人关节软骨脱细胞基质制备实验

背景对天然的细胞外基质进行处理,剔除其抗原成分,保留了组织结构的完整性,这种材料具有良好的生物相容性,能为细胞创造尽可能接近体内的培养环境,因此应是组织工程中细胞培养支架的首选.目的制备人关节软骨脱细胞基质,为进一步研究关节软骨基质作为细胞外支架材料提供方法学资料.设计以骨组织标本为实验对象,单一样本研究.单位解放军总医院骨科研究所.材料实验于2004-01/05在解放军总医院骨科研究所完成.材料来自因股骨颈头下型骨折行关节置换而切除的股骨头.方法切取人关节软骨,剪裁成3.5 mm×4.5 mm×2.0mm大小共10块,冻干处理12h,采取化学去污剂Triton X-100及DNA酶和RNA酶等试剂制备脱细胞的人关节软骨.用苏木精-伊红、番红O及软骨蛋白聚糖免疫组化染色等方法进行关节软骨脱细胞定性检测.主要观察指标脱细胞关节软骨的组织学观察以及软骨蛋白聚糖免疫组织化学染色结果.结果①苏木精-伊红染色、番红O染色均显示细胞陷窝内已无细胞结构.②软骨蛋白聚糖免疫组织化学染色阳性,提示脱细胞关节软骨基质内仍存在软骨蛋白聚糖.结论人关节软骨冻干后,经去污剂-酶等处理方法可脱去软骨的细胞成分,成功制备人关节软骨脱细胞基质.其中保留的软骨蛋白聚糖可能仍存在原有的耐压特性.     

偏二甲基肼中毒的病理学特点及近远期损伤效应研究

目的 探讨火箭推进剂偏二甲基肼(UDMH)中毒损伤的病理学特点及近期和远期损伤效应。方法 128只雄性Wistar大鼠随机分为UDMH近期和远期效应组及相应对照组,每组各8只动物。将动物置于120 L染毒柜内,注入推进剂级液态UDMH,保持染毒柜中UDMH质量浓度为8×10-4g／m3,染毒时间15 min。UDMH近期效应组于染毒后3、6、12、24、48和72 h活杀大鼠;远期效应组染毒后将动物做好标记,喂养1年。行主要器官病理形态学检查以观察UDMH染毒大鼠的近期和远期损伤效应。结果 UDMH近期效应组大鼠主要病理表现为神经系统损伤,以脑水肿为著,表现为神经细胞变性、坏死,神经轴突脱髓鞘、崩解,脑组织水肿,毛细血管扩张、充血;同时肝、肾、肺、心、脾、胃肠、胸腺、血液及骨髓等组织器官均有不同程度损伤。UDMH远期效应组大鼠1年后仍有大脑皮质神经元缺血性改变,丘脑及延髓传导束有出血及液化灶,传导纤维有解离、断裂、粗细不等、迂曲。结论UDMH中毒后2-6 h是伤情最严重的时期,中毒1年后远期损伤效应仍很明显;中枢神经系统是UDMH中毒致伤的最主要靶器官;对UDMH致伤后可能发生的远期损伤效应要进行兼顾和并治。     

利用牛胶原构建人工真皮

目的制备成纤维细胞胶原凝胶(即真皮替代物),以研究细胞的生长、分化、增生及真表皮间的相互作用,为研制大面积创面覆盖物-复合皮奠定基础。方法(1)酶消化法培养胎儿成纤维细胞;(2)制备细胞胶原凝胶,分为Ca-gel和Cf-gel组,接种后于不同时间观察两组细胞的形态变化和胶原凝胶的收缩情况;(3)细胞计数;(4)SEM观测胶原凝胶的表面是否有成纤维细胞附着;(5)HE染色。结果(1)成纤维细胞形态及增殖情况:成纤维细胞胶原凝胶形成后呈半透明状,可出现较明显的细胞增殖,并可见凝胶收缩现象,但Ca-gel组较小;人工真皮质地与颜色近似真皮组织,有一定的弹性和抗拉性,不易脆。(2)细胞计数法所得两组生长曲线基本相似。Ca-gel和Cf-gel组细胞均具有典型的细胞增殖现象,Cf-gel组细胞在后期的增殖略快于Ca-gel组。(3)扫描显微镜下可见到凝胶表面有梭形的成纤维细胞出现,且成纤维细胞紧密贴附于凝胶上。(4)HE染色可见胶原呈较均一的淡红色网状分布,成纤维细胞分布于胶原凝胶内部和表面。结论(1)培养好的细胞凝胶称之为真皮替代物,是进行皮肤器官型培养和制作复合皮的关键与基础,并可与培养的人工表皮膜片混合移植,起到促进表皮细胞的生长粘附和加速创面愈合的作用。(2)成纤维细胞在胶原凝胶中有着活跃的生物学特性,因此在研究成     

