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目的 采用环介导等温扩增反应(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP)技术与实时荧光定量 PCR(real-time fluorescent quantitative PCR,FQ-PCR)技术检测 HBV DNA,并对 LAMP 方法的反应条件进行优化,比较两种方法检测 HBV DNA 的灵敏度及特异性。方法 选取经医院确诊的乙肝患者的血清,提取血清中的 HBV DNA 作为扩增模板,同时,对 LAMP 方法的各种条件进行优化,并分别采用 LAMP 和 FQ-PCR 两种方法对同一 HBV DNA 模板做 10 倍梯度稀释的标本进行 HBV DNA 的检测,比较其灵敏度;且分别用两种方法对乳头瘤病毒(HPV)、EB 病毒、大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌以及正常人血清基因组 DNA 在相同条件下进行实验,观察两种方法在检测中是否出现假阳性结果,以确定两种方法的特异性。结果 对同一 HBV DNA 模板进行 10 倍梯度稀释后,FQ-PCR 技术在待测血清标本(2.38×107copy/ml)被稀释到 10-5,就难以进行准确检测了,而 LAMP 方法在待测血清标本被稀释到 10-7时,仍然能够获得较好的扩增结果;对 HPV、EB 病毒、大肠埃希氏菌、金黄色葡萄球菌、鲍曼不动杆菌、铜绿假单胞菌以及正常人血清基因组 DNA 进行 LAMP 和 FQ-PCR 检测,结果均为阴性。结论 采用 LAMP方法可以成功、快速、高效、特异的扩增 HBV DNA,与 FQ-PCR 方法比较,都能特异地检测 HBV DNA,但 LAMP 方法具有更高的灵敏性,操作更为简单、方便,而且不需要昂贵的仪器,更适合基层检测机构的推广使用。 相似文献
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目的:探讨不同乙型肝炎病毒(HBV)基因型与相关生化指标和HBV‐DNA定量水平的相关性。方法采用DNA芯片技术,对216例HBV感染患者进行HBV基因型分型检测,同时检测血清HBV‐DNA和肝功能指标。结果216例患者中,HBV‐B型138例(占63.89%,138/216),HBV‐C型68例(占31.48%,68/216),HBV‐B+HBV‐C型混合感染8例(占3.70%,8/216),HBV‐D型2例(占0.93%,2/216)。各基因型HBV感染者之间比较,HBV‐DNA水平和肝功能指标差异均无统计学意义(P>0.05)。结论该院患者HBV感染以HBV‐B型为主,HBV‐C型次之。 相似文献
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目的:目前精神分裂症的临床诊断缺乏统一的标准。文中研究精神分裂症患者血清中差异miRNA表达谱,为该病的临床诊断提供依据。方法采用FlashTag TM Biotin RNA芯片技术和SAM软件筛选精神分裂症患者与健康受试者血清中差异表达的miRNA,用实时荧光定量逆转录PCR(RT-PCR)进行验证。结果筛选出3个差异表达的miRNA,其中hsa-miR-1281上调,表达倍数变化为1.50881;hsa-miR-2861、hsa-miR-638下调,表达倍数变化分别为0.64193和0.51624。实时定量PCR结果证实,精神分裂症患者较健康受试者hsa-miR-2861与hsa-miR-638表达下调,分别为[(0.037±0.037) vs (3.159±2.761),χ2=4.089, P<0.05]及[(0.006±0.006) vs (0.689±0.314),χ2=4.083, P<0.05],hsa-miR-1281在精神分裂症患者组呈高表达[(1.221±0.041) vs (0.145±0.036),χ2=5.333,P<0.05)。结论精神分裂症患者血清中存在差异表达的miRNA谱,miR-1281、miR-2861和miR-638可作为诊断精神分裂症的一个新的血清标志物。 相似文献
