湖南娄底地区汉族人群内皮素基因rs5370G/T多态性研究

目的了解湖南省娄底地区汉族人群原发性高血压相关的内皮素(ET-1)基因的rs5370G/T单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism,SNP)分布,并与Genbank多种族人群进行比较。方法收集湖南娄底地区84名无血缘关系的汉族人群的静脉血,其中健康个体57名,高血压患者27名,提取DNA,应用PCR/SNP敏感性分子开关对ET-1基因rs5370G/T多态性进行分析,并与Genbank中的多种族人群的分布进行比较分析。结果湖南娄底地区汉族人群中ET-1基因rs5370G/T的G、T的频率分别为51.2%和48.8%,且不同性别间高血压人群与正常人群间均未见显著差异,在高血压人群与正常人群中G的频率分别为0.537,0.518(χ2=0.056,P>0.05)。然而在Genbank中,ET-1基因rs5370G/T的G、T基因频率分别为80.4%和19.6%,与湖南娄底地区人群比较有显著性差异(χ2=22.132,P<0.001)。结论湖南娄底地区汉族人群中ET-1基因rs5370G/T多态性与高血压无相关性,与Genbank中的多种族人群比较分布有明显的差异,这种差异可能是导致高血压在不同种族间的表现有所不同的遗传因素之一。     

小凹蛋白在清道夫受体AI介导的巨噬细胞源性泡沫细胞形成过程中的作用

目的:研究小凹蛋白在清道夫受体AI介导的巨噬细胞源性泡沫细胞形成过程中的作用. 方法:用75 mg/L氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)与巨噬细胞共同孵育不同时间. 清道夫受体AI反义寡核苷酸、P38阻断剂SB202190预处理巨噬细胞,然后给予75 mg/L ox-LDL处理24 h. Western blot法检测清道夫受体AI和小凹蛋白的表达. 高效液相色谱法检测细胞内胆固醇的含量,油红O染色观察细胞内脂滴的形成情况. 结果:经75 mg/L ox-LDL处理巨噬细胞不同时间,ox-LDL呈时间依赖性促进清道夫受体AI的表达,而呈时间依赖性抑制小凹蛋白的表达. 用清道夫受体AI反义寡核苷酸抑制清道夫受体AI的表达,小凹蛋白的表达明显增加. 该组细胞内胆固醇含量为(119±7) mg/g,与ox-LDL处理组比较显著减少(P＜0.01),细胞内脂滴亦明显减少. P38MAPK抑制剂SB202190能明显抑制清道夫受体AI的表达,而增加小凹蛋白的表达. SB202190处理组细胞内胆固醇含量为(173±14) mg/g,与ox-LDL处理组比较显著减少(P＜0.01),细胞内脂滴亦明显减少. 结论:小凹蛋白与清道夫受体AI协同参与了ox-LDL诱导的巨噬细胞泡沫化的形成过程.     

核化线粒体组学与转基因人分析法在人类进化研究中的应用1例

5年前,作者提出转基因人分析法,即以人类染色体DNA与线粒体DNA的重组状况作为研究对象,并将这种研究线粒体DNA与染色体DNA之间相互作用的科学称之为核化线粒体组学.分析当时可利用的尼安特人的线粒体DNA高变区数百个碱基,认为不能排除尼安特人与现代人在基因水平上可能存在亲缘关系.最近,细胞杂志发表了尼安特人的线粒体DNA完全序列,通过利用核化线粒体组学方法 ,使5年前的推论得到了确认,即尼安特人与现代人在基因水平上存在亲缘关系.这一应用实例对分子考古学具有一定的参考价值.     

EGFR突变在非小细胞性肺癌发生和化疗反应性中的作用及其分子机制

表皮生长因子受体(EGFR)是具有酪氨酸激酶活性的跨膜糖蛋白.它们将生长因子信号从细胞外传入细胞内,这一过程控制着细胞的诸多生理功能:如细胞生长、分化、血管生成以及凋亡抑制.在非小细胞性肺癌中,该信号通路和肿瘤的生长及转移关系密切.研究表明抑制EGFR酪氨酸激酶活性,可抑制肿瘤生长.本文综述了近年来EGFR及其抑制剂的研究进展.     

