新型细胞凋亡分子探针99Tcm-CP3-peptide的制备及在肺腺癌细胞系体内外的实验研究

目的 制备含天冬氨酸-谷氨酸-缬氨酸-天冬氨酸（DEVD）核心的多肽细胞凋亡分子探针99Tcm-CP3-peptide,研究其在肺腺癌细胞系A549化疗后体内外的生物学分布及SPECT显像。 方法 采用双功能螯合法合成99Tcm-CP3-peptide,分别于标记后0、1、2、4、6 h行高效液相色谱（HPLC）法检测放射性化学纯度。对经紫杉醇化疗的肺腺癌A549细胞进行体外细胞结合实验,对照组未经化疗,测量细胞内外放射性比值（Cin/Cout）,并用流式细胞仪检测细胞凋亡率。经紫杉醇化疗的荷瘤裸鼠尾静脉注射99Tcm-CP3-peptide 3.7 MBq,分别于5、15、30、60、120、240 min测其生物学分布,并行SPECT静态显像,勾画感兴趣区（ROI）,计算肿瘤/对侧正常肌肉组织的比值（T/NT）。取显像后的肿瘤组织进行苏木精-伊红染色,观察肿瘤组织的形态学变化。两组比较采用t检验,相关性研究采用双变量相关分析。 结果 99Tcm-CP3-peptide在0、1、2、4和6 h的放射化学纯度均>97%,合成率为（64.5±5.2）%。体外细胞结合实验结果表明,经紫杉醇化疗后24h,肿瘤细胞Cin/Cout为10.27±2.02,对照组Cin/Cout为1.09±0.03,化疗组为对照组的7.3倍。对同状态的肿瘤细胞行流式细胞检测,化疗组细胞凋亡率为（75.62±2.57）%,对照组细胞凋亡率为（3.42±0.32）%,化疗组和对照组Cin/Cout与流式细胞仪检测的凋亡细胞百分比呈明显正相关（r=0.970,P<0.05）。荷瘤裸鼠体内分布实验结果显示,99Tcm-CP3-peptide在血液中清除速度较快,且主要经肾脏代谢;心脏、脾脏、肺等重要器官放射性摄取值均较低;但在肝脏中摄取稍高且代谢速度较慢;肿瘤组织摄取值在注射后1 h达到峰值[（4.26±1.03）%ID/g]。荷瘤小鼠给药后1 h即可获得清晰图像,勾画ROI显示:化疗组T/NT为3.83±0.11,显著高于对照组的1.57±0.09,两者间差异有统计学意义（t=16.19, P<0.05）。病理结果显示化疗组肿瘤组织见大量核固缩、核碎裂及凋亡细胞;对照组仅见少量核固缩、核碎裂及少量凋亡细胞。 结论 99Tcm-CP3-peptide是一种靶向caspase-3的显像剂,具有较好的生物学分布,可应用于动物模型肿瘤组织凋亡显像,在监测化疗后肿瘤细胞凋亡方面有一定的临床潜在价值。      

高血压脑出血立体定向超早期与延期手术疗效比较

目的 探讨立体定向颅内血肿穿刺引流术超早期(6 h以内)手术与延期(24 h以后)手术治疗高血压性脑出血的疗效.方法 选择65例高血压性脑出血患者采用立体定向颅内血肿穿刺引流术清除血肿,根据出血量、部位和血肿形态的不同,选择相应的靶点进行手术治疗.其中超早期手术30例,延期手术35例,术后应用尿激酶血肿腔内注射引流治疗.结果 超早期手术患者死亡3例,死于再次出血,总病死率为10％;其余患者术后第3天血肿清除量达到80％的25例,患者术后6个月日常生活能力(ADL)预后评价恢复良好20例(67％).延期手术患者死亡1例,死于呼吸循环衰竭,总病死率为2.8％;其余患者术后第3天血肿清除量达到90％的30例,患者术后6个月日常生活能力(ADL)预后评价恢复良好27例(77％).结论 立体定向颅内血肿穿刺引流延迟手术安全、有效,对患者的预后良好,再次出血率明显降低.     

成人原发性肾病综合征中Th17/Treg免疫平衡及泼尼松对其影响的研究

目的研究成人原发性肾病综合征(primary nephrotic syndrome,PNS)患者外周血辅助性T细胞17(Th17)和调节性T细胞(Treg)的变化,探讨Th17/Treg免疫平衡在成人PNS发病中的作用以及泼尼松治疗成人PNS过程中对Th17/Treg免疫平衡的影响。方法选取初次就诊,经泼尼松治疗有效的患者65例,以年龄、性别匹配的25名健康体检者做为正常对照组,使用流式细胞术检测正常对照组和泼尼松治疗前、后患者外周血Th17细胞和Treg细胞比例,使用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测血清白细胞介素(interleukin,IL)-17和IL-10的水平,使用全自动生化分析仪检测24 h尿蛋白定量,分析Th17与其相关因子IL-17的相关性以及Treg与其相关因子IL-10的相关性,分析Th17/Treg比值与24 h尿蛋白定量的相关性。结果 PNS患者外周血Th17细胞比例为(2.44%±0.58%),较正常对照组的(0.93%±0.41%)明显升高,而PNS患者Treg细胞比例为(2.28%±0.63%),较正常对照组的(3.83%±1.06%)明显降低。经泼尼松治疗后,患者外周血Thl7细胞比例为(1.02%±0.51%),较治疗前明显降低,而Treg细胞比例为(3.69%±0.82%),较治疗前明显升高,差异均具有统计学意义(P0.05)。外周血Th17、Treg与相关细胞因子IL-17、IL-10的变化与两类细胞的变化一致。Th17/Treg细胞比值与24 h尿蛋白定量呈显著正相关(r=0.826,P0.01)。结论 Th17/Treg免疫失衡与成人PNS发生密切相关,泼尼松可能通过调节Th17/Treg免疫平衡影响成人PNS的发展,检测外周血Th17/Treg细胞比值的变化可做为成人PNS的辅助诊断指标以及泼尼松治疗成人PNS疗效评价指标。     

