16S rDNA序列在诺卡菌菌种鉴定中的价值研究

目的评价16S rDNA序列在诺卡菌菌种鉴定中的应用价值。方法对 13种49株诺卡菌(43株标准株和6株临床株)16S rDNA序列片段进行PCR扩增,将扩增片段进行纯化后测序,从GenBank上下载32株诺卡菌(包括星形诺卡菌,少食诺卡菌,短链诺卡菌等)及3株棒状杆菌(Corynebacterium,C.),3株弗兰克氏菌属(Frankia,F.),3株分支杆菌(Mycobacterium,M.),3株链霉菌(Streptomyces,S.)的16S rDNA序列。对所测得的诺卡菌序列及GenBank所报道的诺卡菌序列用DNASTAR程序分析处理,计算种内及种间相似性,用Mega6.06构建诺卡菌菌种系统进化树。结果在81条受试诺卡菌16S rDNA序列中,16S rDNA能将诺卡菌大致可分为11群,除了不能将亚种分离外,诺卡菌其他种属均能得到很好的分离。诺卡菌16S rDNA种内及亚种内相似性为99.1% ~ 100%;种间相似性在95.7% ~ 98.8%之间。结论16S rDNA序列分析是一种快速,简单,特异性较好的诺卡菌菌种鉴定方法,能将诺卡菌鉴定至种的水平。     

镍钛合金环抱器治疗多发性肋骨骨折的临床应用

目的 探讨应用镍钛合金环抱器治疗多根多处肋骨骨折的效果.方法 分析32例应用镍钛合金环抱器治疗多处肋骨骨折的临床资料.结果 术后胸痛显著减轻,胸壁稳定,呼吸功能恢复痊愈出院,术后2个月复查,无明显胸廓塌陷畸形,×线胸片示内固定牢固,肋骨骨折端骨性愈合.结论 应用镍钛形状记忆合金环抱器治疗多发性肋骨骨折具有创伤小、操作简便、手术时间短、固定可靠、组织相容性好以及并发症少等优点,是一种治疗多发性肋骨骨折较理想的方法.     

注射用苦参碱治疗急性黄疸型肝炎50例临床观察

目的 观察注射用苦参碱治疗急性黄疸型肝炎的临床效果.方法 100例急性黄疸型肝炎患者随机分为治疗组和对照组,治疗组给予甘利欣、还原型谷胱甘肽等保肝治疗,采用注射用苦参碱150mg加入5%葡萄糖溶液250ml中静脉滴注,1次/d;对照组给予甘利欣、还原型谷胱甘肽,门冬氨酸钾镁等保肝治疗,疗程4周.结果 治疗结束时治疗组在退黄及缩短疗程方面明显优于对照组(P<0.05).结论 注射用苦参碱治疗急性黄疸型肝炎能明显提高临床疗效,有明显的退黄作用,缩短疗程,副作用少.     

克隆、表达和纯化具有生物学活性的巴西诺卡菌P61蛋白

目的构建巴西诺卡菌P61基因原核重组表达载体,在大肠杆菌中表达具有生物活性的P61蛋白,为P61蛋白的进一步相关研究提供实验基础。方法通过基因合成的方法合成P61基因,将其插入到质粒pET30a(+)载体并导入BL21大肠杆菌,应用IPTG进行诱导表达。通过Western Blot对表达产物进行分析。应用过氧化氢酶检测试剂盒检测其过氧化氢酶活性。结果 P61蛋白在大肠杆菌中可溶性表达,且具有较高的过氧化氢酶活性,能被感染巴西诺卡菌的小鼠血清识别。结论成功构建了巴西诺卡菌P61蛋白的原核表达质粒,并能在原核表达宿主E.coli BL21中进行高效表达,且表达产物具有过氧化氢酶活性。     

肝硬化并发自发性细菌性腹膜炎临床分析

目的探讨肝硬化患者并发自发性细菌性腹膜炎的临床特点、感染细菌的种类及临床转归情况;在今后临床中对此类患者早发现、早治疗,减少相关危险因素,提高生存率。方法对本院消化内科近几年住院的肝硬化并发自发性细菌性腹膜炎患者48例临床资料进行回顾性总结、分析。结果 48例中,治愈18例（37.5%）,好转14例（29.17%）,死亡16例（33.33%）,死亡原因主要为肝肾综合征,其次为上消化道出血及肝性脑病。结论积极治疗肝硬化及并发症,早诊断、早治疗自发性细菌性腹膜炎是降低相关危险因素,提高肝硬化患者生存率的关键。     

