一氧化氮合酶抑制剂对退行性变腰椎间盘基质代谢的影响

目的:探讨一氧化氮合酶(nitricoxidesynthase,NOS)抑制剂S-甲基异硫脲(S-methylisothiourea,SMT)对退行性变腰椎间盘基质代谢的影响,为NOS抑制剂的临床应用提供理论依据。方法:实验于2003-03/2004-01在卫生部小儿先天畸形重点实验室完成。无菌条件下,取20例腰椎间盘突出症患者的椎间盘组织(髓核和纤维环),置入体外培养系统,随机分为对照组:不加药物干预;SMT组:加入1mmol/LSMT干预。培养72h后,通过检测硝酸盐和亚硝酸盐的含量来观察椎间盘组织一氧化氮的释放量及NOS的活性;原位杂交法检测椎间盘组织诱导型一氧化氮合酶(induciblenitricoxidesynthase,iNOS)mRNA和基质金属蛋白酶(matrixmetalloprotease,MMP3)mRNA的表达。培养10d后,化学比色法观察椎间盘蛋白多糖含量和羟脯氨酸释放量的变化。结果:SMT组髓核和纤维环一氧化氮释放量较对照组明显减少,NOS活性明显降低(P<0.01)。培养10d后,SMT组髓核组织中蛋白多糖含量比对照组明显增加(t=8.52,P<0.01),羟脯氨酸释放量比对照组显著减少(t=6.58,P<0.01);同时,未检测到iNOSmRNA和MMP3mRNA的表达。结论:NOS抑制剂SMT能抑制过量一氧化氮的释放,对延缓椎间盘退行性变具有积极的作用。     

Notch通路在骨疾病领域的研究进展

Notch通路是一条在物种进化过程中高度保守的信号通路,在人体内多个系统中均有表达。Notch通路对骨骼系统产生重要影响,该通路在骨质疏松、骨性关节炎及骨肿瘤等疾病中均有表达,Notch信号通路可为治疗相关疾病提供新的靶点。     

小脑顶核电刺激治疗脑发育落后

目的 探讨小脑顶核仿生物电刺激改善脑循环，治疗脑发育落后的疗效及可行性。方法 将2002-03/2003-02收治的98例脑发育落后患儿分为治疗组与对照组，治疗组50例，在常规药物治疗的基础上，应用仿生物电刺激小脑顶核14d；对照组48例，采用常规药物治疗14d后进行疗效评分。结果 治疗组有效率94%（47/50），对照组有效率65%，两组相比较，x^2=7.69,P&;lt;0.01，差异有显著性意义。其中以运动发育落后为主的脑性瘫痪患儿，治疗组的有效率为95%（36/38），明显高于对照组为65%（24/37）。结论 电刺激小脑顶核治疗脑发育落后操作简单、疗效显著，是非药物治疗的一种好方法。     

乳腺肿块声像图的特征分析与病理对照

目的：探讨87例乳腺肿块声像图的特征分析与病理对照的价值。方法：回顾性分析了87例乳腺肿块声像图特征，全部病例经手术后病理证实。结果：乳腺良性肿瘤符合率为90．6％，乳腺癌符合率为80％、乳腺囊性增生病符合率为76％。结论：乳腺肿块声像图复杂多样，尤其是乳腺囊性增生病，本组87例乳腺肿块，其中乳腺癌前期病变2例均发生在乳腺囊性增生病的病理基础上并发癌变。乳腺良、恶性肿块根据它的内部回声、形态特点及彩色多普勒血流情况易于鉴别。     

全髋关节置换术后迟发性感染的诊断和手术治疗

全髋关节置换术（THA）目前已趋于成熟,给许多患者解除了痛苦,术后迟发性感染的发生率约为1％。然而术后迟发性感染目前尚缺乏严格诊断标准,早期诊断率很低,而且术后迟发性感染一旦发生后果将相当严重,将给患者造成极大精神痛苦和经济损失,也给医生带来很大的压力,治疗起来非常困难。     

