增高,第1次给药后雌性比格犬的平均cmax值为0.45,1.59和4.93 mg.L-1,雄性比格犬的平均cmax值为0.94,1.43和8.69mg.L-1,d 14给药后雌性比格犬的平均cmax值为0.40,2.97和3.49 mg.L-1,雄性比格犬的平均cmax值为0.39,4.16和4.01 mg.L-1。平均tmax值为2~8 h,表明吸收比较缓慢。消除半衰期t1/2在1.6~5.7 h之间,大部分为2~3 h。结论西格列羧原形药物的全身暴露水平与给药剂量的相关性为:单次给药后正相关,连续14 d给药后中高剂量组的相关性不明显。     

浅谈医院财务监管重点

财务监管是基于企业再生产过程中客观存在的财务活动和财务关系而产生的，是企业组织财务活动、处理与各方面财务关系的一项经济管理工作。企业的财务监管工作实际对于企业各项管理工作起着中心点的作用，尤为重要。而医院财务监管与企业财务监管工作一样是一项系统工程，需要认真研究其内在的机理，掌握监管重点部位，把握监管难点区域，以保证监管工作的实际效果。     

四物汤中糖类物质对辐射小鼠造血功能的影响

目的初步探讨四物汤中糖类物质与四物汤补血作用的关系。方法四物汤部位分离采用醇沉法、萃取法和大孔吸附树脂法。用辐射小鼠血虚证模型考察活性。结果将前期发现的具有提高辐射血虚模型小鼠外周血白细胞数和促进骨髓造血祖细胞增殖作用的四物汤部位C 2(正丁醇部位),用吸附树脂法分离为C 2-1(糖部分)和C 2-2(非糖部分)两个部位。活性研究表明部位C 2-1具有提高模型小鼠外周血白细胞数和促进骨髓造血祖细胞增殖的作用,部位C 2-2仅显示促进骨髓造血祖细胞增殖的作用。按照部位C 2中糖类的组成和质量分数,将D-果糖、D-葡萄糖和蔗糖混合,活性研究表明混合糖具有促进模型小鼠骨髓造血祖细胞增殖的作用,但对外周血白细胞的作用不显著。结论单、双糖类物质对四物汤促进辐射小鼠造血功能的作用有一定贡献。     

辐射防护药物的优化组合研究

目的选择目前已有的辐射防护药物(包括化学药物、中药复方及细胞因子),研究联合用药的辐射防护活性,筛选最佳药物组合,为新的急性放射损伤治疗方案提供实验依据。方法试验分为模型对照组,E0703+rhG-CSF+新型四物合用组(组合Ⅰ),E0703+rhIL-11+刺白胶囊合用组(组合Ⅱ),E0703+rhG-CSF+新型四物合用组(组合Ⅲ),E0703+rhIL-11+刺白胶囊合用组(组合Ⅳ),523+rhG-CSF+新型四物合用组(组合Ⅴ),523+rhIL-11+刺白胶囊合用组(组合Ⅵ),523+rhG-CSF+刺白胶囊合用组(组合Ⅶ),523+rhIL-11+刺白胶囊合用组(组合Ⅷ),共9组药物组合。60Coγ射线7.5 Gy照射造模,照射前24 h按组分别给予化学药物预防,照后皮下注射细胞因子,并灌胃给予中药。照射前,照射后1、4、7、10、13、16、22 d检测小鼠外周血象。照射后第7天进行祖细胞集落培养实验。结果与模型对照组比较,除组合Ⅶ外,其余各组合对外周血液成分在不同时间点呈现不同程度的促进恢复作用;而对各造血祖细胞集落的生长,组合Ⅰ、Ⅲ的作用最为显著;其中,组合Ⅲ尚有促外周血白细胞、红细胞、血红蛋白值恢复的作用;组合Ⅴ也有加速外周血液成分恢复和促进粒系生长的作用。结论综合比较,组合Ⅲ对促进外周血液各成分恢复和造血祖细胞生长均有较好效果。     