福氏痢疾杆菌2b血清型菌株基因组中SfII和SfX前噬菌体整合位点及排列方式研究

目的 研究福氏痢疾杆菌2b血清型菌株中SfII和SfX前噬菌体整合位点及排列方式.方法 根据2b血清型菌株基因组中SFII和SfX前噬菌体可能的整合位点及排列方式,设计引物,对50株2b血清型菌株进行PCR扩增,并对扩增产物测序,根据扩增和测序结果判断噬菌体的整合位点和排列方式.结果 在2b血清型菌株中,SfII和SfX前噬菌体前后相连,整合于宿主菌染色体proA和yaiC基因间的thrW tRNA基因上;以SfII在前,SfX在后,或SfX在前,SfII在后两种方式排列;而以后一种方式为主,在共50株检测菌株中,有49株为此方式.结论 福氏痢疾杆菌血清型相关噬菌体的整合位点及排列方式,对研究福氏痢疾杆菌血清型转换及血清型相关噬菌体的整合机制具有重要意义.     

中国淮阳山地区由新蜱传布尼亚病毒引起的出血热

研究背景 2009-2010年4月至7月,我国淮阳山地区农民中出现不明原因的严重出血热样病例.方法 采集疑似病例的临床标本(血液、尿液、粪便和咽拭子),在患者所在地采集蚊和蜱.从2例患者的血液样本中分离到2株病毒,并进行全基因组测序分析.采用病毒特异的RT-PCR对其他病例及节肢动物进行病毒检测,对RT-PCR阳性病例...     

dapb1基因对诺卡菌系统分类和物种鉴定方法的建立与评价

目的 评价dapb1基因对诺卡菌属系统分类和物种鉴定的能力.方法 从公共数据库中获得230株菌株(198株诺卡菌属菌株和32株非诺卡菌属菌株)基因组序列,从198株诺卡菌(90株模式菌株、31株标准菌株和77株临床菌株)基因组中提取dapb1基因,采用clustalo进行多序列比对,并用iqtree构建系统发育树.计算...     

c-myc反义寡核苷酸对胃癌MKN-45细胞株增殖的影响

目的 观察c—myc反义寡核苷酸对胃癌MKN-45细胞株增殖的抑制作用。方法 用四甲基偶氮唑盐法评价脂质体介导c-myc反义寡核苷酸对细胞增殖的影响，免疫细胞化学ABC方法检测转染后c—myc蛋白表达；荧光显微镜观察细胞凋亡；流式细胞仪分析细胞凋亡。结果 c-myc基因反义寡核苷酸转染MKN-45细胞后，可以显著抑制细胞增殖，其抑制作用具有剂量依赖性；流式细胞仪分析结果显示，转染后能诱导胃癌细胞凋亡，Go／G1期细胞增多；免疫细胞化学显示c—myc蛋白水平明显降低，阳性表达率为64．9％±5.68％。结论 c-myc基因反义寡核苷酸能明显抑制胃癌MKN-45细胞增殖、诱导细胞凋亡和下调c-myc蛋白水平。     

脉冲场凝胶电泳技术对成都市两起细菌性痢疾暴发的分型研究

目的 运用脉冲场凝胶电泳技术(PFGE)和聚合酶链反应(PCR)技术对成都市两起细菌性痢疾暴发分离株进行分析.方法 利用PCR检测志贺菌分离株ipaH基因和ial基因.用PFGE对菌株进行分型,所得结果用BioNumeries V 4.0软件UPGMA方法进行聚类分析.结果 所试54株分离菌ipaH基因均为阳性,48株为ial阳性.以Xba Ⅰ酶切后PFGE分型,崇州可分为4个带型,有26株型别一致,占实验菌株(36株)的72%,为优势菌株.自凉拌白肉中分离的菌株带型与优势菌株相同.大邑县可分为8个带型,有10株型别一致,占实验菌株(18株)的56%.崇州和大邑县的优势菌株带型差异较大.结论 利用PFGE能够有效地鉴别细菌性痢疾的暴发和传播来源.