脂肪间充质干细胞复合壳聚糖-胶原-硫酸软骨素多孔支架体外成软骨能力的实验研究

目的 制备壳聚糖-胶原-硫酸软骨素三维支架,并与大鼠脂肪间充质干细胞复合培养,探讨其作为软骨组织工程支架的可行性.方法 冷冻干燥法制备壳聚糖-胶原-硫酸软骨素复合多孔海绵支架材料,采用体积法和称重法测定支架的孔隙率和吸水性,扫描电镜观察支架材料的形态结构.分离培养大鼠脂肪间充质干细胞,流式细胞学检测大鼠脂肪间充质干细胞的表面标志CD29、CD34、CD44、CD45,将传至3代的细胞,以2×106/ml的密度接种于自制的壳聚糖-胶原-硫酸软骨素三维支架上.实验组为含TGF-β1的培养基,对照组无TGF-β1,培养3周后,通过免疫组织化学,RT-PCR及westenblot方法对诱导后的细胞进行鉴定.结果 制备的壳聚糖-胶原-硫酸软骨素三维支架具有合适的三维多孔结构,孔隙率为(92.23±1.68)%,孔径为100～130 μm.复合培养3周后,Ⅱ型胶原免疫组织化学染色成阳性,RT-PCR结果表明有蛋白聚糖和Ⅱ型胶原mRNA的表达,westenblot检测出Ⅱ型胶原蛋白的表达.结论 壳聚糖-胶原-硫酸软骨素复合支架材料可为脂肪间充质干细胞生长分化及组织形成提供一个良好的环境, 在软骨组织工程的支架材料领域有较广泛的应用前景.     

SOX-9和转化生长因子-β1共同诱导大鼠脂肪干细胞向软骨细胞分化

目的探讨应用SOX-9和TGF-β1基因转染大鼠ADSCs(Adipose stromal cells,ADSCs)后,目的基因分泌情况及向软骨细胞的分化效果,为构建新型的组织工程软骨种子细胞提供思路。方法6周龄健康雄性Wistar大鼠2只,体重约150g。扩增、提取质粒pcDNA3.1-TGF-β1、pcDNA3.1-SOX-9。分离、纯化Wistar大鼠ADSCs,倒置相差显微镜观察原代和传代ADSCs形态学改变,免疫荧光法检测细胞表面标志。将SOX-9和TGF-β1基因单独或共转染第3代ADSCs,按转染情况分为5组:对照组、转染空载体组、转染SOX-9组、转染TGF-β1组、SOX-9与TGF-β1共转染组。对转染后细胞进行筛选,MTT法测定筛选后细胞的增殖活性,RT-PCR和Westernblot法检测筛选后细胞的表达。结果免疫荧光法检测ADSCs的CD29、CD44呈阳性反应,CD34、CD106呈阴性反应。MTT法测定各组细胞在490nm波长处的吸光度(A)值,未转染组、空载体组与SOX-9组、TGF-β1组、SOX-9与TGF-β1共转染组间差异显著(P<0.01)。RT-PCR和Western blot检测目的基因和蛋白的表达量,SOX-9表达以转染SOX-9组最多;TGF-β1表达以SOX-9与TGF-β1共转染组组最多;II型胶原表达以SOX-9与TGF-β1共转染组最多。结论SOX-9和TGF-β1基因共同转染ADSCs修复软骨缺损是一个较有前景的发展方向,对组织工程软骨应用于临床具有重要意义。     

