重组骨形态发生蛋白—7基因转染软骨细胞的实验研究

目的：研究外源性人重组骨形态发生蛋白-7(rhBMP-7)基因在转染的软骨细胞中的表达情况。方法：用脂质体介导法将rhBMP-7转入兔关节软骨细胞,分别用免疫组化染色和逆转录－聚合酶链式反应（RT－PCR）检测其表达,同时用四甲基偶氮唑蓝微量酶反应比色法（MTT法）检测了表达产物的活性。结果：48h后转染的软骨细胞有明显的pcDNA3-rhBMP7基因表达,转染细胞的表达产物对正常软骨细胞的增殖有显著的促进作用。结论：外源性rhBMP-7基因可在软骨细胞中获得高效表达,这为关节疾病的基因治疗提供了理论基础。     

关节镜下髓心减压术联合富血小板血浆治疗距骨骨髓水肿

目的:探讨关节镜下髓心减压术联合富血小板血浆（PRP）治疗距骨骨髓水肿的疗效。方法:采用回顾性病例系列研究分析2018年1月至2020年7月华中科技大学同济医学院附属协和医院收治的17例距骨骨髓水肿患者的临床资料,其中男11例,女6例;年龄15~56岁［（45.7±4.3）岁］。均采用关节镜下髓心减压术联合PRP治疗。...     

新冠肺炎踝开放性骨折手术治疗1例报告

2019年12月以来,武汉地区集中爆发新型冠状病毒肺炎(COVID-19),其传播性强,目前尚无特效的治疗方案[1,2].疫情爆发期间,华中科技大学同济医学院附属协和医院仍承担急诊接收任务,"专家共识"建议将本地区所有创伤患者均视为潜在疑似患者.本院对急诊创伤的评估以及手术治疗均在全面防护措施下进行[3,4].2020...     

副舟骨切除加胫后肌腱转位术在合并扁平足的副舟骨疼痛综合征中的临床应用

目的 探讨副舟骨切除加胫后肌腱转位术在治疗合并扁平足的副舟骨疼痛综合征中的临床疗效.方法 对21例经半年以上保守治疗无效的合并扁平足的副舟骨疼痛综合征患者行副舟骨切除加胫后肌腱转位术.结果 术后随访19例,时间6～30个月.患者疼痛症状明显好转,足部外观改善.应用Maryland足部评分标准,由术前平均(57.6±6.8)分提高至术后平均(84.2±5.1)分,差异有统计学意义(P<0.05).结论 副舟骨切除加胫后肌腱转位术治疗合并扁平足的副舟骨疼痛综合征近期疗效明显.     

粒细胞集落刺激因子和干细胞因子对骨髓单个核细胞的动员效率及其机制

目的 联合应用粒细胞集落刺激因子(G-CSF)和干细胞因子(SCF)动员骨髓单个核细胞,评价其动员效果,探讨CXCL12/CXCR4信号通路在骨髓单个核细胞动员中的作用及机制.方法 将昆明小鼠随机分为两组,治疗组皮下注射重组鼠G-CSF 100μg/(kg·d)和重组鼠SCF25μg/(kg·d),连续使用5d;对照组皮下注射等剂量的生理盐水.每组于不同时间点取小鼠骨髓,分离培养骨髓单个核细胞,计数成纤维样细胞集落形成单位(CFU-F)的个数;应用流式细胞仪分选CD34+ CXCR4+单个核细胞(MNCs);应用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定骨髓细胞外液CXCL12a的水平;采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测骨髓CXCL12 mRNA表达变化.结果 应用G-CSF/SCF后,骨髓及外周血中单个核细胞计数较对照组明显增加(P<0.01),CFU-F形成能力显著增强(P<0.05);流式分选表明CD34+ CXCR4+细胞占骨髓CD34+单个核细胞总数的(44.6±8.7)%;RT-PCR和EUSA检测示骨髓CXCL12 mRNA表达下降,骨髓细胞外液CXCL12蛋白也显著下降,两者变化一致.结论 G-CSF/SCF可有效地诱导骨髓单个核细胞动员,其机制可能是通过破坏骨髓CXCL12/CXCR4信号通路平衡,下调CXCL12/CXCR4间相互作用,以促进骨髓单个核细胞动员.     