Bcl-XL siRNA对人胃腺癌MGC-803细胞药物敏感性的影响

目的:研究靶向Bcl-XL基因的小干扰RNA对胃腺癌MGC-803细胞Bcl-XL基因表达的作用及对药物敏感性的影响。方法:构建的Bcl-XLsiRNA载体或阴性siRNA并稳定转染到胃癌MGC-803细胞,G418抗生素筛选阳性克隆,克隆扩大培养,免疫荧光观察细胞蛋白表达。用不同浓度的5-FU或DADS处理稳定转染细胞,MTT观察细胞增殖的变化。用一种浓度的5-FU或DADS处理稳定转染细胞,流式细胞术观察亚G1细胞的比例。结果:免疫荧光结果表明,Bcl-XLsiRNA稳定转染组细胞中Bcl-XL蛋白的表达比阴性siRNA稳定转染组细胞Bcl-XL基因的表达均有明显的降低。当不同浓度的5-FU(13、130、1 300、13 000 mg.L-1)或DADS(20、35、50mg.L-1)处理细胞24 h后,MTT结果表明Bcl-XLsiR-NA细胞组A570吸光度值较阴性siRNA细胞组和未转染对照明显降低,细胞生长抑制率明显增高。5-FU或DADS药物的IC50值在Bcl-XLsiRNA细胞组有明显降低。使用5-FU(130 mg.L-1)或DADS(50mg.L-1)处理细胞24 h后,流式结果表明,Bcl-XL-siRNA细胞组较阴性siRNA和正常对照细胞组亚G1细胞比例有明显增高。结论:Bcl-XL siRNA下调了MGC-803细胞Bcl-XL基因的表达;Bcl-XLsiRNA能够促进MGC-803细胞凋亡,增强细胞对化疗药物的敏感性。     

新型降脂药依泽替米贝的研究进展

依泽替米贝是先灵普劳公司与默克公司共同研制开发的一种新型的降脂药,美国FDA于2002年批准上市。它作用于小肠刷状缘的NPC1L1、膜联蛋白2小凹蛋白1、氨肽酶N等蛋白质,起着抑制胆固醇吸收的作用。它的作用机制与他汀类药物互补,后者可以抑制体内胆固醇合成。临床试验表明,依泽替米贝无论是单用还是与他汀类联合应用,都能收到很好的降脂效果,并且降脂的同时能降低低密度脂蛋白胆固醇水平,升高高密度脂蛋白胆固醇水平。另外,依泽替米贝对一些难治性的遗传性高胆固醇血症如家族型纯合子高脂血症有很好的疗效。     

比较全血DNA提取法适用单核苷酸多态性分析

目的 比较两种提取冰冻全血基因组DNA的方法，即分离白细胞法和裂解红细胞法所获得基因组DNA的质量。方法 分别测定所获DNA的效率和纯度，同时，笔者用PCR／SNP敏感性分子开关技术。对两种方法获得的模板DNA进行单核苷酸多态性（single—nucleotide polymorphism，SNP）分析。结果 结果显示分离白细胞法DNA产量与纯度均高，裂解红细胞法获得的DNA产量、纯度相对较低；PCR／SNP敏感性分子开关检测表明：分离白细胞法和裂解红细胞法制备的DNA模板，均可在体外进行有效的PCR扩增。但分离白细胞法获得的目的DNA带特异性凸显，而裂解红细胞法获得的目的带特异性相对较差。结论 预先分离纯化白细胞是从冰冻全血中获得较高纯度DNA和有效提高DNA产量的重要操作步骤。     

加强研究生的人文教育 培养高素质医学人才

研究生教育是为未来医学科研、教学与临床工作培养骨干力量。本文从加强研究生人文教育是新的医学模式的基本要求,注重研究生人文教育的实用性和人文教育应以学生为主体注重研究生创新能力的培养等3个方面谈点粗浅的看法。     

内皮衍生松弛因子和收缩因子：新概念和新发现

血管内皮细胞是松弛因子和收缩因子的来源,这些有待进一步确定的物质称为内皮细胞衍生松弛因子(EDRF)和内皮细胞衍生收缩因子(EDCF)。EDRF是血管松弛反应的重要介质,除了其舒血管作用外,最近发现EDRF尚能抑制血小板聚集,它不仅可调整缩血管药物升高血压的能力,且能调节平滑肌张力水平。由于EDRF的半衰期很短(约6秒),有关调节EDRF的合成、释放和作用的因素所知甚少。EDRF的最后鉴定和结构改造必将产生一些对心力衰竭、高血压、动脉粥样硬化、心绞痛以及外周和脑血管疾病可