人膀胱癌荷瘤鼠中shRNA沉默△Np63基因对肿瘤的抑制和cdk4的影响

目的:利用RNAi(RNA interference,RNA干扰)技术,通过抑制△Np63基因的表达,研究其对人膀胱癌裸鼠皮下移植模型的抑瘤作用,同时检测△Np63基因被抑制后对cdk4(细胞周期素依赖性激酶4,cyclin-dependent kinase 4)的影响.方法:建立人膀胱癌裸鼠皮下移植模型,构建△Np63基因特异性shRNA(short hairpin,短发卡)表达质粒,将表达质粒转染荷瘤鼠瘤体,观察肿瘤生长情况,HE染色法观察质粒治疗后瘤组织的病理改变,RT-PCR方法检测△Np63基因的表达变化,SP免疫组化检测△Np63和ckd4蛋白表达变化.结果:转染质粒8周后,△N p63-shRNA组、Control-shRNA组与生理盐水组比较,△Np63-shRNA组与生理盐水组瘤体积有显著性差异(p＜0.01),抑瘤率为74.44%,Control-shRNA组与生理盐水组体积无显著性差异(p＞0.05).病理学结果发现:△Np63-shRNA组肿瘤生长受到抑制,细胞核分裂相减少,可见大量肿瘤细胞坏死和凋亡、炎症细胞浸润.RT-PCR结果显示△Np63-shRNA组△Np63基因表达降低,免疫组化结果显示△Np63和ckd4蛋白表达均降低.结论:△Np63特异性shRNA质粒表达载体沉默△Np63基因后,可显著抑制人膀胱癌裸鼠肿瘤的生长,△Np63可能通过抑制ckd4的表达而抑制肿瘤的细胞增殖.     

膀胱肿瘤中端粒酶催化亚基(hTERT)的表达

目的:探讨端粒酶催化亚基(hTERT)基因与膀胱移行细胞癌(TCC)生物学行为的关系。hTERTTCC方法:采用法RT-PCR检测例组织,例癌旁组织和例正常膀胱粘膜组织的表达,分析与临床分期、病理分化程度、浸润程27TCC1616hTERTTCC度、肿瘤复发等生物学行为的关系。结果:组织中表达的阳性率为(),而癌旁组织的阳性率为100'/2737.5%(),正常膀胱粘膜的阳性率为,三者比较在统计学上具有显著性差别(6/160P),但在不同临床分期、病理分级的<0.01组织及浸润、复发和多发肿瘤的表达阳性率差别不具统计学意义(TCChTERTP)。 >0.05结论:本实验结果表明组织中TCC表达阳性率明显高于癌旁组织和正常膀胱粘膜的表达,可以作为特异和灵敏的诊断与鉴别诊断的肿瘤标志hTERThTERTTCC物,但与的不同临床分期、病理分级、肿瘤浸润和复发等生物学行为未见相关性。hTERTTCC     

藏花素对膀胱移行细胞癌T24细胞VEGF-C表达水平的影响

目的:研究藏花素(Crocin)对膀胱移行细胞癌T24细胞血管内皮生长因子C(Vascular endothelial growth factor,VEGF-C)表达水平的影响.方法:采用MTT法测定不同浓度及不同时间藏花素对T24细胞抑制率,选出最佳药物浓度和最佳作用时间.用RT-PCR和基因芯片分别检测最佳作用时间和最佳药物浓度作用前后T24细胞VEGF-C的表达.结果:MTT显示藏花素抑制T24细胞生长具有时间和剂量依从性,3mmol/L藏花素作用48h对T24细胞的抑制率最高.RT-PCR显示藏花素组VEGF-C表达明显减少,基因芯片扫描结果中藏花素组VEGF-C表达也显著下调.结论:藏花素抑制T24细胞增殖,可能与下调VEGF-C的表达,从而减少肿瘤血管的生成有关.     

非小细胞肺癌组织中STAT3的表达及临床意义

目的 检侧非小细胞肺癌组织及癌旁组织中信号转导子与转录活化子3(STAT3)的表达,探讨其表达与非小细胞肺癌各临床病理因素之间的关系。方法 应用SABC免疫组织化学技术检测40例非小细胞肺癌及其癌旁组织中STAT3蛋白的表达。结果 肺癌组织中STAT3蛋白表达明显高于癌旁组织,低分化肺癌组织中STAT3表达水平明显高于高分化肺癌组织,有淋巴细胞转移的肺癌组织中STAT3表达明显高于无淋巴细胞转移肺癌组织。结论 STAT3表达与非小细胞肺癌的组织分化程度及淋巴细胞转移有关,STAT3过度表达可能在肺癌的发生发展中起着重要作用。     

膀胱移性细胞癌尿脱落细胞端粒酶催化亚基检测及临床意义

目的　检测尿脱落细胞端粒酶催化亚基 (hTERT)并探讨其临床意义。方法　用RT PCR法分别对膀胱癌组织、正常膀胱组织以及膀胱移性细胞癌和泌尿系良性疾病患者尿脱落细胞进行hTERT检测。结果　 2 7例膀胱癌组织hTERT表达呈10 0 %阳性 ,正常膀胱粘膜 16例均无阳性表达。 3 2例膀胱移行性细胞癌 (transitionalcellcarcinomaofbladder,TCC)患者尿脱落细胞hTERT表达阳性率为 87 5 % ( 2 8/ 3 2 ) ,非肿瘤组表达阳性率为 13 3 % ( 2 / 15 ) ,与TCC病理分级、分期无相关性。结论　检测脱落细胞hTERT是一种无创伤性的、敏感度高、特异性强的方法 ,是TCC早期诊断的一个有价值的辅助指标。     

