导电聚吡咯膜技术应用于大鼠肺细胞原代培养的实验研究

目的 :探讨导电聚吡咯膜技术对大鼠肺Ⅱ型细胞体外生长的作用。方法 :采用四甲基偶氮唑盐比色法测定比较导电聚吡咯膜组和常规培养组大鼠肺Ⅱ型细胞的生长和增殖情况。结果 :培养 3～ 5d后两组OD值有显著差异 (P <0 .0 5 )。结论 :常规培养条件下的大鼠肺Ⅱ型细胞在体外生长时间约 2～ 3d ,导电聚吡咯膜可以将肺Ⅱ型细胞体外生长时间延长至 5d。     

1—甲基—4—苯基吡啶啶离子诱发大鼠小脑颗粒细胞凋亡

目的 建立1－甲基－4－苯基吡啶离子（1－methy1-4-phenyl pyridinium ion,MPP^ )诱导的大鼠小脑颗粒细胞凋亡模型。方法 MPP^ 处理大鼠小脑颗粒细胞,分别用甲基绿－派诺宁染色,DNA凝胶电泳,流式细胞术进行检测。结果 浓度为50μmol/L MPP^ 使小脑颗粒细胞发生凋亡。结论 以MPP^ 为诱导剂建立的大鼠小脑颗粒细胞凋亡模型,可用于研究和帕金森病（PD）有关的细胞凋亡的调控机制和筛选抗PD药物。     

老年男性骨密度与钙调节激素关系的探讨

目的探讨老年男性骨密度与钙调节激素的关系.方法[ HTSS〗用双能X线骨密度仪(DEXA)测定65例老年男性骨密度(BMD).用放免法测定睾酮( T)、甲状旁腺激素(PTH)、降钙素(CT)、骨钙素(BGP).结果 (1) 随年龄增加,骨质疏松及骨量减少患者逐渐增加;(2) T、CT随年龄增加而逐步减少,PTH逐渐增加,而BGP无明显变化;(3) 骨质疏松及骨量减少组T、CT均显著低于正常组(均P ＜0.001),PTH显著高于正常组(P＜0.001,P＜0.01),BGP在骨质疏松组显著高于正常组(P＜0.001),而骨量减少组则与正常组无差异 (P＞0.05).结论增龄、钙调节激素异常是引致老年男性骨质疏松的重要原因之一.     

百蕊草药材与标准汤剂量值传递规律研究及分析

目的 建立百蕊草Thesii Herba标准汤剂的UPLC特征图谱及其指标成分的含量测定方法;研究百蕊草药材与标准汤剂特征图谱的变化,并分析指标成分百蕊草素I在药材-标准汤剂的量值传递规律。方法 采用Waters Acquity UPLC BEH Shield RP18色谱柱（150 mm×2.1 mm,1.7μm）,流动相为乙腈-0.2%甲酸水溶液,梯度洗脱,体积流量0.4 mL/min,检测波长330、270 nm,柱温30℃,建立特征图谱与含量测定方法。以出膏率、含量及转移率、特征图谱共有峰传递数为主要评价指标,分析百蕊草标准汤剂的量值传递规律。结果 19批百蕊草药材、标准汤剂与各自的对照特征图谱相似度分别为0.986～1.000、0.989～1.000。百蕊草标准汤剂特征图谱标定6个共有峰,药材中的5个共有峰全部转移至标准汤剂并被指认,其中4个共有峰采用对照品比对确认,分别为5-O-阿魏酰奎宁酸（峰2）、4-O-阿魏酰奎宁酸（峰3）、百蕊草素I（峰5）、山柰酚-3-O-(2″-O-α-鼠李糖基-6″-O-丙二酰基)-β-葡萄糖苷（峰6）。19批标准汤剂的平均出膏率为27.45%...     

黑柳树皮化学成分及其抑制脂肪生成活性研究

目的 研究黑柳Salix nigra树皮的化学成分,并对部分化合物进行抑制脂肪生成活性研究。方法 采用多种色谱分离技术进行分离和纯化,并运用核磁共振波谱技术鉴定其结构。以秀丽隐杆线虫Caenorhabditis elegans为实验模型,利用油红O和苏丹黑B染色,研究从黑柳树皮中分离到的部分化合物对秀丽隐杆线虫脂肪生成的影响。结果 从黑柳树皮甲醇提取物的正丁醇萃取部位中共分离得到12个化合物,分别鉴定为柳皮苷（1）、特里杨苷（2）、7-水杨酰-2''-苯甲酰水杨苷（3）、cochinchiside A（4）、2''-苯甲酰水杨苷（5）、胡萝卜苷（6）、rosin（7）、水杨苷（8）、chalcononaringenin-2''-O-β-D-glucopyranoside（9）、3,4-二羟基苯甲酸（10）、苯甲酸（11）和水杨酸（12）。其中化合物1、2、5和9能够显著抑制秀丽隐杆线虫脂肪生成。结论 12个化合物均为首次从黑柳中分离得到。化合物5对秀丽隐杆线虫脂肪生成的抑制作用最强。     

