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61.
小鼠肌肉内绿色荧光蛋白基因电转染 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:将细胞电通透技术应用到DNA肌肉转染并确定达到高效电转染的参数条件。
方法:以增强绿色荧光蛋白(EGFP)基因质粒作为报告基因,进行小鼠体内肌肉组织电转染实验,在部分参数固定情况下,某一参数发生变化,通过荧光显微镜观察、公式计算得出转染率,进行比较。确定转染的最佳电场强度、脉冲时值和质粒剂量。
结果:EGFP质粒15 μg注射到小鼠的胫前肌,在注入后给予如下参数,即电脉冲200 V•cm-1,20 ms,1 Hz,8次,转染率最高,可达(73.2±7.2)%。EGFP质粒注射后不会在细胞外立即降解,注射质粒DNA 1 h内给予电脉冲不影响转染率;15 μg为最适当的DNA剂量;EGFP蛋白的表达,7 d达到高峰。结论:与单纯EGFP质粒肌肉注射相比,DNA肌肉电转染可极大地提高其转染率。 相似文献
62.
目的:探讨腹股沟外环下显微精索静脉结扎术的临床疗效。方法:回顾分析2013年5月至2016年5月采用腹股沟外环下显微精索静脉结扎术治疗528例精索静脉曲张患者的临床资料,单纯左侧曲张410例,双侧曲张118例;阴囊坠胀不适、隐痛患者333例,不育患者195例,术后3、6个月随访并发症发生情况及精液指标改善等情况。结果:住院期间单纯左侧患者的平均手术时间(48.1±5.1)min、双侧患者平均手术时间(88.2±4.8)min、术中出血量(4.7±1.3)mL、平均住院时间(7.9±0.58)d;获得有效随访6个月~2年的患者488例,失访40例,术前睾丸坠胀、隐痛等随访的307例患者,术后症状消失者218例(71.2%),减轻75例(24.4%),无改善14例(4.6%),术后阴囊水肿10例、附睾炎发生3例、复发5例,无睾丸鞘膜积液、睾丸萎缩等情况发生。随访181例婚后不育患者随访12个月,配偶受孕59例(32.6%);随访不育及少弱精455例患者中,36例患者无改善,419例患者术前精子浓度、向前运动精子百分比、活动精子、正常形态精子、精子畸形指数为(9.24±1.38)×10~6/mL、(10.23±1.19)%、(38.27±14.23)%、(8.19±4.53)%、(2.67±1.79);术后3个月及6个月分别为(16.59±7.07)×10~6/mL、(20.27±8.31)%、(47.56±19.11)%、(10.87±6.22)%、(2.08±1.22);(39.49±13.57)×10~6/mL、(31.25±10.28)%、(69.24±9.34)%、(17.23±9.78)%、(1.85±0.73),均较术前显著改善(P0.05)。结论:经腹股沟显微精索静脉结扎术可有效改善精索静脉曲张的临床症状,减少术后并发症的发生,有效提高精子浓度、向前运动精子百分比、活动精子、正常形态精子,并降低精子畸形指数。 相似文献
63.
64.
目的 建立人甲状腺未分化癌裸鼠自发转移模型。观察移植后肿瘤生长情况和转移规律。方法 用微量注射器于裸小鼠甲状腺侧叶内(甲状腺原位移植组)和皮下(皮下对照组)注入等体积不同浓度的人甲状腺未分化癌细胞系TA-K细胞悬液,观察动物体重,一般状态,颈部情况及记录生存时间,并动态观察肿瘤局部生长和转移情况;取甲状腺,气管,食管,颈部及纵膈淋巴结,肺和骨组织行病理组织学检查,并取移植瘤组织常规进行染色体分析,结果 甲状腺原位移植组于注射人甲状腺未分化癌细胞系TA-K细胞悬液后24-34d裸鼠先后出现呼吸困难,实验侧甲状腺肿物呈膨胀性生长,侵及颈前肌及周围组织,压迫气管造成呼吸困难,病理组织学检查证实原位移植成瘤率为100%,颈部淋巴结转移率为5/10,肺转移发生率为3/10,骨转移发生率为1/10。移植瘤组织染色体分析证实为人类肿瘤。皮下移植组见移植瘤有完整包膜,未见侵犯局部肌层,也无局部和淋巴结转移。结论 利用裸鼠甲状腺原位TA-K细胞微量注射法,可以成功建立人甲状腺未分化癌裸鼠原位移植模型。该模型是较为理想的用于研究甲状腺癌转移的动物模型。 相似文献
65.
