动力型外固定支架治疗桡骨远端关节内不稳定骨折

桡骨远端骨折为骨科常见骨折，严重不稳定的关节内骨折治疗比较困难，常因复位的丢失最终导致腕关节功能障碍。近年来，许多学者采用外固定支架治疗桡骨远端不稳定骨折，取得了较好的效果。我院自2000年1月开始采用闭合复位动力型外固定支架固定，治疗桡骨远端关节内不稳定骨折24例，效果显著。报告如下。     

临床乳腺癌细胞周期蛋白非时相性表达的初步探讨

目的 初步探讨临床乳腺癌细胞的细胞周期蛋白(Cyclin)表达规律并予以归类，为进一步研究肿瘤的细胞周期机制提供依据。方法 采用Cyclin／DNA双参数流式细胞术对临床上获取的乳腺癌细胞的Cyclin(Cyclin D1、E、A和B1)和DNA表达进行检测。结果 在16例乳腺癌标本中，细胞周期蛋白的非时相性表达可以归类如下：①Ⅰ型Cyclin D1、E、A和B1均呈非时相性过表达(5例)。②Ⅱ型Cyclins D1、E、A和B1均呈低表达或不表达(3例)。②Ⅲ型Cyclin D1呈过表达并贯穿于整个细胞周期，而Cyclins E、A和B1呈低表达成不表达(3例)．④Ⅳ型Cyclins E、A和B1呈不同程度的非时相性过表达，而Cyclin D1呈低表达成不表达(5例)。结论 Cyclins在乳腺癌细胞中的非时相性表达存在着一定的规律，而每一种表达类型则显示了某一特定的细胞周期破坏机制。     

60Coγ射线照射后肿瘤细胞株的细胞周期阻滞变化

目的 观察正常人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells，PBMNCs)及几种肿瘤细胞株经^60Co源照射后其细胞周期阻滞现象的动态变化。方法 用^60Co源分别以6，10，15Gy的吸收剂量照射正常人PBMNCs及HL-60、K562、SiHA和113肿瘤细胞株。并于照射后6，12，24，48及60h以流式细胞仪测量其细胞周期变化。结果 正常终末细胞的细胞周期基本处于停滞状态，95％细胞均处于G1期，当其接受照射后依然表现周期停滞状态；除113细胞表现G1期阻滞外，其他肿瘤细胞在受到照射后，均表现G2/M期阻滞；HL-60放射敏感性较SiHA强。结论 不同种类细胞对放射线表现的细胞周期阻滞现象不同，其放射敏感性也存在差异。     

桡骨远端不稳定骨折的手术治疗

目的 探讨桡骨远端不稳定骨折的治疗方法及效果。方法 自2000年1月～2004年3月。根据不同的骨折类型分别采用闭合复位经皮克氏针固定、切开复位掌侧支持钢板内固定、闭合复位或有限切开内固定加外固定支架以及切开复位记忆合金内固定治疗桡骨远端不稳定骨折63例66侧。术中进行自体骨移植17侧。结果 63例患者中有58例60侧获随访，随访时间为5～28个月(平均14个月)。腕关节功能按Sarmiento标准进行评定，优27侧，良20侧，可9侧，差4侧。并发症包括钉道感染5侧，骨干部骨不连1侧，腕管综合征1侧，创伤性骨关节炎2侧。结论 桡骨远端不稳定骨折应根据不同的骨折类型采用不同的手术方法，每一种方法应掌握好其适应证。     

