细胞生长因子在神经康复与神经可塑性中的研究进展北大核心CSCD

细胞生长因子是一类具有刺激细胞生长分裂活性的多肽类因子,具有广泛的生物学作用。细胞生长因子不仅调控机体生长发育等正常生理功能,还在神经损伤等病理过程中调节神经康复及神经可塑性,具体表现为促进神经元存活;促进神经再生,调节突触可塑性;促进细胞分化与血管再生,调节微环境;促进神经纤维髓鞘形成,改善神经传导。本文旨在探讨细胞生长因子在神经康复与神经可塑性中的作用机制和应用,以期提供细胞生长因子在康复领域的研究进展和在临床神经康复治疗中的应用前景。     

FGFR3真核表达载体的构建及其在人白血病细胞系K562中的表达

目的：构建成纤维细胞生长因子受体3（FGFR3）真核表达载体MSCV/puro-fgfr3-WT和MSCV/puro-fgfr3-DN,并检测FGFR3蛋白在人白血病细胞系K562中的表达。方法:通过PCR法获得FGFR3全长基因（fgfr3-WT）和截短失活型的FGFR3（fgfr3-DN）,经双酶切后与真核表达载体MSCV/puro连接,构建MSCV/puro-fgfr3-WT和MSCV/puro-fgfr3-DN重组表达质粒。经PCR、双酶切及测序鉴定正确后,脂质体介导转染至人白血病细胞系K562中,经puromycin抗性筛选后,Western blotting法和流式细胞术检测细胞中FGFR3蛋白的表达。结果：PCR法鉴定MSCV/puro-fgfr3-WT和MSCV/puro-fgfr3-DN重组质粒,2个质粒分别扩增出2　400 bp的fgfr3-WT全长基因片段和1　200 bp的fgfr3-DN截短型片段,表明成功扩增fgfr3-WT全长基因和1　200 bp的fgfr3-DN基因;双酶切MS
CV/puro-fgfr3-WT重组质粒,获得2　400 bp的目的基因片段;测序显示,fgfr3-WT片段大小为2　400 bp,Blast对比分析表明测序结果与GenBank中的FGFR3序列完全一致。fgfr3-DN片段大小与预先设计的序列完全一致,表明成功构建野生型FGFR3和突变失活型FGFR3真核表达载体;Western blotting 检测,与对照组（K562-MSCV）比较,MSCV/puro-fgfr3-WT转染组（K562-WT）FGFR3蛋白表达水平增加,表达水平是对照组的10倍以上;MSCV/puro-fgfr3-DN转染组（K562-DN）的截短型的FGFR3（K562-DN）高表达,而对照组和K562-WT转染组则无此片段;流式细胞术检测,K562-WT组有57.5%的细胞高表达FGFR3,K562-DN组有41.5%的细胞高表达FGFR3-DN。结论：成功构建高表达野生型和突变型FGFR3的人白血病细胞系K562。     

雷帕霉素栓剂的制备及质量评价

目的：制备一种含雷帕霉素的聚乙二醇栓剂,并对其质量进行评价。方法：以雷帕霉素为原料药,聚乙二醇2000和聚乙二醇4000为主要基质,热熔法工艺制备含药栓剂,并对其药物含量、重量差异、融变时限、药物溶出等进行评价。结果：雷帕霉素聚乙二醇栓剂外观呈白色半透明状,室温下保持较好的硬度,药物含量、重量差异和融变时限均符合栓剂要求,药物在释放介质中约25min释放达到75％以上。结论：本研究制备的雷帕霉素聚乙二醇栓剂符合中国药典栓剂质量检测要求,有望开发成雷帕霉素的一种新剂型。     

改构aFGF在角膜内皮细胞中的分泌表达及意义

目的观察改构型人酸性成纤维细胞生长因子(m-haFGF)真核表达载体(pSecTag/m-haFGF)在培养的兔角膜内皮细胞中的分泌表达,探讨其表达产物对由生理盐水损伤的角膜内皮细胞的保护作用。方法采用脂质体转染的方法,将psecTag/m-haFGF转染培养的兔角膜内皮细胞,用免疫印迹法检测m-haFGF的表达情况,同时用生理盐水造成细胞损伤,用MTT法检测细胞存活状况。结果角膜内皮细胞在转染m-haFGF基因后能够表达目标蛋白,未转染组为阴性;MTT显示,转染后损伤的细胞存活状况明显好于未转染组(P<0.05)。结论转染pSecTag/m-haFGF能够在培养的兔角膜内皮细胞中分泌表达,其基因表达产物对生理盐水造成的角膜内皮细胞损伤具有保护作用。     

成纤细胞生长因子应用于冠心病治疗的研究现状

缺血性心脏病是当代死亡率较高的疾病之一，对人类的健康带来严重的威胁。近年来，人们发现一些生长因子有促进缺血组织的血管新生和加速侧枝循环建立的作用，为改善心肌缺血，治疗冠心病提供了新的思路和方法。本文就FCF(Fibroblast Growth Factor,FGF)的研究现状作相关的综述，国内外的实验研究表明，良好的冠脉侧枝血管可改善缺血心肌的血供，FGF对诱导缺血组织的血管再生改善血液循环具有重要的意义。     

