超声电导仪治疗颈部淋巴结结核的临床观察

目的：观察超声电导仪治疗颈部淋巴结结核的临床疗效和安全性。方法：将48例颈部淋巴结结核患者随机分为治疗组和对照组,每组各24例,2组均以常规抗结核化疗方案为基础,治疗组加用超声电导仪经皮导入异烟肼注射液、硫酸阿米卡星注射液,对照组加用局部注射异烟肼注射液、硫酸阿米卡星注射液,并追踪观察治疗结果和并发症。结果：以患者治疗后的主要症状、体征缓解情况,局部超声检查等为疗效判断依据,评价治疗结果。治疗组经2个疗程治疗后好转率明显高于对照组（P〈0.05）,所有病例未见严重不良反应及并发症。结论：超声电导仪治疗颈部淋巴结结核能提高颈部淋巴结结核的好转率,是一种无严重并发症和不良反应,安全有效的方法。     

结核分支杆菌分泌蛋白Mtb81在大肠杆菌中的高效表达

目的 通过结核分支杆菌Mtb81基因在大肠杆菌中的表达,获得大量纯化的重组Mtb81蛋白。方法 应用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)技术扩增结核分支杆菌H37Rv Mtb81DNA序列;将目的基因与pGEM-T连接,转入E．coli-DHSa大量繁殖后,提取质粒DNA,酶切鉴定、测序;构建pET24b-Mtb81重组质粒．然后转化入表达宿主大肠杆菌BL21(DE3);诱导转化菌株,通过SDS-PAGE电泳鉴定Mtb81表达水平,采用His.band纯化Mtb81蛋白。结果 pGEM-T/Mtb81内插入序列测序表明与报道的序列相同;pET24b-Mtb81在大肠杆菌BL21(DE3)细胞内以包涵体形式存在．表达量占菌体总蛋白的30％左右．相对分子质量约88ku;纯化后的Mtb81样品经SDS-PAGE和光密度扫描分析表明其纯度为95％左右．从培养菌中可获得200mg/L左右纯化的蛋白。结论 pET24b-Mtb81大肠杆菌工程菌株能高效表达Mtb81蛋白．大量纯化的Mtb81为进一步的研究、应用奠定了基础。     

用DNA芯片检测结核分枝杆菌耐利福平基因突变的初步研究

目的研制一种新型DNA芯片，用于快速检测结核分枝杆菌耐利福平rpoB基因突变。方法根据结核分枝杆菌rpoB基因序列设计探针并制作DNA芯片，PCR掺入法荧光标记根据结核分枝杆菌rpoB基因突变热点的目的片断，与DNA芯片杂交，同时以DNA测序法为对照。结果18株结核分枝杆菌临床分离株中，1株敏感株DNA芯片杂交结果与标准株完全相同；17株耐RFP临床分离株中有17株检测到rpoB基因突变，其中14株单位点突变，1株511和516位双位点突变，与测序结果完全一致。另有两株为517和518、526和517位双位点突变，因为芯片上未点517位突变的探针，所以只检测到518和526位的突变，该突变与测序结果完全一致、结论用DNA芯片可快速、特异地检测出大多数结核分枝杆菌耐利福平分离株的rpoB基因突变，可用于临床耐药性的检测，指导临床用药。     

地震与支气管哮喘探讨

四川省汶川县位于四川盆地西北部边缘，居阿坝藏羌族自治州东南部，周围有众多山体围绕。属于亚热带气候，由于地形和不同季风环流的交替影响，气候复杂多样。由于独特的地理位置和气候条件，春夏季节该地区常见的呼吸道疾病如花粉引起的过敏性鼻炎、过敏性哮喘、流感、麻疹等是诱发支气管哮喘的常见原因。2008年5月12日四川省汶川一带发生里氏8．0级地震，     

应用聚合酶链反应-寡核苷酸探针快速检测结核菌耐药基因突变

目的应用聚合酶链反应(PCR)-寡核苷酸探针快速检测结核菌耐药基因突变，建立一种新的分子药敏试验方法。方法以传统药敏试验、PCR-单链构象多态性和PCR-直接测序方法为对照，对利福平、链霉素(SM)和乙胺丁醇耐药的结核菌基因rpoB、rpsL、ITS和embB的寡核苷酸探针，通过反向斑点杂交检测78株结核菌临床分离株PCR产物。结果18株结核菌药物敏感株的4种耐药基因均为野生型。60株结核菌耐药分离株中，59株为耐RFP株，rpoB基因突变率为93．2％，最常见的突变位点为531位和526位密码子，33株为耐SM株，rpsL基因突变率为75．8％，均为43位密码子AAD AGG突变，ITS基因突变率为9．1％，均为513位A→C突变，rpsL和ITS基因总突变率为84．8％；43株为耐EMB株，embB基因突变率为58．1％，均为306位密码子突变。结论应用PCR一寡核苷酸探针反向斑点杂交技术可简便、快速、准确地分析大多数结核菌耐药基因突变，检测其耐药性。     