子宫内膜癌复发的高危因素分析

目的：探讨子宫内膜癌手术后复发的原因,并进行对比观察以了解复发的高危因素。方法：以2001年2月～2005年2月手术治疗的子宫内膜癌复发98例为复发组,选取同期子宫内膜癌术后无复发病例90例为无复发组,观察两组高危因素（淋巴转移、宫旁转移、宫颈转移、腹水细胞学、输卵管转移、肌层浸润深度、韧带转移、阴道转移、肉眼分型、病理类型、细胞分级）,并进行比较。结果：无复发组与复发组两组高危因素比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：子宫内膜癌复发的高危因素与临床期别、宫颈受累、肌层浸润、组织学分级、盆腔及腹主动脉旁淋巴结转移和腹腔冲洗液中有癌细胞等有着密切相关,子宫内膜癌患者的首次治疗应个体化选择手术方式。     

细胞因子及其受体在放射性肺纤维化发生中的分子病理机理研究

目的 调查几种细胞因子及其受体在放射性肺纤维化（ＲＰＦ）发生中的作用。方法 采用免疫组织化学、细胞免疫化学和原位杂交的方法对ＲＰＦ大鼠肺组织细胞进行了研究。结果 正常大鼠肺组织有ＴＧＦβ１和ＴＧＦβＲ的弱表达,照射动物肺脏ＴＧＦβ１的表达于照射后２周开始增高,从第８周直到３月表达水平最高,肺脏表达ＴＧＦβ１的部位主要是支气管上皮细胞、肺泡巨噬细胞、肺泡上皮细胞、支气管和血管平滑肌细胞以及成纤维细胞等,ＴＧＦβ２的表达变化规律除了比ＴＧＦβ１稍弱外类似于ＴＧＦβ１。ＴＧＦβＲ表达增强的时间比ＴＧＦβ１稍晚,于第８周开始增强,直到１年也保持较高水平的表达,ｂＦＧＦ和ＰＤＧＦ在照射后２～３个月表达水平明显增高。对支气管肺泡灌洗液中的细胞ＴＧＦβ１免疫细胞化学研究表明：其中的细胞,特别是巨噬细胞表达时间的出现得较早,于     

电磁脉冲辐射对小鼠生精细胞超微结构的改变

目的　探讨电磁脉冲辐射对小鼠生精细胞超微结构的改变。　方法　二级昆明雄性小鼠 1 3 8只 ,随机分为辐射组和对照组。辐射组小鼠分别接受 8× 1 0 3V/m、2×1 0 4 V/m、6× 1 0 4 V/m电磁脉冲 5次重复全身照射 ,于照射后 6h和 1、3、7、1 4、2 8、90 d观察生精细胞超微结构的改变。　结果　电磁脉冲照射后 6h～ 2 8d,精原细胞、精母细胞和精子细胞均出现核膜间隙增宽、线粒体肿胀或灶性空化、内质网扩张 ,而精原细胞还出现异染色质凝集或边移 ,核膜局灶性溶解 ,糖原颗粒减少 ;精子细胞高度水肿、核膜膨出或灶性溶解、线粒体高度肿胀、内质网显著扩张 ;精子头部形态异常、染色质浓缩不良、顶体形态结构异常等。　结论　电磁脉冲照射可引起小鼠各级生精细胞超微结构的明显损伤 ,精原细胞、精子细胞和精子是电磁脉冲辐射最敏感的靶细胞     

