严重急性呼吸综合征患者康复期T淋巴细胞亚群变化的临床应用分析

严重急性呼吸综合征（SARS）是由SARS冠状病毒（SARS-CoV）感染引发的一种新型传染性疾病，以肺部病变为主，出现合并感染，并引起肺外多器官损伤、功能衰竭。SARS传染性极强，人群普遍易感，发病后，机体出现严重的细胞免疫和体液免疫损害。我们针对SARS患者康复后的免疫恢复状况进行监测，结合正常对照以及文献报道进行对比研究，为临床预后判断提供指导。     

原发性肝癌和乙型肝炎肝硬化患者外周血淋巴细胞凋亡率、T细胞亚群和NK细胞的水平变化和临床意义

目的通过检测乙型肝炎肝硬化和合并乙型肝炎病毒感染的原发性肝细胞癌患者的外周血的粒细胞、单核细胞、NK细胞、T细胞及其亚群和淋巴细胞及其凋亡率,探讨两者在细胞免疫方面的差异.方法用Ficoll Hypaque离心法分离外周血单个核细胞(PBMNC),流式细胞仪检测外周血T细胞及其亚群、NK细胞和淋巴细胞、单核细胞和粒细胞,AnnexinV/FITCKit检测凋亡细胞.结果乙型肝炎肝硬化患者的外周血单核细胞、粒细胞、淋巴细胞、CD3-CD16 CD56 NK细胞、CD3 T细胞、CD3 CD4 T细胞、CD3 CD4 T细胞和CD4 CD8 T细胞比值,均与正常对照组无显著性差异(P＞0.05);但淋巴细胞凋亡率明显低于对照组(P＜0.01).原发性肝癌外周血CD3-CD16 CD56 NK细胞、单核细胞和CD4 /CD8 T细胞比值与肝硬化组和正常对照组比较,均无显著性差异(P＞0.05),而粒细胞明显升高(P＜0.05);CD3 T细胞、CD3 CD4 T细胞和CD3 CD8 T细胞均较另两组明显减少(P＜0.05),淋巴细胞及其凋亡率均明显低于另两组(P＜0.01).结论乙型肝炎肝硬化患者的外周血细胞免疫只发生不显著的变化,但淋巴细胞的凋亡率明显降低.原发性肝癌外周血的细胞免疫和淋巴细胞凋亡率均明显低下.     

儿童急性淋巴细胞白血病分型及其不同治疗方案与预后的临床研究

目的：研究儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)的细胞形态学、免疫表型分型及不同方案治疗与预后的相关性。方法：采用骨髓涂片染色进行细胞形态学检查，采用单克隆抗体(McAb)和流式细胞仪(FCM)进行免疫表型检测。结果：103例儿童ALL患者中，67例(65．05％)为L1型，33例(32．04％)为L2型，无L2型，3例(4．91％)为其他。行免疫分型的87例中，58例(66．67％)为B系表达，12例(13．79％)为T系表达，10例(11．49％)为B系、髓系混合表达，3例(3．45％)为T系、B系混合表达，1例(1．15％)为T系、髓系混合表达，1例(1．15％)为B系、T系、髓系混合表达，2例(2．30％)为髓系表达。采用XH-88方案治疗25例，缓解卒92％，复发率52．17％，死亡率43．48％；协作组方案治疗41例，缓解率92．68％，复发率36．84％，死亡率55．26％；SUM-99方案治疗29例，缓解率93．10％，复发率18．52％，死亡率14．81％。结论：结合免疫分型与细胞形态学分型，将儿童ALL患者分为标危(SR)、中危(IR)和高危(HR)三组，按型采用不同的治疗方案对提高儿童ALL缓解率和降低其复发率有重要意义。     

2009-2013年陕西省手足口病流行病学及病原学特征分析

目的 分析2009-2013年陕西省手足口病流行特征及病原体型别.方法 从疾病监测信息报告管理系统中获取2009-2013年陕西省手足口病疫情资料,运用描述流行病学方法进行分析.结果 2009-2013年陕西省累计报告手足口病病例229 903例,重症3 071例,死亡108例.5岁以下儿童占病例总数的91.44％,散居儿童占病例总数的68.87％.发病高峰在4～7月,西安、渭南、咸阳是最主要的高发地区.全省累计报告实验室确诊病例6 603例,其中普通病例4 872例,重症1 673例,死亡58例.实验室确诊病例中病原构成为肠道病毒71型(enterovirus 71,EV71)、柯萨奇病毒A16型(coxsackievirus A16,CoxA 16)和其他肠道病毒,分别占44.81％,18.87％和36.31％.普通病例与重症病例病原学构成不同(x2=622.46,P＜0.001).结论 5岁以下散居儿童是主要发病人群,病原学构成以EV71、CoxA16为主,普通病例与重症病例病原学构成存在差异.     