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目的探讨脑动静脉畸形(AVM)出血与脑AVM大小及引流静脉数目的相关性.方法回顾性分析109例数字减影脑血管畸形造影资料.结果大型脑AVM出血率明显低于小型脑AVM的出血率(P<0.01);1支引流静脉出血者明显多于3支以上引流静脉出血者(P<0.01);引流静脉通畅者其出血率低.结论通过观察脑AVM的大小、引流静脉的数目以及引流静脉的通畅情况,可对脑AVM的出血进行预测. 相似文献
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目的:探讨精神分裂症患者血清非编码小分子RNA(miR)-320a、320b的表达。方法:应用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应技术(RT-PCR)检测30例首次发病的精神分裂症患者(发病组)、30例治疗后临床缓解的精神分裂症者(缓解组)和30名正常对照者(健康对照组)血清miR-320a及miR-320b表达水平。结果:发病组和缓解组血清miR-320a和miR-320b表达明显低于健康对照组(P均0.001),且发病组明显低于临床治愈组(P均0.05)。结论:精神分裂症患者血清miR-320b和miR-320a表达低,并与病情有关。 相似文献
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目的:探讨血清中 microRNA 作为非小细胞性肺癌生物标志物的诊断价值。方法采用定量 RT-PCR 检测训练组中30例非小细胞性肺癌患者血清、30例健康对照者血清中差异表达的 microRNA,采用受试者工作曲线和曲线下面积来筛选作为候选标志物的 microRNA,建立诊断模型,再用15例非小细胞肺癌和15例健康对照者中的候选 miRNA 的表达情况去验证模型(验证组)的诊断效能,计算灵敏度、特异度、阳性预测值、阴性预测值等诊断价值。结果训练组中 miR-141和 miR-143表达与对照组比较差异有统计学意义(P <0.05),在验证组中二者联合的诊断效能分别为:灵敏度为99%(95%CI :0.94~1.0),特异度为85%(95%CI :0.75~0.93),阳性预测值为87%,阴性预测值为99%。结论血清 miR-141和 miR-143是非小细胞性肺癌潜在的诊断标志物。 相似文献
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目的初步探讨唾液miRNA-205检测在喉鳞状细胞癌中的诊断价值。方法收集了于该院就诊的15例喉鳞状细胞癌患者、10例喉息肉患者、10例健康者的唾液标本,使用反转录聚合酶链反应(RT-PCR)定量检测并比较唾液miRNA-205的相对表达情况。结果喉鳞状细胞癌患者的唾液中miRNA-205的表达水平较健康对照者显著上调(P=0.036)。受试者工作特征(ROC)曲线分析miRNA-205对喉鳞状细胞癌的诊断价值发现,唾液中miRNA-205的ROC曲线下面积为0.753 0(95%CI:0.546 0~0.961 0,P=0.036)。结论喉鳞状细胞癌患者唾液中的miRNA-205存在高表达,有望作为早期诊断喉鳞状细胞癌的指标。检测miRNA-205在唾液中的表达,将来有望开启喉鳞状细胞癌早期诊断的无创时代。 相似文献
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[摘要] 目的 探讨HCV核心抗原(HCV-cAg)检测在丙型肝炎感染早期诊断中的应用价值。方法 选择2020年1月至2021年7月西南医科大学附属医院接治的HCV-cAg阳性患者90例和丙型肝炎抗体(HCV-Ab)阳性患者164例作为研究对象,测定其血清谷丙转氨酶(ALT)和丙型肝炎病毒核酸(HCV-RNA)水平。以核酸检测结果为金标准,分析HCV-cAg检测在丙肝感染早期诊断中的有效性。结果 90例HCV-cAg阳性患者中,HCV-RNA阳性76例(84.44%),肝功能异常54例(60.00%)。164例HCV-Ab阳性患者中,HCV-RNA阳性114例(69.51%),肝功能异常75例(45.73%)。HCV-cAg阳性组的HCV-RNA阳性率和肝功能异常率都显著高于HCV-Ab阳性组(P<0.05),并且HCV-cAg的S/CO值与肝功能异常率存在关联性(P<0.05)。结论 HCV-cAg检测结果能反映肝功能状态,可用于丙型肝炎的早期筛查及疗效评估。 相似文献
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