结核分枝杆菌Km基因突变与耐卡那霉素药物的研究

目的　分析结核分枝杆菌(T.M)耐卡那霉素(KM)和(Km)基因突变情况。方法 通过传统梯度药敏试验和聚合酶链反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析127株分枝杆菌临床分离株耐KM情况和Km基因的变化。结果 药敏试验卡那霉素耐药率为35.4%(45/127),127株分枝杆菌临床分离株的16S rDNA SSCP电泳图谱均与结核分枝杆菌标准株相同。45株耐卡那霉素分离株中,12株(26.6%)Km基因SSCP泳动异常。结论 T.M对抗结核二线药物中的KM药物已出现耐药,其部分耐药原因可能是由于T.M耐KM药物的Km基因突变所致。     

化疗对肺结核病患者抗体水平的影响及相关因素探讨

 目的 调查结核病患者化学药物治疗(化疗)后体液免疫反应特征,并探讨其影响因素.方法 109例接受化疗的结核病患者,采用SPA-ABC ELISA每周检测其血清抗PPD和抗38KDa蛋白抗体滴度,至12周.结果 结核病患者化疗后体液免疫反应可分为3种模式,模式1、模式2和模式3患者痰涂片阳性率分别为76.5%、92.6%和0%,其耐多药病例比率分别为11.8%、63.0%和0%.结论 化疗后结核病患者体液免疫反应存在3种模式,但不同抗原的抗体应答模式特征不尽相同.病灶结核菌数量及其耐药性可能是导致化疗后不同体液免疫反应模式的重要因素.     

结核分支杆菌MPT64质粒DNA的免疫原性和保护效力

目的　研究结核分支杆菌 (Mycobacterium tuberculosis,MTB)MPT64质粒DNA的免疫原性和保护效力。方法 分别用生理盐水 (A)、载体质粒 (B)、卡介苗 (C)和MPT64重组质粒 (D)免疫小鼠,通过ELISA方法检测小鼠血清中抗MPT64抗体,免疫 8周后以MTB腹腔内攻击小鼠,攻击 4或 9周后,分别取肺、肝和脾脏观察病理改变、称取重量、作菌落计数及脾淋巴细胞转化试验。结果 D组1 0只小鼠中只有 4只血清中检测出抗MPT64抗体。MTB攻击 4周后,D组鼠脾淋巴细胞转化率显著高于其它 3组,A、B、D组肺、肝和脾重量明显高于C组,A组脾菌落数较其它 3组明显增多,其余脏器菌落数各组无明显区别,A、B组可见肺部严重病变,C组未见明显病变,D组存在个体差异。MTB攻击 9周后,A、B组鼠脾淋巴细胞转化率较C组显著降低,D组显著增高,各组肺、肝和脾重量无显著差别,C组肝菌落数明显低于其它 3组,其余脏器各组间无显著差别,各组鼠肺表面均可见不同程度的病变。所有鼠肝、脾均未见明显病变。结论 MTBMPT64DNA疫苗经肌肉注射免疫小鼠能诱发特异的体液和细胞免疫应答,对小鼠抗MTB感染具有一定的免疫保护效力,但比卡介苗差。     

肺结核合并非结核分枝杆菌病2例

例1,患者,女,61岁,工人。2002年3月28日以“咳嗽,咳痰,间断低热,痰中带血11月”第2次入院。既往患糖尿病,左乳腺癌根治术史3年。X线胸片:左上斑片阴影,空洞形成。2001年9月痰找抗酸杆菌（涂片/集菌）阳性,痰培养3次阳性:结核分枝杆菌,SM、RFP、EMB、INH均敏感,诊为“肺结核”。     

结核分支杆菌重组ESAT6蛋白抗原诱发豚鼠迟发型超敏反应的研究

结核菌素纯蛋白衍生物 (ＰＰＤ)含多种蛋白成分 ,与多种分支杆菌存在交叉 ,尤其在鉴别结核分支杆菌感染和卡介苗接种阳转者上有一定的困难。所以ＰＰＤ作为结核病诊断试剂有其局限性。现已发现结核分支杆菌Ａｇ85、ＭＰＴ6 4、380 0 0、ＭＰＴ6 3、ＥＳＡＴ6等抗原 ,均能诱发豚鼠发生迟发性超敏反应 (ＤＴＨ)。具有高特异性的新的诊断试剂或许就存在它们或它们的组合中。ＥＳＡＴ6蛋白是结核分支杆菌生长中的一种小相对分子质量分泌蛋白 ,它能诱发结核分支杆菌感染的豚鼠发生很强的ＤＴＨ反应 ,大部分ＢＣＧ在减毒过程中丢失了编码该蛋白的…