含脐血MSCs体系扩增后的脐血重建NOD/SCID小鼠造血的研究

[目的]探讨含人脐血(umbilical cord blood,UCB)来源的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)联合造血生长因子(hematopoietic growth factors,HGFs)体系扩增后的脐血造血细胞在NOD/SCID小鼠体内植入及重建小鼠造血的能力.[方法]①用含女性胎儿脐血MSCs(UCBMSCs)及HGFs组合的无血清扩增体系体外扩增男性新生儿UCB CD34 细胞.②收获扩增第6天的UCB细胞,经尾静脉移植给亚致死量照射后的雌性NOD/SCID小鼠.③动态观察移植后小鼠生存情况及外周血象的恢复.④移植后8周,流式细胞仪检测存活小鼠骨髓中人CD45 、CD45 CD33 、CD45 CD41 、CD45 CD3 和CD45 CD19 细胞含量;PCR法检测移植小鼠外周血中人Y染色体表达.[结果]①非扩增组小鼠存活率为60%,扩增组存活率为90%.②动态观察发现:扩增组白细胞和血红蛋白于移植后第20天恢复,PLT于移植后第40天恢复,明显短于非扩增组.③移植后8周,两组小鼠外周血中人Y染色体检测均为阳性,扩增组和非扩增组小鼠骨髓中人CD45 细胞的含量分别为18.5%±8.3%和16.5%±5.7%,差异无统计学意义(P＞0.05).④移植后8周,扩增组小鼠体内CD45 CD33 和CD45 CD41a 细胞的百分率均高于非扩增组,但CD45 CD3 、CD45 CD19 细胞百分比均低于非扩增组.[结论]①含人UCBMSCs体系扩增后的UCB细胞具有NOD/SCID小鼠体内植入并重建小鼠造血的能力,但不具有提高小鼠体内植入率的作用.②扩增后的UCB移植可显著促进移植后小鼠造血恢复,提高小鼠存活率.③扩增后的UCB移植主要促进小鼠髓系及巨核系的植入,但对淋巴系的植入有抑制作用.     

同种异基因小鼠骨髓腔内脐血移植模型的建立及其对造血干细胞植入的影响

[目的]建立同种异基因小鼠骨髓腔内脐血移植模型,研究该技术对造血干细胞(HSC)归巢、植入率、移植后免疫造血重建、移植物抗宿主病(GVHD)等方面的影响.[方法]用C57BL/6胎鼠及新生鼠外周血(FNPB)作供体,以单侧胫骨骨髓腔内注射(IBMI)和尾静脉注射(Ⅳ)两种途径移植经亚致死量60Coγ射线辐照预处理的BALB/c鼠.200只受鼠随机分为4组:骨髓腔内注射组(IBM组);尾静脉注射组(Ⅳ组);放疗对照组;正常对照组,每组50只.用组织冰冻切片和流式细胞术动态了解CFSE标记FNPB在受体内的分布变化,并观察移植后受鼠存活状况、植入水平、造血与免疫功能恢复及GVHD情况.[结果]①荧光标记FNPB体内动力学显示直至输注后72 h,供体FNPB经IBMI后主要积聚于注射侧骨髓腔内,肺部滞留很少.而Ⅳ组及IBM组非注射侧骨髓中的FNPB细胞数显著少于IBM组注射侧,Ⅳ组非造血组织器官如肺部有明显供体细胞滞留.②同种异基因小鼠CBT模型中IBM组造血、免疫功能的恢复明显快于Ⅳ组,无GVHD,移植后90 d存活率达到90%,注射侧胫骨植入水平(29.53±6.64)%,较Ⅳ组有显著改善.③IBM输注侧骨髓中供体HSCs植入水平及造血重建速度明显优于非注射侧骨髓.[结论]成功建立同种异基因小鼠骨髓腔内脐血移植模型,并证实IBMI途径对促进HSCs植入,造血免疫功能重建,提高UCBT效果方面优于Ⅳ途径,多部位IBMI可能更有利于HSC归巢骨髓.     