基于指纹图谱及非挥发性成分定量结合化学模式识别法评价不同产地艾叶质量

目的 以非挥发性化学成分为指标,评价不同产地艾叶Artemisia argyi质量,为其进一步开发利用提供科学依据。方法 采用高效液相色谱法（high-performance liquid chromatography,HPLC）,以指纹图谱定性,绿原酸和黄酮等多指标成分定量,结合聚类分析（hierarchical cluster analysis,HCA）、主成分分析（principal component analysis,PCA）和正交偏最小二乘法-判别分析（orthogonal partial least squares-discriminant analysis,OPLS-DA）对艾叶进行化学模式识别研究。结果 建立了20批艾叶的指纹图谱,相似度为0.739～0.983,标定了28个共有峰,指认了绿原酸、木犀草苷、圣草酚、棕矢车菊素、异泽兰黄素5个成分,含量测定表明不同产地艾叶绿原酸和黄酮成分存在显著差异;HCA分析20批艾叶为3类;PCA得到7个主成分的累积方差贡献率为86.676%;OPLS-DA分析表明绿原酸、木犀草苷、圣草酚、棕矢车菊素、异泽兰黄素可能是影响艾叶药材质量的差异标志物。结论 指纹图谱定性及多非挥发性成分定量结合化学模式识别可用于艾叶药材鉴别和质量控制。     

三阴性乳腺癌细胞脂肪非典型钙黏蛋白4表达下调的生物学作用及机制

背景与目的 三阴性乳腺癌（TNBC）容易发生侵袭转移,恶性程度极高。笔者团队前期研究发现脂肪非典型钙黏蛋白4（FAT4）在TNBC组织中呈低表达且与预后相关,进而本研究进一步探讨FAT4对TNBC细胞生物学行为的影响,及其相关机制。方法 用qRT-PCR及Western blot检测正常人乳腺上皮细胞系（MCF-10A）及不同TNBC细胞系（BT-549、MDA-MB-231、MDA-MB-468、MDA-MB-436）中FAT4的表达水平。选择其中合适的TNBC细胞系,分别转染FAT4-shRNA（FAT4敲低组）、阴性对照序列（阴性对照组）,以未处理的TNBC细胞为空白对照组,分别采用CCK-8实验、流式细胞术、Transwell小室实验检测细胞增殖能力、凋亡率、侵袭与转移能力的变化,并用Western blot检细胞中Hippo信号通路下游靶点YAP及上皮间质转化（EMT）相关蛋白的变化。结果 与正常人乳腺上皮细胞比较,各TNBC细胞系中FAT4的mRNA与蛋白表达量均不同程度的降低（均P<0.05）。功能实验选用BT-549细胞和MDA-MB-436细胞。无论在BT-549细胞或MDA-MB-436细胞中,与空白对照组比较,FAT4敲低组在转染后24、48、72 h的增殖能力均明显升高、凋亡率明显降低、侵袭与转移能力明显增强（均P<0.05）;YAP蛋白表达量无明显变化（P>0.05）,但磷酸化YAP（p-YAP）表达量明显降低,上皮标志物E-cadherin水平明显降低,而间质标志物N-cadherin水平明显升高（均P<0.05）;阴性对照组与空白对照组间以上指标差异均无统计学意义（均P>0.05）。结论 FAT4表达水平在TNBC细胞中普遍降低,FAT4表达的降低能增强TNBC细胞增殖和侵袭迁移能力、减少TNBC细胞凋亡,其机制可能与FAT4降低后Hippo信号通路下游的YAP蛋白磷酸化减少,从而促进EMT进程有关。     

重庆市家庭医生团队成员职业倦怠现状及其影响因素分析

目的 了解家庭医生团队成员的职业倦怠现状,探讨其职业倦怠的影响因素。方法 采用整群随机抽样法,从重庆市8 171支家庭医生团队中随机地选取593支团队的全部成员作为调查对象;采用自行设计的基本情况问卷和李超平等翻译并修订的MBI - GS量表对其进行调查。结果 重庆市家庭医生团队成员职业倦怠阳性检出率为78.9%,其中职业倦怠中等程度8 290例（61.7%）。主城区团队成员职业倦怠阳性6 387例（47.5%）,阳性检出率80.1%;渝东北地区职业倦怠阳性3 628例（27.0%）,阳性检出率77.5%;渝东南地区职业倦怠阳性588例（4.4%）,阳性检出率75.2%。二元logistic回归分析结果显示, 性别、年龄、月收入、编制、岗位、择业主要原因以及地区是职业倦怠的主要影响因素 (P＜0.05)。结论 重庆市家庭医生团队成员的职业倦怠阳性发生率较高,一半以上成员表现为中程度职业倦怠。与其他两大地区比较,主城区职业倦怠阳性检出率最高。相关管理者应针对主要影响因素进行干预,减轻工作压力和紧张感,以缓解职业倦怠感。     

基于重大疫情防控的医防融合策略研究

目的 基于目前疫情防控新形势下提出医防融合的策略建议。方法 分析在疫情防控形势下医防融合的新内涵和主要障碍,并根据疫情防控的现实情况提出相应建议。结果 医防融合的障碍包括:相关法律法规有待完善、医疗机构与疾控机构缺乏有效协调衔接机制、公共卫生人才队伍建设仍需加强、医院未重视公共卫生职能、基层传染病防控基础较薄弱。结论 可从宏观、中观、微观三个层面来进行医防融合。其中,宏观层面包括完善法律法规体系、增强社会氛围;中观层面包括提高医院公共卫生工作积极性、增强基层医疗机构传染病防控能力、促进医防信息的融合;微观层面则关注人员的融合,即提高公共卫生人员地位与待遇、进行医学教育改革,培养“防治结合”型人才、打通疾控与医疗机构人员互通渠道。