rTFF3、rIgGFcBp和rMuc2在大鼠肠道黏液层中的分布

目的 探索3种杯状细胞来源分子rTFF3、rMuc2和rIgGFcBp在结肠黏液层中的分布特点.方法 雄性SD大鼠5只,采用Camoy固定液固定结肠黏膜,AB-PAS染色验证不同黏液层的组织结构.通过轻吸、轻刮分别收集疏松层、致密层黏液和底层黏膜标本,加入不含DTT的2×SDS-PAGE上样缓冲液沸水浴提取全部蛋白.冷却至室温后,统一可溶性蛋白提取液体积,将不同黏液层等份样品进行还原或非还原SDS-PAGE,并对rFF3、rMuc2和rIgGFcBp进行蛋白质印迹分析.结果 两层肠道黏液均含rTFF3的250kD复合物和6kD单体,以疏松层明显;在疏松层和敛密层黏液中未检测到55kD复合物.rIgGFcBp连续分布于黏液层,在非还原情况下,其分子量为214kD以上;在还原情况下,其分子量分别为258kD、214kD和140kD.rMuc2的分布模式与rIgGFcBp相似,以214kD以上的多聚体分布于黏液层,还原后转变为278kD和164kD的亚单位.结论 rTFF3以单体和复合物的形式分布于疏松层和致密层黏液,其复合物可能与黏液的结构和功能相关;rIgGFcBp、rMuc2均以复合物形式分布于黏膜全层,推测两者均为黏液的结构性成分.     

缝隙连接蛋白基因43在胃癌腹膜转移中的作用

目的 探讨缝隙连接蛋白基因43(Cx43)与胃癌临床病理特征的关系及在胃癌腹膜转移中的作用.方法 采用免疫组织化学染色法检测2000年1月至2008年12月第三军医大学西南医院收治的32例诊断为胃癌合并腹膜转移患者的胃癌、癌旁及腹膜转移组织中Cx43的表达,并分析其与临床病理因素的关系.采用Spearman等级相关分析,Fisher确切概率法、X~2检验对结果进行分析.结果 Cx43主要定位于细胞膜和细胞质,Cx43在胃癌组织中的阳性表达率为34%(11/32),在癌旁组织中为100%(32/32),在腹膜转移组织中为94%(30/32),胃癌组织与癌旁组织Cx43的阳性表达率比较,差异有统计学意义(X2=28.350,P<0.01),胃癌组织与腹膜转移组织Cx43的阳性表达率比较,差异有统计学意义(X~2=21.989,P<0.01);胃癌组织Cx43表达与患者性别、年龄无关(r=-0.030,-0.169,P>0.05),与肿瘤分化程度、组织学分型和淋巴结转移有关(r=0.750,0.642,-0.357,P<0.05).结论 胃癌组织中Cx43表达下调,腹膜转移组织中Cx43表达明显上调,可能是Cx43在胃癌腹膜转移中发挥正性促进作用.     

KAI1基因对MHCC97-H肝癌细胞生物力学的影响

目的 探讨KAI1基因对MHCC97-H肝癌细胞生物力学的影响.方法 采用微管吸吮技术研究我们前已转染人类KAI1全长正、反义结构基因的人肝癌MHCC97-H细胞粘弹性以及对FN的粘附力等生物力学参数.结果 MHCC97-H肝癌细胞的粘弹性系数K1、K2、μ在转染KAI1正义基因后明显增加(P<0.05),在转染KAI1反义基因后明显降低(P<0.01),而转染空载体后则无明显变化(P>0.1).在FN裱衬表面,各组肝癌细胞的粘附力分别为MHCC97-H-S组685.4±113.6,MHCC97-H-AS组1 124.6±123.5,MHCC97-H-pCI组849.0±126.3及MHCC97-H亲本细胞组824.7±134.1(单位为10-10 N,细胞数为25).与亲本细胞组比较,MHCC97-H细胞对FN的粘附力在转染KAI1正义基因后显著下降(P<0.01),转染KAI1反义基因后显著增加(P<0.01),而转染空载体后无明显变化(P>0.1).结论 从细胞生物力学角度,KAI1基因可能增加肝癌细胞的粘弹性及降低细胞对细胞外基质FN的粘附力,从而抑制转移的初始步骤,进而抑制MHCC97-H肝癌细胞的侵袭和转移.     

粘蛋白研究进展

粘蛋白是分布于人体各种管腔内表面的高分子量糖蛋白,对上皮细胞起重要的保护和润滑作用.近年还发现粘蛋白参与上皮细胞的分化、更新,调节细胞粘附、参与细胞信号转导等,因此,粘蛋白在各种生理、病理过程中均发挥重要作用.本文主要针对粘蛋白结构特点、功能、在肿瘤中的作用最新研究进展做一简要综述.     

