氯丙嗪对撤除苯巴比妥钠诱导的小鼠肝细胞凋亡有抑制作用(英文)

目的:研究氯丙嗪(Chl)、维拉帕米和阿斯匹林对撤除苯巴比妥钠(Phe)引起的小鼠肝细胞凋亡有无抑制作用及其时效关系。方法:以肝DNA含量、肝/体重比、DNA片段含量、DNA电泳、原位DNA末端标记试验(TUNEL)及形态学改变为指标,研究Phe 75mg·kg~(-1)·d~(-1)ip诱导小鼠肝细胞增殖及撤药后增殖肝回落的动态过程,并观察Chl25mg·kg~(-1)、维拉帕米50mg·kg~(-1)或阿司匹林60mg·kg~(-1)ip对小鼠肝细胞凋亡的影响及其时程效应。结果:Phe诱导小鼠肝细胞增殖及停药后增殖肝的回落由增殖期、平台期、快速回落期和缓慢回落期四个时相组成,快速回落期是一个典型的凋亡过程,其早期能被钙调蛋白拮抗剂Chl阻断。结论:钙调蛋白在撤除Phe引起的小鼠肝细胞凋亡中起重要作用。     

抗T、B淋巴细胞血清的研制及其在免疫病理中的应用

<正> 近年来,国外相继报道了应用人胸腺细胞,外周血B细胞制备ATG和ABG的方法。迄今大多数研究和治疗报告中所用的ATG仍然利用胸腺细胞作为抗原进行制备。然而,最近的研究已经证实,淋巴细胞在不同阶段,其抗原表达不完全相同。抗胸腺细胞血清并不能完全代替抗T淋巴细胞血清。目前,尚未见有利用多种淋巴组织中T细胞联合制备ATG的报道。我们应用尼龙毛柱-玫瑰花环梯密度离心双重分离法分     

分泌mMIP-1α趋化因子的小鼠肝癌细胞株的建立及其体内致瘤性

目的：建立分泌mMIP-1α的小鼠肝癌细胞株,并观察其体内致瘤性。方法：mMIP-1αcDNA被克隆入pBabe puro逆转录病毒载体,构建的重组逆转录病毒载体pBabe-puro-mMIP-1α转染包装细胞,嘌呤酶素抗性细胞培养上清感染小鼠肝癌细胞系Hepa1－6,RT－PCR和免疫组化分别检测Hepa1-6,Hepa1-6-mMIP-1α的mMIP-1αmRNA和mMIP-1α蛋白折表达。绘制Hepa1-6-mMIP-1α与Hepal1-6手长曲线观察细胞的生长,琼脂糖凝胶打孔法体外观察Hepa1-6-mMIP-1α分泌蛋白对小鼠脾细胞的趋化作用。观察Hepa1-6-mMIP-1α体内瘤性。结果：构建了重组逆转录病毒载体pBabe puro-mMIP-1α,Hepa1-6不表达mMIP-1αmRNA及蛋白,Hepa1-6-mMIP-1α表达mMIP-1αmRNA和蛋白。Hepa1-6-mMIP-1α与Hepa1-6的生长曲线基本一样,Hepa1-6-mMIP-1α分泌了对小鼠脾细胞有趋化作用的分子。Hepa1-6-mMIP-1α体内致瘤性降低。结论：Hepa1-6-mMIP-1α能产生mMIP-1α,mMIP-1α分泌了对小鼠脾细胞有趋化作用的分子。Hepa1-6-mMIP-1α体内致瘤性降低。结论：Hepa1-6-mMIP-1α能产生mMIP-1α,mMIP-1α不改变细胞体外生长状况,嫌生的mMIP-1α有趋化活性,mMIP-1α能使Hepa1-6-mMIP-1α致瘤性降低。     

表达嵌合T细胞受体的T淋巴细胞介导的肿瘤过继性免疫治疗作用研究

目的:构建嵌合T细胞受体(chimeric T cell receptor,chTCR),它包括识别肿瘤相关抗原erbB2的单链抗体、共刺激分子CD28和CD3的信号转导链ζ,将其依次克隆入载体pcDNA3中,电转染入人外周血T淋巴细胞,使嵌合T细胞受体在T细胞表面表达,并验证其在体外和体内的抗肿瘤作用,为肿瘤的过继性免疫治疗提供新思路。方法:抗erbB2的单链抗体(由本所保存),人CD28分子的部分胞外段、跨膜区和胞内段,CD3ζ链的胞内段(分别由RT-PCR的方法获得)依次克隆入载体pcDNA3中,经酶切鉴定正确后,电转染进入人外周血T淋巴细胞,利用流式细胞仪检测T细胞结合Her2蛋白的功能;细胞杀伤试剂金检测T细胞的抗原特异性杀伤功能;并在裸鼠体内验证其对人的乳腺癌细胞株BT-474移植瘤的杀伤效应。结果:成功构建了抗erbB2嵌合T细胞受体并表达在人的T淋巴细胞表面,体外证明能结合Her2肿瘤抗原,并有抗原特异性的杀伤功能,在BALB／c裸鼠体内对表达erbB2的肿瘤细胞BT～474有显著的抑制肿瘤生长的作用。结论:表达嵌合T细胞受体的T淋巴细胞在体外和体内有抗原特异性的杀伤肿瘤的作用,是一种新的肿瘤过继性的免疫治疗策略。     