目的 以人甲状腺未分化癌细胞系TA K建立的人甲状腺未分化癌裸鼠皮下移植模型为对象 ,研究裸鼠肌肉内电转染对移植瘤的作用。方法 将皮下移植肿瘤的裸鼠分为 5组 :空白对照组、pcDNA 3质粒肌肉电转染组、TIMP 3质粒肌肉注射组、TIMP 3质粒肌肉电转染组及TIMP 3质粒肿瘤电转染组。肌肉电转染采用的参数是电场强度为 2 0 0V/cm ,脉冲时值为 2 0ms ,8次 ,1Hz;肿瘤内电转染采用的参数是电场强度为 6 0 0V/cm ,脉冲时值为 2 0ms,1次 ,1Hz。结果 TIMP 3质粒肌肉内电转染组和TIMP 3质粒肿瘤内电转染组肿瘤生长受到抑制 ,与另外 3组相比肿瘤生长速度明显减缓 (P<0 .0 5 ) ,且两组肿瘤组织中TIMP 3蛋白量过度表达。结论 抑癌基因可通过肌肉内DNA电转染起到抗肿瘤效果。 相似文献
66.
目的总结47,XYY综合征患者的临床资料、辅助生殖结局及其子代遗传情况。方法回顾性分析从9 725个辅助生殖周期中筛查出的15例47,XYY综合征患者的一般临床特征、精液参数、妊娠结局、子代情况、子代核型及配偶情况。结果 15例患者中有4例无精子症(除1例配偶有甲亢病史外,其余3例配偶妇检无异常),其中2例睾丸穿刺未见精子,其他2例附睾穿刺可见精子,行ICSI处理;1例隐匿性精子症,1例不射精症,1例极重度少弱精子症,1例畸形精子症(配偶输卵管梗阻),1例轻度少弱精子症(配偶输卵管积水),2例轻度弱精子症(1例配偶多囊卵巢综合征,另1例配偶妇检无异常),治疗后行ICSI处理。4例精液正常的患者中1例考虑性取向有问题(配偶妇检无异常)行宫腔内人工授精(IUI)处理,其余3例(2例配偶有输卵管梗阻和卵巢功能不全,1例配偶妇检无异常)行IVF-ET和ICSI处理。15对夫妇共分娩7例活婴,4男3女,除1例失访外,其余核型均正常。结论 47,XYY综合征患者在接受辅助生殖助孕治疗时,其后代出现染色体异常的风险极低,可能是因为精子在受精或者胚胎形成之前会选择性地去除额外的Y染色体。 相似文献
67.
目的提高血儿茶酚胺检测在肾上腺嗜铬细胞瘤定性检测中的有效性。方法对27例经手术治疗的肾上腺肿瘤(其中嗜铬细胞瘤9例)患者的临床资料进行回顾性分析,所有患者均进行了血儿茶酚胺的检测,根据2003年度结果调整血儿茶酚胺检测的时机,再进行2004年1季度的血儿茶酚胺的检测。结果2003年度血儿茶酚胺检测敏感性为40%,特异性为40%;2004年1季度血儿茶酚胺检测的敏感性为100%,特异性为100%。结论严格控制的血儿茶酚胺检测有助于提高肾上腺嗜铬细胞瘤定性检测中的敏感性和特异性。 相似文献
68.
传染性单核细胞增多症是由EB病毒引起的淋巴细胞增生性传染病,临床上以发热、咽喉痛、淋巴结肿大、肝脾肿大和血中淋巴细胞增多,并出现异形淋巴细胞等为特征,患者血清 相似文献
69.
目的探讨经尿道诊断性膀胱肿瘤电切在膀胱癌准确分期的临床应用价值。方法回顾性分析我院在1995年3月至2005年3月期间收治的行经尿道膀胱肿瘤电切术(经典术式)的199例膀胱癌患者,与在2006年5月-2009年1月期间收治的行经尿道诊断性膀胱肿瘤电切术的82例膀胱癌患者临床随访资料。结果①在行经尿道膀胱肿瘤电切术的膀胱癌患者中,术后两内年膀胱癌原位复发6例,术后5年、7年膀胱内无肿瘤复发,而出现盆腔淋巴结转移及全身骨转移2例。②在行经尿道诊断性膀胱肿瘤电切的膀胱癌患者中,有8例证实肿瘤基底部肌层可见癌组织浸润,根据患者个人一般状况,采取膀胱全切或其他治疗方案。结论经尿道诊断性膀胱肿瘤电切术能够准确的对膀胱肿瘤进行分期,对指导膀胱癌治疗提供准确的依据。 相似文献
70.