6-羟基多巴胺两点注射法建立帕金森病模型大鼠的行为学与组织病理学特征

目的：探讨提高6-羟基多巴胺(6-hydroxy dopamine，6-OHDA)诱发帕金森病大鼠模型成功率，并能缩短其成模周期的方法。方法：实验于2004-05-08／07-12在暨南大学医学院解剖教研室进行。采用SD雄性大鼠24只，随机分为实验组(18只)，对照组(6只)，通过脑内立体定向术，将6．OHDA注入实验组大鼠左侧黑质致密部(substantia nigra pars compacta,SNC)和中脑腹侧被盖区(ventral tegmental area，VTA)以建立帕金森病模型，观察大鼠行为变化及黑质细胞形态学改变。结果：实验组大鼠经APO诱导后，有15只(83．3％)向右侧旋转速度&;gt;7r／min(30min旋转&;gt;210r)，术后2周与术后3，4周之间大鼠旋转行为差异无显著性意义(|P&;gt;0．05)。成功模型鼠经Nissl染色可见左侧SNC和VTA区神经元数目较对侧明显减少，对照组无旋转行为和形态学改变。结论：应用6-OHDA于单侧SNC，VTA两点注射可明显提高帕金森病大鼠模型成功率，加大6-OHDA的注射剂量可以缩短其成模周期。同时，注射部位的准确性和注射速度及留针时间都至关重要。     

扩张力作用下大鼠顶骨矢状缝成骨活动的定量分析

目的对扩张力作用下骨缝改建过程中成骨活动进行定量分析.方法 72只鼠龄7周左右SD大鼠,随机分为正常对照组、手术对照组、实验加力组,分别在实验第4,7,14天时各处死8只.取材制片后,采用免疫组化SP法进行内源性骨形成蛋白免疫组织化学染色,通过显微图像分析系统测量骨骨缝边缘长、骨缝组织面积、骨缝组织的面积积分光密度和骨缝组织的平均光密度.结果①加力后第4天组和第7天组实验动物的骨缝组织面积显著增加.②加力后第7天,骨缝组织中骨骨缝边缘长、骨缝组织面积积分光密度和平均光密度最高.③加力后第14天骨骨缝边缘长较加力后第7天组没有显著性差异.结论①加力后第7天骨缝纤维组织保持活跃增殖.②第7天时骨缝组织成骨活动最活跃.③第14天时沿着骨缝边缘的骨沉积和骨基质矿化持续活跃进行.     

黄精的研究进展及其质量标志物的预测分析

黄精是中国传统的中药材,主要分布于北温带和北亚热带,广泛分布于我国南方广大地区。随着对黄精药理、药物化学及临床研究的逐步深入,黄精属植物的活性部位及有效成分的研究也为新药研发所重视。着重对黄精资源、化学成分、主要药理活性进行总结。黄精的多种化学成分,包括多糖、甾体皂苷、三萜、生物碱、木脂素、黄酮、植物甾醇等,其中多糖和甾体皂苷类成分在黄精中量较大,为其主要药效成分。在此基础上,比较黄精、滇黄精和多花黄精中的主要化学成分的差异性,为确定黄精质量标志物提供依据;并研究黄精多糖、甾体皂苷和异黄酮类化合物对主要药效的贡献。建议开展黄精质量标准和质量标志物研究,选择质优的黄精进行黄精多糖、甾体皂苷和异黄酮类化合物的定性、定量分析,为定量标准的制定提供科学数据。     

莪术油注射液抗新型冠状病毒作用的体内外研究

体外制备严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)类病毒细胞株,用不同浓度莪术油处理类病毒细胞株,观察检测细胞数和相对荧光值(RLU),计算其半数有效抑制浓度(IC50);临床纳入新型冠状病毒肺炎患者4例,对照组和试验组各2例,对照组常规治疗,试验组在常规治疗的基础上联用莪术油注射液,观察患者核酸转阴率、转阴时间、肺部影像学变化、退热时间、临床改善时间和不良事件发生情况等。体外实验,随着莪术油浓度增加,相对荧光值逐渐降低,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),IC50值为0.26μg/ml;体内研究：试验组病例1粪便新型冠状病毒核酸3 d转阴,病例2咳嗽症状明显缓解,观察肺部影像学有明显吸收;对照组咽拭子新型冠状病毒核酸转阴时间分别为5、7 d。试验组均无不良事件发生。莪术油体外对SARS-CoV-2类病毒具有较强抑制作用,且具有浓度依赖性。COVID-19在常规治疗的基础上联用莪术油注射液可改善患者因SARS-CoV-2感染引起的咳嗽、促进SARS-CoV-2转阴及肺部病灶吸收,降低肺损伤,且未产生明显的不良事件。     

aFGF核转位序列的敲除后蛋白结构稳定性及促分裂活性的变化

目的 通过比较野生及重组人类酸性成纤维细胞生长因子（waFGF,raFGF）的蛋白结构稳定性、细胞增殖活性的影响,探讨核转位序列的敲除对aFGF促分裂活性的影响.方法 Western-blot检测waFGF和raFGF两种蛋白结构稳定性;MTT法检测NIH3T3细胞增殖,即促细胞分裂活性;流式细胞术检测其对细胞周期的影响;同时,检验肝素（HS）对waFGF和raFGF有关生物学作用.结果 waFGF的结构稳定性大于raFGF;细胞增殖实验表明,waFGF的促分裂活性大于raFGF,P＜0.05.在肝素的参与下,waFGF和raFGF表现出更大的促分裂活性;结论 与waFGF比,raFGF的结构稳定性小于waFGF,具有较弱的促分裂性,仍具有刺激DNA合成和细胞增殖的能力.肝素具有增强aFGF活性的作用,可作为aFGF体外实验中模仿机体内环境的辅助因子.