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1.
目的:探讨肝星状细胞条件培养基(hepatic stellate cell conditioned medium,HSC-CM)对人肝癌PLC/PRF/5细胞耐药性的影响及其可能的机制。 方法: 用无血清RPMI 1640培养肝星状细胞LX-2,使其在缺营养的环境下活化,收集其条件培养上清即为HSC-CM。PLC/PRF/5细胞在HSC-CM条件下培养24 h后,顺铂处理12 h或24 h,采用流式细胞术检测PLC/PRF/5细胞的凋亡情况,MTT法检测PLC/PRF/5细胞的增殖,real-time PCR检测PLC/PRF/5细胞上皮间质转化(epithelial mesenchymal transition,EMT)相关基因的表达水平。 结果: 顺铂组12和24 h两个时间点PLC/PRF/5细胞的凋亡率为(22.34±1.12)%和(26.78±1.56)%;HSC-CM+顺铂组细胞的凋亡率为(17.22±1.42)%和(21.52±1.76)%,顺铂组细胞凋亡率显著高于HSC-CM+顺铂组(P<0.05)。同在这两个时间点,顺铂组和HSC-CM+顺铂组PLC/PRF/5细胞的增殖活性分别为(68.65±2.56)%和(79.47±1.43)%,(46.54±3.65)%和(62.77±2.89)%,HSC-CM+顺铂组细胞增殖活性均高于顺铂组(P<0.05)。Real-time PCR 结果显示,与顺铂组相比较,HSC-CM+顺铂组PLC/PRF/5细胞中上皮标记物钙黏蛋白(E-cadherin)的表达下降(P<0.05),而间质细胞标记物神经黏附素(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)以及EMT相关转录因 子Snail和ZEB1的表达显著上调(P<0.01)。 结论: HSC-CM可能通过诱导PLC/PRF/5细胞发生EMT,从而增强PLC/PRF/5 细胞对顺铂的抵抗作用。 相似文献
2.
目的分析研究细胞因子诱导杀伤细胞(CIK)生物治疗乳腺癌合并恶性胸水疗效。方法 40例乳腺癌合并恶性胸水患者,随机分为研究组和对照组,各20例,研究组患者采用CIK回输联合吉西他滨和顺铂(GP)化疗,对照组采用吉西他滨和顺铂进行化疗,观察两组化疗效果及化疗后副作用情况,并进行分析比较。结果研究组患者乳腺癌治疗总有效率100.0%和恶性胸水总有效率90.0%明显高于对照组60.0%和75.0%,两组比较差异均有统计学意义(P<0.05);Ⅲ、Ⅳ度副作用发生率明显低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 CIK细胞回输联合吉西他滨和顺铂治疗乳腺癌合并恶性胸水临床效果良好,有效改善患者预后,毒副反应可耐受,值得临床推广采用。 相似文献
3.
胆管反应是指在肝祖细胞介导的肝脏修复过程中形成的局部细胞复合体.这种复合体包括有激活的肝祖细胞、中间型肝胆细胞和反应胆管细胞.胆管反应对肝癌发生发展具有重要作用.胆管反应中的肝干/祖细胞的恶性转化和迁移性是肝癌浸润和转移的基础,同时胆管反应又为肝癌的发生发展提供基质微环境.本文就胆管反应的分类、细胞多样性以及胆管反应在肝炎和肝癌发生发展中的作用研究进展进行综述,旨在研究胆管反应对阐明肝癌的发病机制,探索有效的治疗手段. 相似文献
4.
目的研究p53对二乙基亚硝胺(DEN)诱导肝细胞恶变过程的影响,探讨p53功能缺失与细胞恶变的关系。方法使用p53特异性抑制剂pifithrin-α(PFT-α)和(或)人p53小RNA干扰质粒sip53抑制L02细胞p53的转录活性。采用荧光素酶报告基因法检测不同时间点、不同浓度DEN对p53功能正常和缺失的L02细胞AP-1转录激活活性的影响,检测不同DEN处理时间对p53转录激活活性的影响及PFT-α对AP-1转录激活活性的影响。转录激活活性用相对荧光强度表示。结果应用PFT-α或转染sip53质粒24h后,p53的转录活性明显下降。单纯DEN处理后AP-1的相对荧光强度轻度上调,而DEN+PFT-α和DEN+sip53处理的细胞内AP-1相对荧光强度与单纯DEN处理组比较均有上调,呈现时间和浓度双重依赖性;在作用24h时点或DEN浓度为100ng/L时作用达高峰,随后回落。DEN处理后p53相对荧光强度明显上调,且存在时间依赖性,在24h达高峰,随后回落。DEN+PFT-α处理的细胞p53相对荧光强度在各时间点的变化不明显,始终保持在较低水平。以PFT-α抑制p53功能后,L02细胞内AP-1的相对荧... 相似文献
5.