流式细胞术检测胱氡肽酶3原位激活与两种检测细胞凋亡方法的比较性研究

目的用一种新的荧光染色技术(FLICA／PI)检测放射诱导T淋巴细胞白血病细胞(MOLT-4)的细胞凋亡过程中胱氡肽酶3(Caspase3)原位激活及探讨其活性变化特点，并与亚G1峰和膜联蛋白V／碘化丙啶(Annexin V／PI)检测细胞凋亡方法的灵敏度进行比较性评价。方法以放射诱导的MOLT-4细胞凋亡为模型，用荧光标记的Caspase3抑制剂(FLICA)标记原位激活的Caspase3，然后，用流式细胞仪定量检测并分析其活性变化；同时，用亚G1峰法和Annexin V／PI检测细胞凋亡。结果FLICA／PI检测到的Caspase3激活，在照射后2h开始升高(5．84％)，而Annexin V／PI在4h时检测到的凋亡率为5．35％，FLICA／PI比Annexin V／PI可提前2h检测到细胞凋亡，Caspase3活性的出现早于细胞膜反转。FLICA阳性率在照射后4h暴发性增高至12．39％，显示有时间效应。两种检测方法均比亚G1峰法敏感，但Annexin V／PI检测的凋亡率低于FLICA／PI法。结论X-射线能诱导MOLT-4细胞凋亡，并有明显的时间效应关系；Caspase3激活有阈值效应，是照射后细胞发生凋亡过程中早于形态学变化的检测指标。用Caspase3活性检测细胞凋亡更直接，更敏感。     

三种不同培养条件下兔关节软骨细胞增殖速率的差别

目的:观察兔关节软骨细胞在3种不同培养条件下增殖速率的差别。方法:实验于2004-10/2006-10在上海长海医院血管外科实验室完成。取4周龄新西兰雄性兔6只,利用机械与酶消化的方法获得均一性兔关节软骨细胞,在单层培养条件下增殖至第2代;将第2代细胞在高密度条件下转入藻酸盐凝胶24孔培养介质,进行三维培养。根据实验目的,将24孔培养板分为单层培养对照组,三维培养组(培养液不含胰岛素样生长因子Ⅰ),含胰岛素样生长因子Ⅰ三维培养组(培养液含50μg/L胰岛素样生长因子Ⅰ),每日在倒置相差显微镜下观察软骨细胞的生长状态,进行细胞计数1周,绘制细胞生长曲线,比较3种不同培养条件下兔关节软骨细胞的增殖速率。结果:①单层培养细胞24h后开始贴壁生长,细胞形态呈多角形、星形、圆形,72h后,倒置显微镜下观察细胞增殖数目明显增多,细胞增殖呈片状;三维培养条件下的软骨细胞,刚接种至藻酸钠凝胶时,细胞形态为圆形;三维培养(含胰岛素样生长因子Ⅰ)体系中的软骨细胞从转入三维培养的第3天起,发现细胞出现分裂增殖,局部有细胞团族形成,第7天,凝胶中开始有大量的细胞团族形成。在培养过程中,三维培养软骨细胞形态始终保持圆形。②1周内,单层培养条件下的软骨细胞增殖速率要明显高于三维培养组;含胰岛素样生长因子Ⅰ三维培养组的软骨细胞增殖速率明显高于不含胰岛素样生长因子Ⅰ三维培养组。结论:单层培养方法短期内(1周)对软骨细胞的增殖作用要优于三维培养方法;胰岛素样生长因子Ⅰ对三维培养条件下关节软骨细胞具有促进增殖的作用。     

外固定支架联合带血管骨瓣植骨在距骨颈骨折治疗中的应用

目的探讨外固定支架联合带血管骨瓣植骨治疗距骨颈骨折的疗效。方法回顾性分析2004年1月～2005年3月收治的7例距骨颈骨折患者,按Hawkins分型:Ⅱ型6例,Ⅲ型1例,分别采用手法闭合复位(1例)和切开复位(6例)经皮空心螺钉内固定治疗,7例患者均在上述处理后加外固定支架跨关节固定联合带血管的骨瓣植骨治疗。术后观察骨愈合、骨坏死及后足功能情况。结果7例患者均获得随访,随访13～24个月,平均17个月。7例均获骨性愈合,无一例发生缺血性骨坏死。后足功能按Maryland评分系统进行评估,结果:优5例,良2例。1例合并距骨体骨折患者出现明显的胫距关节骨关节炎,最后行胫距关节融合术。结论外固定支架联合带血管骨瓣植骨能有效地防止距骨颈骨折后缺血性骨坏死,但远期效果尚须进一步观察。     

