硼替佐米和来那度胺对NK/T淋巴瘤细胞作用的实验研究

目的 通过体外细胞培养观察硼替佐米和来那度胺对NK/T细胞淋巴瘤(NK/TCL)细胞株凋亡的作用,寻找治疗NK/T淋巴瘤的潜在药物。 方法 利用台盼蓝拒染法检测细胞活力及计数细胞,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布,Annexin V/PI法检测细胞凋亡。 结果 硼替佐米对SNK-1、SNK-6、SNT-8有明显的细胞毒作用,在临床治疗浓度下显著诱导凋亡而减少细胞的存活。硼替佐米(30 nmol/L)作用24 h,SNK-1、SNK-6、SNT-8细胞存活比例分别为(47.2±3.5)%、(33.5±3.9)%、(52.1±4.3)%,与对照组相比差异均有统计学意义(P＜0.01)。硼替佐米对3种细胞株活性抑制IC50的浓度分别为19.5、12.7、20.7 nmol/L。流式细胞术对细胞凋亡检测发现硼替佐米对SNK-1(30 nmol/L)、SNK-6(10 nmol/L)、SNT-8(30 nmol/L)细胞株均有显著的诱导凋亡作用,作用24 h后凋亡率为(47.0±4.2)%、(43.0±3.8)%、(53.0±4.1)%。来那度胺对3种细胞株的存活和增殖无显著作用,对细胞周期的分布也无明显影响。来那度胺联合硼替佐米无协同促进细胞凋亡作用。 结论 硼替佐米是选择性的蛋白酶体抑制剂,具有诱导NK/TCL细胞株凋亡的作用,可能有成为NK/TCL治疗药物的潜在价值。来那度胺在体外实验中对NK/TCL细胞株无显著作用,与硼替佐米亦无协同作用,体内是否具有抗肿瘤活性尚需进一步的研究。      

主观皮肤类型与皮肤屏障功能的关系

目的:比较不同主观皮肤类型(油性、中性和干性皮肤)屏障功能指标的差异。方法:利用无创性方法对自评为油性、中性和干性皮肤的20~25岁北京城市女性(各30例)进行皮脂分泌率(SER)、角质层含水量、p H值和经皮肤水分丢失(TEWL)值的检测,并采用胶带连续粘脱后监测TEWL值变化的方法评价角质层完整性,采用角质层取样蛋白定量的方法评价角质层黏合力和丝氨酸蛋白酶活性。结果:主观皮肤类型为中性皮肤者具有最佳的屏障功能;干性皮肤和油性皮肤者面颊部的屏障功能均有不同程度的受损,表现为TEWL值明显升高、p H值升高、丝氨酸蛋白酶活性增加;但二者也有区别,油性皮肤者角质层完整性下降更明显,而干性皮肤主要是角质层黏合力明显减弱。结论:自评为油性和干性皮肤者与中性皮肤者相比,屏障功能均存在一定程度的缺陷,油性皮肤与干性皮肤均具有不同特点,且与其屏障受损的机制不同有关。     

活血化瘀中药治疗眼睑带状疱疹后遗神经痛临床观察

目的观察中药桃红四物汤联合西药治疗眼睑带状疱疹后遗神经痛(PHN)的临床疗效。方法回顾性研究我院眼科近年来收治的60例眼睑PHN患者,根据治疗方法分为对照组和治疗组各30例。对照组给予阿昔洛韦注射液静滴,1次/d,连用1周,布洛芬片和甲钴胺片口服,3次/d,连用2周;治疗组在对照组基础上加用中药桃红四物汤水煎服,1剂/d,连用2周。治疗2周后,比较2组治疗前后疼痛程度视觉模拟评分(VAS)和睡眠质量评分(QS),以及临床疗效。结果治疗1周和2周后,2组VAS评分均逐渐降低,且治疗组低于对照组(P0.05);2组QS评分均逐渐降低,且治疗组高于对照组(P0.05)。治疗组临床总有效率83.4%,高于对照组的63.4%(P0.05)。治疗组在有效率、减轻疼痛症状及改善睡眠质量等方面均优于对照组。结论中药桃红四物汤联合西药治疗眼睑PHN疗效肯定,安全性好。     