肝干细胞是一类具有干细胞特征并且能向肝细胞和胆管细胞分化的细胞,具有无限的增殖能力及多向分化潜能.肝干细胞可以来源于胚胎发育过程中出现的胎肝干细胞,成年肝内存在的肝干细胞及其子代细胞卵圆细胞、小肝细胞、肝星状细胞以及特定情况下肝外来源的细胞(如骨髓、胰腺、脐血、胎盘)等.近年来如何分离和鉴定这一小群细胞成为研究的热点.由于肝干细胞治疗各种原因引起的肝病具有无可比拟的优势,因此探讨获取肝干细胞的方法有重要的现实意义.本文就近年来对不同来源的肝干细胞的分选方法进展做一综述. 相似文献
6.
神经酰胺诱导肝癌细胞凋亡 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:观察C2-神经酰胺诱导肝癌细胞凋亡,为进一步研究肝癌细胞凋亡信号的传导提供实验依据.方法:将C2-神经酰胺作用于肝癌细胞SMMC-7721及BEL-7402后,分别行H-E染色、荧光染色、TUNEL方法检测及流式细胞仪Sub-G1法,检查细胞的凋亡.结果:10 μmol/L C2-神经酰胺作用肝癌SMMC-7721细胞,48 h后发生凋亡,H-E染色及荧光染色检测可见典型的细胞凋亡表现,细胞核固缩、碎裂,以及碎裂的细胞核浓染成为凋亡小体.经流式细胞仪检测可见典型的Sub-G1凋亡峰,凋亡细胞占细胞总数(9.20±0.73)%.在BEL-7402细胞也观察到相似的结果.结论:C2-神经酰胺可诱导肝癌SMMC-7721及BEL-7402细胞的凋亡. 相似文献
7.
目的观察携带单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV—TK)、共刺激因子(B7)基因联合在大鼠乳腺癌细胞的共表达。方法应用基因重组技术。分别构建携带含TK、B7基因的重组GcTKpB7SN,GepB7SN、GeTKpSN逆转录病毒载体.重组载体经包装以病毒上清液感染SHZ一88大鼠乳腺癌细胞,而后进行G418抗性克隆计效,流式细胞、原位细胞杂交检测B17、TK基因表达。结果转染重组GeTKpB7SN、GepB7SN基因的腺癌细胞经泷式细胞仅检测表明有B7基因表达;原位细胞杂交对转染重组GeTKpB7SN、GeTKpSN基因乳腺癌细胞能观察到TK基因表达。结论经逆转录病毒载体介导外源性自杀基因和共稠激因子能在大鼠乳腺癌细胞内共表达。 相似文献
8.
9.
肾综合征出血热(HFRS)迄今尚无特异性有效的治疗制剂。本文在用小白鼠新生乳鼠人工感染HFRS病毒试验证明抗HFRS病毒血凝素McAbs对感染动物有保护作用的基础上,在小白鼠孕鼠(BALB/c纯系小鼠,本室自行繁殖)产前3d和5d,皮下接种抗HFRS病毒血凝素McAbs(3D8、3G1、3G3及8F8等量混合制剂1ml,待其子鼠产后第3天,腹腔接种100LD_(50)HFRS陈株病毒悬液,观察两周。同法接种抗HF- 相似文献
10.
Flt3配体修饰小鼠肝癌疫苗的制备及其体内抗肿瘤活性观察 总被引:2,自引:0,他引:2
目的:以小鼠Flt3配体(murine flt3 ligand, mFL)的重组腺病毒载体(AdmFL)体外感染小鼠肝癌细胞株Hepa1-6制备肝癌疫苗,并观察其体内抗肿瘤活性.方法:腺病毒载体体外感染Hepa1-6细胞,48 h后通过载体所携带的绿色荧光蛋白(GFP)的表达检测感染的效率;并用ELISA方法检测第0、2、4、6、8天培养上清中mFL的表达量;每天进行细胞计数(连续14 d),观察细胞的体外生长曲线;取5×106个修饰后的Hepa1-6细胞接种C57BL/6小鼠,4周后于原接种部位的对侧再接种2×106个野生型Hepa1-6或EL4细胞.结果:AdmFL能有效感染靶细胞Hepa1-6,培养上清中mFL表达量在第2天最高,达到(71.1±6.3) ng/ml,感染后Hepa1-6的体外生长未受到明显抑制;修饰后Hepa1-6细胞的体内成瘤性下降;4周后再接种Hepa1-6细胞,肿瘤生长速度明显降低;而再接种的EL4细胞呈渐进性生长,与对照组相比无显著差异.结论:腺病毒介导的Flt3配体基因修饰后的肝癌细胞的体内成瘤性下降,并能激发特异性免疫保护反应,是有效的肝癌疫苗. 相似文献