广州市褐家鼠对杀鼠灵的敏感性和抗药性

广州市褐家鼠对杀鼠灵的敏感性和抗药性广州军区军事医学研究所（广州，５１０５００）刘金华，周培盛，黄佳亮，彭志红广州市已使用敌鼠钠盐灭鼠５年。为检验鼠类对抗凝血灭鼠剂耐受力的变化情况，我们于１９９１年５～８月在天河区捕捉褐家鼠，用０．００５％浓度杀鼠灵...     

584张处方书写缺陷分析及对策

处方是重要的医疗文书,它反映了临床医师的诊疗水平和医疗行为,具有法律稽凭作用.处方质量是提高医疗工作质量的一个重要方面,反映了医院的医疗质量和管理水平[1].因此,处方质量的好坏直接反映了医院医疗水平高低,也反映了医院质量管理水平的力度.所以规范处方书写标准,减少处方书写缺陷,提高医师的法律意识,对加强处方书写具有重要的意义.本文对我院2004年8月至2005年8月的门诊处方质量抽查中存在的问题及对策分析如下.     

SEA组件174-201位氨基酸对大鼠黏蛋白rMuc3羧基端酶切的影响

目的 探讨大鼠黏蛋白3(rMuc3)羧基端SEA组件内174-201位氨基酸对LSKGSIVV基序酶切的影响.方法采用Clustal X 1.83软件对包含SEA组件的蛋白质进行比对,选择SEA组件后续79个氨基酸中保守的氨基酸残基,利用定点突变技术将这些保守残基突变为终止密码子,分别命名为p20t1、p20t2、p20t3、p20t4,并测序验证.将不同长度的突变体转染COS-7细胞,用N端V5标签抗体行Western blotting,检测各突变体的酶切情况.结果 rMuc3羧基端第174位丝氨酸(S)、第201位半胱氨酸(C)、第212位酪氨酸(Y)、第223位酪氨酸(Y)在多种含SEA组件的蛋白质中非常保守.Western blotting检测结果表明,含rMuc3羧基端的p20及突变体p20t2、p20t3、p20t4的表达产物在LSKGSIVV基序处均能发生酶切,均可检测到30kD的酶切后片段,但p20tl的表达产物在LSKGSIVV位点处不能发生蛋白酶切.结论 rMuc3羧基端第174位S至第201位C残基对LSKGSIVV基序酶切的发生至关重要,是SEA组件在LSKGSIVV基序发生蛋白酶切的另一必要条件.     

基于NANO-LC-MS/MS和生物信息学的抗特发性肺纤维化靶点的筛选与验证

目的 利用生物信息技术检索特发性肺纤维化(idiopathic pulmonary fibrosis, IPF)基因芯片数据,并结合体外实验,筛选与验证IPF相关的蛋白,为该疾病的药物开发提供潜在的作用靶点。方法 采用基因表据库(Gene Expression Omnibus,GEO) 检索“IPF”词条,下载GSE150910芯片数据,利用Bioconductor 软件包 DESeq2分析正常组和IPF组差异表达基因,对所获得差异基因进行基因本体论(gene ontology,GO)功能分析、日本京都基因与基因组百科全书(kyoto gene and genome encyclopedia,KEGG)通路分析、蛋白互作网络分析并作可视化处理。通过液质联用对差异基因对应的蛋白质进行定量;体外研究关键蛋白对α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)分泌或形成的影响。结果 共筛选到69个与细胞外基质形成相关的差异表达基因,包括53个上调基因和16个下调基因;功能分析显示,差异基因主要涉及到细胞外基质的降解(degradation of the extracellular matrix)、胶原蛋白降解(collagen degradation)和胶原链三聚化(collagen chain trimerization)通路;蛋白互作网络分析和蛋白定量研究显示,与IPF相关的基因主要为金属蛋白酶(MMP-3, 9, ADAMTS14)和P4HA3等;金属蛋白酶抑制剂和P4HA3抑制剂能抑制肺纤维α-SMA分泌。结论 通过筛选差异表达基因, 明确相关基因和蛋白在IPF发生或发展过程中作用,为IPF新药研发提供新思路和方案。     

尿道内润滑法在前列腺增生患者导尿中的应用

<正>前列腺增生是临床上老年男性常见疾病,患者在劳累、受凉、刺激性饮食后容易引起急性尿潴留,留置导尿是解决此症状的首选方法。而由于患者前列腺腺体肥大,尿道受挤压变窄,以往传统导尿法往往失败,增加插管次数甚至改行膀胱造瘘术,不