黄连碱通过线粒体损伤及内质网应激PERK-ATF4-CHOP通路导致L02细胞毒性

目的 研究黄连碱(coptisine)对正常人肝细胞L02的细胞毒性及作用机制,为临床安全用药提供参考.方法 分别以不同浓度黄连碱作用于L02细胞24 h,通过CCK-8法检测黄连碱对L02细胞存活率的影响,流式细胞仪检测细胞凋亡、线粒体膜电位和细胞内活性氧(ROS)含量的改变,激光扫描共聚焦显微镜观察线粒体膜电位和细胞内钙离子水平的变化,Western印迹检测L02细胞内Bcl-2相关X蛋白(Bax)、胱天蛋白酶3(caspase-3)、细胞色素C(cytochrome C)、免疫球蛋白结合蛋白(BIP)、蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、CCAAT增强子结合蛋白(CHOP)、激活转录因子4(ATF4)、真核生物启动因子2α(eIF2α)、caspase-12蛋白表达水平,探讨黄连碱细胞毒性的可能作用机制.结果 黄连碱能以浓度依赖方式抑制细胞存活,诱导L02细胞凋亡,可促使细胞内ROS大量蓄积,线粒体膜电位下降,细胞色素C、Bax蛋白表达量上升;同时,还可激活内质网应激PERK-ATF4-CHOP通路,显著影响相关蛋白的表达,其中BIP、CHOP、ATF4蛋白表达量升高,PERK、eIF2α蛋白表达量下降,明显诱导细胞内钙离子含量升高,激活下游因子caspase-12、caspase-3蛋白表达.结论 黄连碱可通过线粒体途径和内质网应激(ERS)途径诱导L02肝细胞凋亡,其潜在的肝毒性风险及对中药黄连安全性的影响有待进一步研究.     

天王补心丸镇静催眠活性部位的筛选

目的：观察天王补心丸四个SP825大孔吸附树脂洗脱部分的镇静催眠作用。 方法：实验于2005—06／08在军事医学科学院放射与辐射医学研究所药理毒理研究室完成。健康昆明种小鼠200只，随机数字表法分为空白对照组，阳性药组，水洗脱部位组，体积分数为0．2乙醇洗脱部位组，体积分数为0．5乙醇洗脱部位组，体积分数为0．8乙醇洗脱部位组，每组10只。空白对照组给予等体积生理盐水，阳性药组给予阳性药，其余四个受试药物组分别给予天王补心丸SP825洗脱物。①协同睡眠试验：各组末次给药后30min，腹腔注射戊巴比妥钠40mg／kg，以小鼠翻正反射消失达1min以上为入睡指标，记录睡眠时间。②自发活动试验：分别于各组末次给药30min、90min两个时间点观测小鼠自发活动，记录5min的自发活动次数。③抗惊厥试验：各组末次给药后1h，腹腔注射戊四唑溶液（65mg／kg），以小鼠前肢和头部发生阵挛性抽搐为指标，记录惊厥潜伏期。 结果：实验大鼠200只均进入结果分析。①协同睡眠试验结果：天王补心丸SP825体积分数为0．2乙醇洗脱部分能够明显延长阈剂量戊巴比妥钠引起小鼠睡眠的时间（P＜0．05）。②自发活动试验结果：给药后30min，各受试药物组的自发活动与对照组相比均无显著性差异（P＞0．05）；给药后90min，天王补心丸SP825体积分数为0．5乙醇洗脱部分能够明显减少小鼠的自发活动次数（P＜0．05）。③抗惊厥试验结果：天王补心丸SP825体积分数为0．2和0．5乙醇洗脱部分均能够明显延长戊四唑所致小鼠阵挛性抽搐的潜伏期（P＜0．05）。 结论：天王补心丸镇静催眠的活性部位是其亲水性较强的SP825体积分数为0．2和0．5乙醇洗脱部分。     

腹泻康对脾虚泄泻证大鼠免疫和消化吸收功能的影响

目的:通过观察腹泻康对脾虚泄泻证模型大鼠一般状态、免疫、消化吸收功能的影响,探讨其对脾虚泄泻证的防治作用。方法:实验于2006-06/08在军事医学科学院放射与辐射医学研究所药理与毒理研究室完成。健康SD大鼠70只,随机分成7组,即对照组、模型组、柳氮磺胺吡啶0.5g/kg组、葛根芩连丸0.75g/kg组、腹泻康1.6,0.8,0.4g/kg剂量组,每组10只,雌雄各半。造模:按20mL/kg灌服20%番泻叶浸剂,1次/d,连续7d。在灌服3d后,禁食不禁水32h,由肛门(深入8cm)注入80g/L的乙酸0.5mL,捏紧大鼠肛门,倒提20s。造模同时每天在给20%番泻叶浸剂4h后给予相应药物治疗7d,第8天检测大鼠稀便率(稀便粪粒数/总粪粒数);胸腺指数(胸腺质量/体质量)、脾脏指数(脾脏质量/体质量);血清D-木糖含量、淀粉酶活性、琥珀酸脱氢酶比活性。结果:实验大鼠70只均进入结果分析。①大鼠一般症状:给予药物治疗的各组均较对照组精神好转,食欲增强,稀便减少。②大鼠稀便率:给予药物治疗的各组均较模型组稀便率明显降低,其中葛根芩连丸0.75g/kg组、腹泻康1.6g/kg剂量组效果最显著。③大鼠体质量:实验后模型组、柳氮磺胺吡啶0.5g/kg组、葛根芩连丸0.75g/kg组、腹泻康1.6,0.8,0.4g/kg剂量组均较对照组体质量明显下降,且这6组大鼠实验后体质量均较实验前降低。但高剂量组在5,6d和低剂量组在6d与对照组体质量比较差异无显著性。④大鼠胸腺指数、脾脏指数:给予药物治疗的各组均较模型组有不同程度改善。⑤大鼠血清D-木糖含量、淀粉酶活性和琥珀酸脱氢酶比活性:模型组均较对照组明显下降(P<0.01),柳氮磺胺吡啶0.5g/kg组、葛根芩连丸0.75g/kg组和腹泻康1.6,0.8,0.4g/kg剂量组上述指标均有不同程度的改善。结论:腹泻康对脾虚泄泻证大鼠的免疫和消化吸收功能有明显的防治作用,其中腹泻康1.6g/kg剂量组效果最显著。     