大鼠脂肪干细胞复合胶原-壳聚糖-硫酸软骨素三维支架构建组织工程软骨

目的 探讨大鼠脂肪干细胞复合胶原-壳聚糖-硫酸软骨素三维支架的优越性.方法 选用6周龄健康Wistar大鼠,分离出脂肪干细胞后行体外培养.将Ⅰ型胶原溶液与壳聚糖溶液混合后冷冻干燥,交联硫酸软骨素后再冷冻干燥得到复合三维支架,检测支架的孔径值、含水量及孔隙率.将接种的脂肪干细胞消化后分别接种到平面、微球和支架,软骨方向诱导培养.MTT检测细胞增殖情况,3周后倒置显微镜及扫描电镜观察细胞形态及在支架上的生长及黏附情况,并分析成软骨分化的情况.结果 5 d后MTT检测显示三维支架组及微球组细胞增殖速度较平面组快;三维支架组14 d后仍有细胞增殖.组织学分析显示细胞在支架上密集重叠生长,内层仍有残留支架结构.Ⅱ型胶原免疫组化检测结果显示,三维支架组及微球组表达呈强阳性,而平面组表达呈弱阳性.RT-PCR结果显示各组均有软骨特异性mRNA的表达.但平面组一直表达X型胶原,微球组培养至21 d时也表达X型胶原,而三维支架组则一直未表达.结论 复合胶原-壳聚糖-硫酸软骨素三维支架能促进细胞的增殖、分化,并能更好地维持软骨细胞的表型,可以作为组织工程构建软骨的最佳选择.     

单节段颈前路带锁钢板内固定的费用-效益分析

目的:从费用-效益分析角度探讨在单节段颈前路融合术中带锁钢板内固定的应用价值.方法:随访调查32例颈前路单节段融合钢板内固定及38例单节段单纯植骨融合的颈椎病病人,比较两组之间术后并发症、恢复各项活动的时间、各项住院花费等指标的差别,得出钢板内固定的费用-效益比值(CE值),平均随访时间为18.4个月.结果:所有并发症经保守治疗缓解或痊愈,两组并发症发生概率差别无统计学意义;钢板组病人恢复各项活动的时间均较对熙组短,而手术室费用较对照组明显增多;病人恢复工作的费用-效益比值是钢板组病人人均日收入的6.4倍,平均日总收入的2.9倍.结论:在单节段颈椎病的手术治疗中应用前路钢板内固定是一种安全、有效的方法,但由于费用方面原因,此术式应有选择地进行.     

一氧化氮合酶抑制剂对延缓腰椎间盘退变的影响

目的　探讨一氧化氮合酶(NOS)抑制剂L N6 亚氨乙基 赖氨酸(L NIL)和S 甲基异硫脲(SMT)对退变腰椎间盘组织代谢的影响。方法　无菌条件下,取2 0例腰椎间盘突出症患者的椎间盘组织体外培养,分别加入1mmol/L浓度的SMT和L NIL ,培养72h后,通过检测硝酸盐和亚硝酸盐的含量来观察椎间盘NO的释放量及NOS的活性;原位杂交法检测椎间盘组织iNOSmRNA和MMP3mRNA的表达。培养10d后,化学比色法观察椎间盘蛋白多糖含量和羟脯氨酸释放量的变化。结果　L NIL组髓核和纤维环NO释放量(65 .6±4.5 ,68.8±5 .7) μmol/L和SMT组髓核和纤维环NO释放量(69.5±6.5 ,69.1±6.1) μmol/L较对照组NO释放量(10 7.9±4.4,93 .1±5 .9) μmol/L明显减少(P <0 .0 1)。L NIL组和SMT组髓核组织中蛋白多糖含量(5 1.3±9.6,48.2±8.5 )kg/L ,比对照组(3 2 .1±6.4)kg/L明显增加(P <0 .0 1) ,羟脯氨酸释放量(1.1±0 .4,1.2±0 .5 )kg/L比对照组(3 .4±0 .8)kg/L显著减少(P <0 .0 1) ;同时,原位杂交法未检测到iNOSmRNA和MMP3mRNA的表达。结论　NOS抑制剂L NIL和SMT能抑制过量NO的释放,对延缓椎间盘退变具有积极的作用