ΔNp63基因对TCCB 5637细胞侵袭作用的影响

目的:研究ΔNp63基因对TCCB5637细胞侵袭功能的影响。方法:针对ΔNp63基因的不同靶点设计并化学合成具有阳性转染率的siRNA,用脂质体法转染TCCB 5637细胞,并根据转染的方式将实验分组为:空白对照组、空载体组、阴性质粒组和干扰质粒组;采用实时荧光定量PCR、Western blot检测各组中ΔNp63的mRNA、蛋白的表达;采用激光共聚焦显微镜对转染干扰质粒前后的ΔNp63蛋白进行定位;采用细胞计数法及MTT法来检测ΔNp63基因对TCCB 5637细胞侵袭能力和异质粘附能力的影响。结果:ΔNp63蛋白定位于TCCB 5637细胞的细胞核区域;与空白对照组比较,空载体组和阴性质粒组TCCB5637细胞中ΔNp63的mRNA、蛋白的表达水平无明显变化(P>0.05);平均细胞穿越数和异质粘附性无明显变化(P>0.05);而干扰质粒组TCCB5637细胞中ΔNp63的mRNA、蛋白的表达水平明显降低(P<0.05),平均细胞穿越数明显增加(P<0.05),异质粘附性明显下降(P<0.05)。结论:ΔNp63基因能明显促进TCCB5637细胞的侵袭能力。     

基于主成分分析的天麻矿质元素含量研究

目的:研究不同来源天麻矿质元素含量,分析天麻特征元素及评价药材质量。方法:采用ICP法对不同来源的天麻药材必需的磷(P),钾(K),钙(Ca),镁(Mg),铁(Fe),锌(Zn),硼(B),锰(Mn),铜(Cu)等10种矿质元素含量进行测定,用主成分分析法分析天麻特征元素并对药材质量进行评价。结果:天麻药材中K元素含量最高,平均为15.31 g·kg-1;其次是N元素,平均含量为8.99 g·kg-12元素变异系数小;Mn元素含量的变异系数最大,为51.39%;N,P,K元素间达极显著正相关;主成分分析选择3个主成分对药材质量进行评价,发现天麻药材特征元素为P,B,N,K,Cu,Mn,Fe,Mg等8种元素。结论:天麻K和N元素含量高,且相对稳定;Mn元素含量差异大;其中P,B,N,K,Cu,Mn,Fe,Mg等8种元素是天麻特征元素;从矿质元素角度分析30份天麻资源中贵州、云南天麻药材质量较好。     

肾细胞癌源性exosomes体外诱导单核细胞分化为PD-L1髓源性抑制细胞

目的研究肾细胞癌源性exosomes诱导人外周血单核细胞分化为髓源性抑制细胞及该细胞PD-L1分子表达情况的效应。方法超滤和蔗糖重水密度梯度离心相结合的方法分离纯化肾细胞癌源性exosomes。Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞,贴壁法获取外周血单核细胞。倒置显微镜观察获得的单核细胞形态。流式细胞仪检测单核细胞比例及活性、经exosomes诱导的单核细胞活性情况、髓源性抑制细胞(MDSCs)及其上PD-L1分子的表达情况。结果贴壁的单核细胞形状为圆形或类圆形具少许短小伪足状突起;贴壁法获得的单核细胞比例达83.5%,活细胞比例约90.0%;髓源性抑制细胞的生成较对照组明显增加[(8.91±0.21)%vs(3.19±0.91)%,P<0.05],且该髓源性抑制细胞表达PD-L1较对照组明显增高[(88.93±8.57)%vs(44.53±5.35)%,P<0.05];体外经exosomes诱导刺激的单核细胞损伤率较对照组明显升高[(39.93±16.51)%vs(12.87±2.43)%,P<0.05]。结论肾细胞癌源性exosomes在体外能够促进单核细胞损伤,诱导单核细胞分化为髓源性抑制细胞,且该髓源性抑制细胞表达PD-L1增高,可能是其抑制T细胞免疫功能的负性调节机制之一。     

干化学法尿隐血检测的可靠性分析

目的探讨干化学法尿隐血检测的可靠性。方法收集843例泌尿外科住院患者及403名体检人员的尿液标本。分析干化学法尿隐血检测与显微镜检测尿沉渣红细胞(镜检)结果的相符性。结果 843份泌尿外科尿标本中,482份干化学法尿隐血检测阳性,431份(51.1%)镜检阳性;干化学法尿隐血检测阴性与镜检阴性的相符率为98.9%。在843例泌尿外科住院患者和403名体检人员的尿液标本中,干化学法尿隐血检测结果为±、+时,两种方法检测结果相符率远低于干化学法尿隐血检测结果为阴性、++、+++时两种方法检测结果相符率(P<0.05)。两种方法检测279例泌尿系统结石患者阳性相符率最低。结论干化学法尿隐血检测可靠性欠佳,当检测结果异常时,应结合镜检报告结果进行综合判断。     

不同肥力搭配对太子参抗氧化酶活性及叶绿素含量影响初探

本文通过多因素盆栽试验,对不同肥力搭配下太子参抗氧化酶活性与叶绿素含量及其二者的相关性进行研究,分析施肥对太子参生长的影响,探索适宜太子参生长的施肥水平和组合。结果表明:每盆施用尿素3g,过磷酸钙7.5g,硫酸钾1g时,太子参抗氧化酶活性最低,叶绿素含量最高。此外,在不同施钾水平下,叶绿素与CAT和SOD活性都达到极显著相关,其他处理中的叶绿素与抗氧化酶活性没有达到显著相关。