miRNA-181a对多发性骨髓瘤细胞生物学特性影响的初步研究

目的 探讨miRNA-181a(miR-181a)在多发性骨髓瘤(MM)患者中的表达情况及其对MM细胞生物学特性的影响.方法 应用免疫磁珠筛选的方法分离并纯化25例初治、复发难治MM患者及10例非恶性血液病患者骨髓CD138+细胞,应用实时定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测miR-181a表达情况.同时检测RPMI 8226、H929及U266三种MM细胞株中miR-181a的表达.应用miR-181a抑制剂及激动剂观察下调和上调miR-181a表达对MM细胞生物学特性的影响,并对miR-181a进行靶基因预测.结果 与非恶性血液病患者相比,MM患者CD138+细胞中miR-181a表达上调.对MM细胞株的观察发现,与非恶性血液病患者骨髓CD138+细胞相比,RPMI 8226及U266细胞株miR-181a高表达,而H929细胞株则低表达.相比对照组,应用100 nmol/L miR-181a抑制剂下调miR-181a后,U266细胞的增殖活力在24、48及72 h分别为(50.5±4.1)%、(52.3±2.2)%和(69.5±4.3)%,低于对照组的(67.1±3.3)%、(71.5±3.6)%和(78.1±5.4)%(均P<0.05),提示细胞增殖受抑.而应用100 nmol/L miR-181a激动剂上调miR-181a后,H929细胞在24、48 h时的增殖活力分别为(38.5±3.6)%和(82.2±6.9)%,高于对照组的(21.2±2.4)%和(61.3±5.4)%(均P<0.01),提示细胞增殖增强.细胞周期分析提示,miR-181a抑制剂使U266细胞周期阻滞在G0/G1期.细胞药敏实验结果显示,多柔比星、紫杉醇及5-氟尿嘧啶作用后,与药物单独处理的细胞相比,miR-181a抑制剂下调U266细胞miR-181a表达的细胞增殖活力下降.在48 h和72 h的吸光度(A)值显著低于对照组.细胞迁移实验显示,miR-181a抑制剂下调miR-181a能抑制U266细胞的迁移能力,实验组细胞的迁移比例为(62±10)%,低于对照组的(89±12)%(P<0.05),而miR-181a激动剂则能提高H929细胞的迁移能力,实验组细胞的迁移比例[(242±9)%]高于对照组的(98±8)%(P<0.01).结论 MM细胞高表达miR-181a.miR-181a的高表达可能会促进MM细胞的增殖、转移及耐药,可能与MM患者预后有关,是MM预后评估一个重要的候选生物标志物.对miR-181a靶基因进行进一步预测,同时应用基因缄默的策略可能会改善MM患者的预后.     

大疱性系统性红斑狼疮合并狼疮肾炎一例

患者,女性,29岁。主因脱发2年,水肿伴疱疹1个月余就诊。血常规正常,尿常规RBC 6-10个/HP,24小时尿蛋白定量4.29 g,血白蛋白19.9 g/L。自身抗体ANA1:10000（S）,抗ds-DNA(+),抗Sm（+）,抗nRNP(+)。IgG 21.8g/L,补体C3：0.292 g/L,C4:0.037 g/L。确诊为系统性红斑狼疮伴狼疮肾炎,皮损组织病理检查：表皮下水疱形成,真皮乳头明显嗜中性细胞浸润,真皮中层血管周围灶状淋巴细胞浸润。免疫组化：皮肤直接免疫荧光法见基底膜带IgG阳性。诊断：大疱性系统性红斑狼。予甲强龙1 mg/Kg,联合环磷酰胺及硫酸羟氯喹治疗1周,患者狼疮性肾炎好转,但疱疹仍加重。予甲强龙冲击250mg×3天,加用盐酸米诺环素后好转。     

ATRA对人骨髓间充质干细胞成脂肪细胞分化及瘦素生成的影响

目的 探讨全反式维甲酸(ATRA)对人骨髓间充质干细胞(BMSC)成脂肪细胞分化及瘦素(Lp)生成的影响.方法 体外分离、培养和鉴定BMSC.在诱导培养液中加入不同浓度的ATRA进行成脂肪分化诱导,光学显微镜下油红O染色观察BMSC分化情况;RT-PCR和Western blotting测定细胞过氧化物酶体增殖激活性受体γ(PPARγ)和脂肪酸结合蛋白4(FABP4)基因及相应蛋白表达;RT-PCR和ELISA法检测分化过程中细胞Lp基因表达及蛋白分泌水平的变化.结果 ATRA(0.1～1.0μmol/L)作用后,BMSC向脂肪细胞分化呈现浓度依赖性抑制,PPARγ、FABP4 mRNA和蛋白表达均呈现一致性下降;诱导后细胞Lp mRNA表达和蛋白分泌显著减少.结论 0.1～1.0μmol/L ATRA可抑制BMSC向脂肪细胞分化及其Lp生成,其机制可能与下调PPARγ和FABP4表达有关.