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截短型HBsAg中蛋白反式激活基因的克隆 总被引:20,自引:0,他引:20
目的:应用抑制性消减杂交技术构建乙型肝炎病毒(HBV)截短型中蛋白(MHBs^t)反式 激活基因差异表达的cDNA消减文库,克隆HBV截短型中蛋白反式激活相关基因。方法:以HBV截短型中蛋白表面质粒pcDNA3.1(-)-Tt167转染HepG2细胞,以空载体pcDNA3.1(-)为对照;制备转染后的细胞裂解液,提取mRNA并逆转录为cDNA,经Rsa I酶切后,将实验组cDNA分成两组,分别与两种不同的接头衔接,再与对照组cDNA进行两次消减杂交及两次抑制性聚合酶链反应(PCR),将产物与T/A载体连接,构建cDNA消减文库,并转染大肠杆菌进行文库扩增,随机挑选克隆PCR扩增后进行测序及同源性分析。结果:成功构建人HBV截短型中蛋白反式激活基因差异表达的cDNA消减文库。文库扩增后得到94个白色克隆,进行菌落PCR分析,均得到200-800bp插入片段。挑取50个插入片段测序,并通过生物学信息学分析获得其全长基因序列,结果共获得23种编码基因,包括19种已知基因的4种未知基因。结论:筛选到的cDNA全长序列,包括一些与细胞生长调节、免疫应答及肿瘤发生密切相关的蛋白编码基因,因此可能是HBV截短型中蛋白反式激活靶基因。 相似文献
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在前期转诊3例疑似新型冠状病毒肺炎(coronavirus disease 2019,COVID-19)产妇分娩的新生儿基础上,参考相关文献,制订新生儿转诊流程,包括转诊前的准备和转诊具体实施2个部分。转诊前的准备包括:转运人员的管理、转运机构的设置、绿色通道的建立等;转诊具体实施包括:转诊评估、转诊对象的分级、确定收治原则、转诊人员及物资准备、接诊、转出等7个方面。旨在保障疑似或确诊COVID-19产妇分娩的新生儿能够得到安全、有效、快速的救治,切断新型冠状病毒在新生儿转诊中的传播途径,保障新生儿及医护人员的生命健康。 相似文献
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门诊部"三长一短"成因及改善方法探究 总被引:5,自引:0,他引:5
目前,各三级医院门诊部均不同程度存在“三长一短”的现象,且随着就诊人次数和病人需求的变化而不断变化。各医院对于“三长一短”的定义略有不同,归纳起来主要是:就诊前挂号候诊时间长、就诊中化验检查时间长、就诊后收费取药时间长,而就诊时间短,主要体现了患者在医院的滞留时间长,而得到医师诊察时间短的问题。合理解决这一问题,是提高医院管理质量和服务水平的关键环节之一。1造成“三长一短”的原因1.1我国卫生资源配置不尽合理,各级医疗机构医疗水平相差较大,但收费相差不大,患者无论是大病、小病、急性病、慢性病都选择到三级医院就… 相似文献
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2014年8月世界卫生组织(WHO)及埃博拉病毒病(Ebola virus disease,EVD)疫情最严重的西非3国向国际社会发出紧急医疗援助请求.受中国政府派遣,中国人民解放军迅速向受灾国派遣医疗队并运送医疗援助物资及装备;6批次共500余人的解放军医疗队先后奔赴塞拉利昂和利比里亚展开临床病例诊治、感染防控及医疗卫生培训工作.解放军医疗队在塞拉利昂、利比里亚分别建造和独立运营了2所各有78张床位和100张床位的EVD留观与治疗中心,截止2015年3月20日共收治EVD疑似患者883例(确诊患者295例),实现所有队员“零感染”.作者重点介绍了解放军医疗队执行援非抗埃任务过程中,在行动筹备、EVD临床管理、感染防控等方面的探索及收获,为今后执行类似任务提供参考. 相似文献
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我军非战争军事行动卫生防疫保障在各方面的努力下取得了显著成绩,但仍存在诸如组织指挥缺乏统一性权威性、高级卫生防疫专家缺乏等问题.通过对汶川抗震救灾期间卫生防疫保障工作实践,提出通过统筹资源,完善我军应急保障体系;军地联合,构建科学高效组织指挥体系;突出重点,培养复合型防疫人才;大力加强卫生防疫科技创新研究;积极加快卫生防疫装备器材配套研制;努力改善卫生防疫力量的支撑条件;大力推进战略投送力量建设;立足自身解决心理问题等提高我军非战争军事行动卫生防疫保障能力的主要对策. 相似文献
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丙型肝炎病毒非结构蛋白NS5A反式激活SV40病毒早期启动子的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:探讨丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS5A的反式激活作用。方法:扩增HCV NS5A基因,构建HCV NS5A基因真核表达载体pcDNA3.1(-)—NS5A;并转染肝母细胞瘤细胞系HepG2细胞,免疫印迹方法检测转染细胞中HCV NS5A蛋白的瞬时表达;与报告质粒pCAT3--promoter共转染HepG2细胞,用酶联免疫吸附方法检测细胞中氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性。结果:质粒pcDNA3.1(-)—NS5A在HepG2细胞瞬时表达HCV NS5A蛋白,共转染实验中pcDNA3.1(-)—NS5A组的CAT表达活性是空质粒对照组的3.8倍。结论:构建的表达载体能在哺乳动物细胞中表达出相应蛋白,并能够反式激活SV40病毒早期启动子。本研究为进一步克隆HCV NS5A蛋白反式激活的靶基因,深入阐明HCV NS5A蛋白致肝细胞癌发生的分子生物学机制提供依据。 相似文献
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学科设置是医院学科建设的重要组成部分,关系到医院的可持续发展.传染病专科医院的学科设置应结合传染病的发病情况、不同病种和不同患者群体的需求,兼顾传染病患者的心理需求.现试就传染病专科医院学科设置进行一些探讨. 相似文献