冬季儿童呼吸系统疾病及预防

又一个冬季来临,面对漫长的寒冬,怎样让宝宝安全过冬呢?8月30日网上有一则新闻:湖北"虎爸"野蛮育子,冬天裸体爬山高烧拒治疗。被大家热议,抄的沸沸扬扬。说的其实是华中科技大学哲学系的老师姚国华,三九天脱光儿子的衣服,任由三四岁的小伢在雪地玩雪;三伏天带儿子到山区"夏令营",每天让儿子"暴晒"两小时;儿子高烧40℃,拒绝看医生,坚持"自然痊愈"。为了让儿子的成长免受世俗限制,还给孩子取名"图非",甚至口头上把孩子喊作"土匪"。就因为这一系列"野蛮"的育儿方法,被网友戏称为"虎爸"。其实去年5月18日,也有一条新闻引起大家的广泛关注:男女童在幼     

脐动脉破裂1例

患者27岁，住院号1276。孕1产0，因停经9个月，阴道见红流水1h于1999年7月2日lam入院。入院检查：一般情况好，宫底剑下三指，胎心规律，胎头半固定。肛诊宫日客指。10d前B超检查大致正常。入院诊断：①40“W妊娠，②胎膜早破。7am产妇下床小便，阴道流出血块约soog。追问病史，阴道刚流水时，曾有两块血块。于7．30am在硬膜外麻醉下行子宫下段剖宫产术，术前诊断：①40“w妊娠，②胎膜早破名边线性胎盘早剥。经子宫下段剖宫产娩出一女活婴，胎盘自行剥离，检查胎盘脐带见：脐带附着于胎盘边缘为球拍状胎盘，胎盘母体面无凝血块压迹。脐带…     

电磁脉冲辐射对小鼠血细胞的影响

目的探讨不同场强的电磁脉冲辐射对小鼠血细胞的影响.方法雄性昆明小鼠114只,随机分为辐射组和对照组.辐射组小鼠分别接受(8×103)V@m-1、(2×104)V@m-1、(6×104)V@m-1电磁脉冲5次重复全身照射,并于照射后6 h、1 d、3 d、7 d、14 d、28 d对外周血白细胞、红细胞及其参数、血红蛋白及血小板的改变进行检测.结果3种场强的电磁脉冲照射后1 d白细胞数和淋巴细胞数均减少到最低值(P＜0.05),此后持续维持在低水平直至14 d或28 d.(6×104)V@m-1电磁脉冲照射后6 h～14 d,红细胞数和血小板数呈不同程度减少;28 d时红细胞数、HCT及Hb浓度却显著增加(P＜0.05,P＜0.01),但红细胞平均血红蛋白浓度明显降低(P＜0.05).(2×104)V@m-1和(8×103)V@m-1电磁脉冲照射后28 d内大多数时间点的红细胞数、HCT及Hb含量明显增加(P＜0.05,P＜0.01).结论电磁脉冲辐射对血细胞有一定程度的影响.     

60Co-γ射线照射对大鼠肺一氧化氮合酶和内皮素系统基因表达的影响

探讨一氧化氮合酶（ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅｓｙｎｔｈａｓｅ，ＮＯＳ）和内皮素（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ，ＥＴ）及ＥＴ转换酶（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎｃｏｎｖｅｒｔｉｎｇｅｎｚｙｍｅ，ＥＣＥ）等在受照射肺中的基因表达变化，揭示其在肺纤维化发生中的参与作用。方法用６０Ｃｏ对大鼠肺进行３０Ｇｙ照射，照后４，８，２４天提取总ＲＮＡ，分别做ＲＴ－ＰＣＲ；对照射后１，３，５个月肺组织进行ＥＴ肽的Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ和ＮＯＳ－ｍＲＮＡ原位杂交。结果照射后肺ＮＯＳｍＲＮＡ转录减弱，ＥＴｍＲＮＡ增强，ＥＣＥｍＲＮＡ在第８和２４天增强，ＥＴＢ－ＲｍＲＮＡ在第２４天转为阴性。照射后１，３，５月肺组织ＥＴ肽合成增加。照射后５个月ＮＯＳｍＲＮＡ原位杂交呈阴性。结论ＥＴ和ＮＯ之间平衡失调可能与肺纤维化发生有关。