复方丹参方对大鼠心脏细胞色素P450酶的影响

目的 研究复方丹参方及其单味药对大鼠心脏细胞色素P450酶（CYPs）主要亚型的影响。方法 雄性SD大鼠随机分为5组,分别用复方丹参方 [0.32 g/(kg?d)]、丹参 [0.27 g/(kg?d)]、三七 [0.05 g/(kg?d)]、冰片 [0.003 g/(kg?d)] 或生理盐水连续ig诱导处理28 d,取各组大鼠心脏组织,利用Real Time荧光定量PCR技术检测各组大鼠心脏CYPs各亚型mRNA表达水平的变化。结果 与对照组比较,复方丹参方对大鼠心脏CYP1B1、CYP2B1、CYP2E1、CYP4A1和CYP4F4的mRNA表达有下调趋势（P＜0.05）。丹参对CYP1A1、CYP1B1、CYP2B1、CYP2C11、CYP2E1、CYP2J3、CYP4A1、CYP4F4和CYP4F5的mRNA表达有下调趋势（P＜0.05、0.01）,而对CYP4A3、CYP4F1和CYP4F6的mRNA表达有上调趋势（P＜0.05）。三七对CYP1A1、CYP1B1、CYP2B1、CYP2C11、CYP2E1、CYP2J3、CYP4A1、CYP4A3、CYP4F4、CYP4F5和CYP4F6的mRNA表达均有不同程度的抑制趋势（P＜0.05、0.01）。冰片对CYP1A1、CYP1B1、CYP2B1、CYP2C11、CYP4A1和CYP4F4的mRNA表达有下调作用（P＜0.01）。结论 复方丹参方全方对心脏CYPs 亚型mRNA表达影响弱于方中各单味药对CYPs的影响,显示复方对CYPs影响可能是各单味药作用的综合和叠加,同时全方及单味药对CYP2家族和CYP4家族的影响显示其对心脏均有双向调节作用。     

三七总皂苷对大鼠肝脏药物代谢酶酶活性、mRNA及蛋白表达的影响

研究三七总皂苷对大鼠肝脏药物代谢酶酶活性、mRNA及蛋白表达的影响。将Wistar雄性大鼠随机分为9组,给予受试药后,提取肝脏微粒体,肝脏总RNA和总蛋白,分别采用底物探针法、荧光定量PCR技术和Western blot,检测三七总皂苷对肝脏药物代谢酶相关亚型酶活性、mRNA和蛋白质表达3个水平的调节作用。实验的结果是三七总皂苷能显著诱导CYP1A2和CYP2E1酶活性和mRNA表达,同时对CYP2E1的蛋白表达水平也有显著诱导作用;三七总皂苷显著诱导CYP3A mRNA表达,但对CYP3A酶活性水平无明显的影响;三七总皂苷对CYP1A1和CYP2B mRNA表达和酶活性均无明显影响。三七总皂苷对不同的P450亚型的调节作用具有选择性,主要的调节亚型是CYP1A2和CYP2E1,临床应用时,尤其是与CYP1A2和CYP2E1代谢有关药物合用时,应充分考虑到可能产生的药物相互作用以避免潜在的不良反应和毒副作用,同时对CYP2E1的诱导作用是否与人参皂苷清除自由基作用有关值得进一步研究。     

基于HK-2细胞的左金丸中生物碱类组分体外毒性筛选及机制初探

目的基于肾小管上皮细胞HK-2筛选左金丸中主要生物碱类组分对肾细胞损伤。方法采用CCK-8法和高内涵筛选技术筛选左金丸主要生物碱中潜在肾细胞损伤成分。通过细胞形态、乳酸脱氢酶和细胞色素C释放率及凋亡相关蛋白表达等进行确证,初步确定造成细胞损伤作用的生物碱,为组分中药配伍组方和配伍减毒提供体外毒理学依据。结果采用CCK-8法和高内涵技术初步筛选,表明吴茱萸碱(EVO)能够显著降低细胞数目,升高细胞膜通透性,降低线粒体膜电位。此外,细胞形态、细胞凋亡和细胞色素C表达与高内涵筛选结果一致,Western blot实验表明EVO能够诱导细胞凋亡造成肾细胞损伤。结论 EVO可明显导致肾细胞损伤,可能是通过影响线粒体、细胞色素C及细胞膜通透性诱导细胞凋亡。