转化生长因子-β1对乳腺癌细胞株增殖和T淋巴细胞免疫的影响

目的检测转化生长因子(TGF)-β1对乳腺癌细胞株增殖能力和T淋巴细胞免疫的影响,探讨TGF-β1在乳腺癌演进过程中的作用。方法噻唑蓝(MTT)比色法检测TGFβ1对乳腺癌细胞株MCF7、MDAMB157、SKBR3和MDAMB453增殖的影响,探求其调控细胞生长的浓度效应和时间效应。酶联免疫吸附试验(ELISA)检测TGFβ1作用于体外培养的外周血单个核细胞(PBMC)前后白细胞介素(IL)2和干扰素(IFN)γ的分泌。结果作用72h内TGFβ1对乳腺癌细胞有增殖抑制作用(P<0.05),不同的浓度(1.0～100.0)μg/L产生的效果不同。96h后效应减弱至消失。在TGF-β1作用下,PBMC培养上清中IL2(296.5±79.4)ng/L和IFNγ水平(665.3±107.0)ng/L明显低于无TGFβ1作用组(644.9±105.5)ng/L和(922.3±184.1)ng/L,(P<0.01)。结论TGFβ1对乳腺癌细胞的增殖有短暂抑制作用,在一定浓度范围内呈剂量依赖性,作用时间有限。TGF-β1能降低T细胞的细胞因子释放,抑制细胞免疫。     

结直肠癌细胞主要Cyclins(D1、E、A、B1)表达类型与其生物学行为的关系

目的 观察人类主要细胞周期素(Cyclin D1、E、A、B1)在结直肠癌中非时相表达特征,探讨主要细胞周期素表达分型与结直肠癌生物学行为的关系.方法 用流式细胞术(FCM)双参数法半定量检测83例结直肠癌手术切除标本细胞中Cyclin D1、E、A、B1表达.根据不同Cyclin在细胞周期中的作用及其异常表达特征,将其表达分为不同类型及亚型结合临床病理学资料进行分析.结果 结直肠癌细胞Cyclin(D1、E、A、B1)异常表达大致可归为5种类型:Ⅰ型Cyclin(D1、E、A、B1)均高表达;Ⅱ型Cyclin D1低表达,Cyclin(E、A、B1)均不同形式高表达;Ⅲ型Cyclin D1不表达,Cyclin(E、A、B1)均不同形式高表达;Ⅳ型Cyclin D1不表达,Cyclin(E、A、B1)不同形式低表达;Ⅴ型Cyclin(D1、E、A、B1)均不表达;Ⅱ型→Ⅳ型根据不同周期内Cyclin的优势表达分为相应不同的亚型.a亚型:Cyclin(E、B1)表达为主;b亚型:Cyclin E表达为主;c亚型:Cyclin B1表达为主;d亚型:Cyclin(E、A、B1)表达为主.主要Cyclins表达类型与结直肠癌淋巴结转移率、转移程度、浸润程度明显相关(P＜0.01).主要Cyclins表达类型Ⅰ→Ⅴ型结直肠癌淋巴结转移率、转移程度、浸润程度呈上升趋势.结直肠癌的生长方式和细胞分化程度与主要Cyclins表达类型的亚型明显相关(P＜0.01).结论 主要Cyclins(D1、E、A、B1)表达类型与结直肠癌生物学行为有关,可以作为一种体现结直肠癌生物学行为较为客观的分类方法.     

椎间盘退变疾病的基因治疗研究进展

椎间盘退变是受诸如年龄、机械物理、细胞、基因以及生化因子等多种因素影响的复杂的病理生理改变~([1,2]).目前各种手术及保守治疗手段仅仅是针对椎间蕊退变引起的各种临床症状的治疗,而不是从恢复椎间蕊细胞功能的角度上去逆转椎间盘的退变.