SARS患者急性期外周血CD3+、CD4+及CD8+细胞数量的变化

目的 探讨SARS患者外周血T淋巴细胞亚群的变化及其临床意义。方法 用全自动血细胞分析仪检测44例SARS患者外周血白细胞计数及分类，用流式细胞仪检测SARS患者外周血T淋巴细胞亚群；并与正常对照组比较。结果 与对照组比较，SARS组患者白细胞总数显著下降，淋巴细胞百分数和绝对数显著下降，粒细胞绝对数显著下降，粒细胞百分数显著增加；CD3^ 、CD4^ 和CD8^ 细胞绝对数显著下降，CD3^ 、CD4^ 及CD8^ 细胞百分数和CD4^ /CD8^ 比值与对照组比较无显著性差异。结论 SARS冠状病毒感染损伤患者细胞免疫功能。     

CD158分子表达在他克莫司、霉酚酸酯联合甲基强的松龙治疗顽固性慢性移植物抗宿主病中的追踪观察

目的：探讨慢性移植物抗宿主病（graft-versus-host disease，GVHD）症状期及缓解期CD158分子的表达变化。方法： 观察异基因造血干细胞移植后发生广泛性慢性GVHD的儿童患者，应用他克莫司（FK506），霉酚酸酯（MMF）和甲基强的松龙（MP）联合治疗的毒副作用和疗效；同时采用流式细胞仪检测外周血中CD158在NK细胞和T细胞的表达，比较治疗前后CD158的表达。结果： 移植前、慢性GVHD症状期和治疗后CD4+CD158a+和CD4+CD158b+表达水平极其低下，但无明显差异。5例急性GVHD患者CD3+CD158b+和CD3+CD8+CD158b+的表达水平分别为4.97%±2.36%和4.58%±2.90%，与移植前相比差异显著(P＜0.05)，CD3-CD16+CD158b+的表达也明显高于移植前(P＜0.05)。6例慢性GVHD患者症状期，CD3+CD158b+和CD3+CD8+CD158b+的表达均高于移植前的水平(P＜0.05)；在缓解期，CD3+CD158b+、CD3+CD8+CD158b+和CD3-CD16+CD158b+的表达水平逐渐下降，与慢性GVHD症状期相比差异显著(P＜0.05)，与移植前无明显差异。移植后6-12个月CD3-CD16+CD158b+ 表达水平与移植前无明显差异。结论： CD158b分子在T细胞表达水平增加与慢性GVHD的发生有关，FK506，MMF和MP联合有效治疗慢性GVHD的作用机制之一可能是下调T细胞CD158b+的表达，从而抑制cGVHD。     

同胞供者全相合脐血移植治疗重型β地中海贫血的细胞免疫重建分析

目的:探讨同胞供者全相合脐血移植治疗重型β地中海贫血后免疫重建的特点.方法:8例同胞供者HLA全相合脐血移植成功治疗重型β地中海贫血患者,采用流式细胞仪分别在移植后1、3、6、12个月检测T细胞亚群.结果:该组患者植入证据显示均移植成功,在移植后4周内恢复造血重建;3例发生Ⅰ～Ⅱ急性移植物抗宿主病,无慢性移植物抗宿主病发生;移植后CD3+细胞1个月为(45.3±27.2)%,3个月为(66.7±10.4)%,6个月为(68.7±14.5)%,12个月为(71.7±10.2)%;移植后CD4+细胞1个月为(13.3±7.8)%,3个月为(21.8±11.6)%,6个月为(19.4±10.9)%,12个月为(30.1±10.4)%;移植后CD8+细胞1个月为(32.1±15.4)%,3个月为(30.6±10.9)%,6个月为(26.9±7.3)%,12个月为(28.1±5.6)%;移植后CD3-CD19+细胞1个月为(6.4±5.6)%,3个月为(12.7±3.4)%,6个月为(16.3±7.3)%,12个月为(16.7±5.7)%;移植后CD3-CD16+CD56+细胞1个月为(16.4±7.4)%,3个月为(15.9±7.6)%,6个月为(14.7±6.6)%,12个月为(15.6±3.4)%.结论:同胞供者HLA全相合脐血移植治疗重型β地中海贫血后1个月CD8+细胞逐渐恢复正常,移植后3个月时CD3+细胞和NK细胞逐渐恢复正常水平,移植后6个月后CD4+和CD19+细胞表达水平逐渐恢复达正常水平.     

肝再生对大鼠胎肝细胞脾内移植后增殖的影响

目的:研究肝再生状态对大鼠胎肝细胞脾内移植后增殖影响。方法:分离孕3周SD大鼠胚胎肝细胞,将其移植入70%肝切除肝再生模型大鼠脾内,分别于移植后7 d和30 d应用流式细胞仪检测肝切除大鼠残肝细胞的细胞周期,用图像分析法检测脾内移植胎肝细胞面积密度。结果:移植后7 d,肝切除鼠残肝细胞S和G₂/M期细胞比例都明显少于对照组(P＜0.05),而其脾内移植胎肝细胞面积密度则显著高于对照组(P＜0.05);30 d后,各组间残肝细胞再生状态与移植胎肝细胞的面积密度均无明显差异。 结论:肝再生状态有利于大鼠胎肝细胞脾内移植后的增殖。