不同贫血病时C-erbB1胚系扩增与骨髓再生和白血病发生

目的：证明上皮生长因子受体(EGFR)基因与白血病发生和骨髓再生的相关性。方法：应用鸡原始红细胞增多症病毒癌基因V-erbB作探针，进行Southern印迹杂交，对8例不同贫血状态下的血液病，包括5例骨髓增生异常综合征(MDS)，1例家族性急性髓细胞白血病及其亲属，1例缺铁性贫血(IDA)和1例范柯尼贫血(FA)等进行检测，并以7例AL、MDS和AA父母为对照。结果：MDS和AL有C-erbB1重排／扩增。患者父母仅有C-erbB1重排，大多数无胚系扩增；MDS和IDA有C-erbB1胚系扩增，但IDA无C-erbB1重排；正常人大多数与其父母一样，既无C-erbB1胚系扩增，也无C-erbB1重排。结论：C-erbB1即EGFR基因重排／扩增与MDS和AL有关，且其胚系扩增可能还与骨髓再生相关。白血病的发生还可能与骨髓再生有负相关，且对EGF不依赖。     

原发性肝癌预后因素的研究进展

原发性肝癌(简称肝癌)常见于亚非地区,近年来其发病率在世界范围内有明显增高的趋势.肝癌发病隐匿、发展快、预后不佳.随着AFP和各项显像技术广泛应用,发现了不少小肝癌病例,使肝癌手术进入了亚临床水平,目前几无手术死亡.小肝癌术后五年生存率达70.5%.尽管目前手术切除是最好的治疗方法,但同其它实体肿瘤治疗相比还有相当差距.近年从不同学科的角度对影响肝癌预后的可能因素进行了大量研究,现仅就几个主要的方面作一综述.临床与肝癌生存有关的因素     

含血停搏液对未成熟心肌缺血-再灌注损伤的实验研究

目的观察冷血浆停搏液对未成熟心肌缺血-再灌注损伤的保护作用。方法选择14～26日龄日本大耳白兔20只,建立Langendorff离体心脏灌注模型。随机抽取4只作为正常对照组(C组),其余16只随机均分为冷血浆组(P组)和冷血组(B组)。C组灌注10minK-H液终止灌注,取右室心肌做检测用。P组、B组降温同时开始分别灌注冷血浆停搏液和冷血停搏液(4℃)15mL/kg,低温(10℃)停搏30min开始复温,再灌注37℃K-H液10min后,采集、处理和保存右室心肌标本。TUNEL法测定心肌细胞凋亡。RT-PCR检测Bcl-2mRNA,行半定量分析。结果C组心肌组织凋亡率为0,P组和B组均出现心肌细胞凋亡,P组凋亡率低于B组(P<0.05)。缺血-再灌注损伤可以使心肌组织中Bcl-2mRNA表达减弱,B组Bcl-2mRNA表达减弱更为明显,P组、B组分别与对照组比较,有显著性差异(P<0.05,P<0.01)。结论未成熟心肌缺血-再灌注伴有细胞凋亡。冷血停搏液、冷血浆停搏液对未成熟心肌缺血均具有保护作用,而冷血浆停搏液作用更为明显。     

单克隆抗体在肿瘤治疗中的应用

1895年，Charles Richet和Jules Hericourt将狗的抗血清应用于进展期肿瘤患者，尽管产生了明显的抗异种蛋白的免疫反应，但仍有部分患者的病情得到了改善。因为特异性及纯度较差，这样的抗血清并未治愈患者。治疗性抗体经过一个世纪的发展，具有更高特异性的单克隆抗体（以下简称单抗）成为研究的主流。     

反义人IGF-Ⅰ基因转移预防血管损伤后新生内膜增殖的实验研究

目的：观察人反义IGF－Ⅰ基因转移对抑制血管平滑肌细胞增殖的效果。方法：将反义IGF-Ⅰ基因转导至大鼠球囊损伤的颈动脉再狭窄模型中，21天后观察其对新生内膜形成的影响。结果：与对照组相比，损伤血管新生内膜／中层面积比降低了41％（P＜0．001）。结论：反义人IGF-Ⅰ基因治疗可能对血管成形术后再狭窄有一定的预防作用。     

嵌合T细胞受体的构建及其在T淋巴细胞表面的表达和体外抗肿瘤功能的检测

目的利用基因工程技术构建表达嵌合T细胞受体(ch-TCR)分子的逆转录病毒载体(由抗 erbB2的单链抗体和信号传导链CD3ζ组成),感染预先刺激的小鼠T细胞,使得T细胞能以MHC非限制性的方式在体外识别并杀伤肿瘤细胞,为肿瘤的过继性免疫治疗提供新思路。方法将抗erbB2的单链抗体、CD8分子绞链区、CD3ζ链的跨膜区和胞内段依次克隆入逆转录病毒载体pCMMP中,与另外两个辅助载体pHDM．G和pMD．MLVgag．pol共同转染293T细胞,包装获得病毒颗粒,感染NIH3T3细胞检测病毒滴度。取适量病毒液感染预先刺激的小鼠CD3+T细胞,流式细胞仪检测嵌合受体在细胞表面的表达,非放射性的细胞杀伤试剂盒和ELISA检测试剂盒分别检测T细胞的抗原特异性杀伤和细胞因子分泌的功能。结果成功构建抗erbB2嵌合T细胞受体基因的逆转录病毒载体,检测病毒滴度为(2．1±1．1)×108IP／ml。体外感染T淋巴细胞的效率为(45±5)％。体外能杀伤erbB2+的肿瘤细胞SK-BR-3、D2F2／E2,而对erbB2-的肿瘤细胞 MCF-7、D2F2无杀伤功能,并能分泌Th1型细胞因子GM-CSF和IFN-γ。结论表达抗erbB2嵌合T细胞受体的T淋巴细胞体外具有MHC非限制性的、erbB2抗原特异性的杀伤肿瘤细胞和分泌 Th1型细胞因子的功能,为下一步的体内实验打下基础。