Effect of RGD-modified silk material on the adhesion and proliferation of bone marrow-derived mesenchymal stem cells

In order to investigate the effect ofArg-Gly-Asp （RGD） peptide-modified silk biomaterial on the adhesion and proliferation of bone marrow-derived mesenchymal stem cells （MSCs）, MSCs of third generation were seeded onto the surface of RGD-decorated silk （silk-RGD group）, silk alone （silk group） or tissue culture plate （TCP group）. After incubation for 4 or 12 h, MSCs were examined quantitatively by using precipitation method for cell attachment. The cell proliferation, which was defined as cell density, was compared among the three groups after culture for 1, 2, 3, and 4 days. Cell skeleton, which was labeled fluorescently, was observed under laser confocal microscope after 24 h of culture. The results showed that cell adhesion rate in silk-RGD group was higher than in silk group （P〈0.05）, but similar to that in TCP group after incubation for 4 or 12 h （P〉0.05）. There were no sig- nificant differences in the cell proliferation among the three groups at different time points （P〉0.05 for all）. Laser confocal microscopy revealed that in silk-RGD group, MSCs, strongly fluorescently stained, spread fully, with stress fibers clearly seen, while in silk group, actin filaments were sparsely aligned and less stress fibers were found. It was concluded that RGD peptide could improve the ad- hesion of MSCs to the silk scaffold, but had no impact on the proliferation of the cells.     

人工肱骨头置换治疗肱骨近端骨折18例

目的探讨人工肱骨头置换术治疗肱骨近端骨折的手术疗效。方法对18例肱骨近端骨折行人工肱骨头置换,三部分骨折2例,肱骨头劈裂性骨折1例,四部分骨折11例,四部分骨折伴肩关节脱位4例。全部采用骨水泥型假体。结果手术时间60~90min,平均75min,出血量300~400ml,平均350ml。18例随访6~24个月,平均14个月,疼痛明显解除,按半关节成形改良评分系统SSMH综合评分,优6例,良8例,可4例,优良率78%(14/18)。肩关节活动度平均前屈上举99°(62°~164°),外旋40°(24°~50°),内旋至L2水平。1例大结节上移,1例异位骨化,1例假体松动。结论人工肱骨头置换术是治疗肱骨近端骨折有效的办法,能获得满意的关节活动度,并发症发生率低。     

大鼠转化生长因子β1基因转染成骨细胞后的表达

目的 将大鼠转化生长因子β1(TGF—β1)基因转染成骨细胞后，研究转基因细胞表达TGF—β1的情况。方法 通过Lipofectamine介导将TGF—β1基因导人大鼠成骨细胞，转染24h后通过SABC法和原位杂交法检测目的基因瞬时表达的情况。采用G418筛选转染细胞2周，获得阳性细胞克隆，用SABC法检测转染细胞稳定表达TGF—β1的情况。结果 转染24h后，成骨细胞就有明显的TGF—β1蛋白和mRNA高表达。G418筛选2周后的转染细胞仍然有较高的TGF—β1表达。结论 TGF—β1基因转染成骨细胞后可获得稳定的高表达，采用细胞因子基因转染成骨细胞进行骨缺损的基因治疗具有可行性。     

转染重组人骨形态发生蛋白-7基因对骨髓基质细胞生物学行为的影响

目的 观察重组人骨形态发生蛋白-7(rhBMP-7)基因转染骨髓基质细胞(BMSCs)后的稳定表达及表达产物对BMSCs生物学行为的影响。方法利用脂质体介导法将rhBMP．7基因转染BMSCs，以G418筛选出阳性克隆并扩大培养，用免疫组织化学链霉抗生物素蛋白-生物素-过氧化物酶复合物(SABC)法检测转基因细胞的稳定表达；转染48h后，用转基因细胞的培养液上清刺激正常培养的BMSCs，利用^3H标记的胞腺嘧啶氧核苷(^3H-TdR)掺入法、Na2^35SO4掺入法以及氯胺T法检测基因表达产物对BMSCs增殖、合成蛋白多糖以及胶原的影响。结果 转基因细胞4周时仍能表达外源性基因；基因表达产物能明显促进BMSCs的增殖以及蛋白多糖和胶原的合成。结论 rhBMP-7基因转染BMSCs后可获得稳定表达，且基因表达产物能促进BMSCs增殖。诱导其向软骨细胞分化并增强其生物学活性。