莪术种质资源的RAPD-PCR分析

目的探讨不同品种莪术的亲缘关系和遗传多样性,对其进行分子标记鉴定。方法采用RAPD-PCR标记方法研究来源于不同地域的4个种42个样本的莪术种质资源。采用POPGEN32分析其遗传相似系数和遗传距离,UPGMA方法聚类。结果 90个随机引物中筛选出10个引物,共扩增出83个位点,其中多样性位点64个,占77.5%,遗传距离变化范围0.22~0.58,获得清晰的RAPD-PCR图谱,建立了不同种莪术亲缘关系的树状结构图。结论莪术群体中存在较丰富的遗传多样性,具有明显的遗传分化,这些遗传分化是莪术种质资源筛选的关键,是莪术高效育种和生物技术开发的基础。     

儿童Kearns-Sayre综合征8例临床分析

目的 分析儿童Kearns-Sayre综合征（KSS）的临床特点及诊断方法。方法 对8例临床诊断为KSS患儿的临床症状体征、头颅影像学特点、实验室检查、常见线粒体基因（mtDNA）点突变筛查、肌肉病理和随访等资料进行回顾性分析。结果 男6例,女2例;发病年龄5岁3个月至13岁1个月,平均9岁5个月;病程1个月至3年,平均1年6个月。8例就诊时均出现眼睑下垂,5例以眼睑下垂为首发症状,双眼同时发病4例;2例以共济失调为首发,1例以智力倒退为首发,这3例在发病后1个月至2年半均出现双眼睑下垂。2例合并糖尿病,1例既往患Person综合征。8例均有眼球活动受限和身材矮小体征,身高和体重均在正常同龄儿的P10以下;6例眼底检查发现视网膜色素变性,1例入院时无视网膜色素变性,5年随访时出现视网膜色素变性。8例均未见视神经萎缩。小脑共济失调6例。心脏传导阻滞5例,其中3例入院时即发现完全或不完全右束支传导阻滞,分别于1年7个月至4年后发展为Ⅲ度房室传导阻滞,随访均死亡;2例入院时ECG未见传导阻滞,随访4～5年时出现Ⅰ度房室传导阻滞。6例CSF蛋白均＞1 000 mg·L-1。7例行尿有机酸分析,其中4例正常,3例提示酮尿症。常见mtDNA的A3243G、A8344G、T8993G、T8993C、A1555G、G11778A点突变筛查,均未发现突变。8例均行头颅MRI检查,均表现为双侧对称性白质长T1长T2信号,Flair像高信号,以额、顶叶皮质下白质及小脑白质为主,2例累及胼胝体压部,1例内囊后肢受累;6例脑干受累,以中脑和桥脑背盖部为主,丘脑和基底节区受累分别为4例和3例。肌肉病理6例组织化学检查可见破碎红肌纤维,8例电镜下均观察到肌膜下线粒体堆积和形态异常的线粒体。1例应用Southern印迹方法发现肌肉组织中存在大片段mtDNA缺失约6 kb。6例随访2~5年,其中3例死亡,3例病情进行性加重。结论 儿童KSS罕见,双眼睑下垂、眼肌麻痹、视网膜色素变性、小脑共济失调和心脏传导阻滞为主要表现。根据临床及肌肉活检可进行临床诊断,肌肉样本中发现mtDNA大片段缺失可确诊。     

伊曲康唑间歇冲击疗法治疗甲真菌病临床疗效观察

我们于1996年6月-1997年5月用西安杨森公司生产的伊曲康唑间歇冲击疗法治疗甲真菌病50余例，现将资料完整的48例患者疗效报告如下。一般资料：48例甲真菌病中女33例，男15例，最小15岁，最大65岁。病程不足1年8例，1-3年34例，4-5年3例，6年以上3例。病程最短3个月，最长20年。手受累甲140个，足受累甲引个。最少为1个病甲，最多为18个病甲。临床分型：远端侧位甲癣（DInO）21例，近端甲下甲癣（PSO）5例，全营养不良性甲癣（TDO）18例，白色浅表性甲癣（SWO）4例。同时患手甲和足甲癣10例，并发手足癣18例。另外伴发股癣5例。全部病例…     

熏蒸疗法配合抗生素治疗盆腔炎95例

目的:观察中药熏蒸疗法联合抗生素治疗急、慢性盆腔炎、盆腔炎性包块疗效。方法:以我院在2010年6月~2012年12月期间收治的190例已确诊的患者,其中80例为急性盆腔炎,60例为慢性盆腔炎,50例为盆腔炎性包块,将每组患者均随机分为治疗组和对照组两组。对照组:给予单纯西医治疗,注射头孢类抗生素+甲硝唑或替硝唑,如对头孢类抗生素过敏者,可根据情况选择左氧氟沙星+甲硝唑或替硝唑治疗。治疗组在对照组基础上给予中药熏蒸治疗。结果:中药熏蒸疗法治疗患者急、慢性盆腔炎、盆腔炎性包块的治愈率、总有效率治疗组明显高于对照组。结论:中药熏蒸疗法联合抗生素治疗急、慢性盆腔炎、盆腔炎性包块疗效显著,是治疗急、慢性盆腔炎,盆腔炎性包块较为理想的方法。     

发作期SPECT脑血流灌注显像和VEEG在癫痫灶定位诊断中的一致性

目的 探讨癫痫发作期SPECT脑血流灌注显像和视频脑电图（VEEG）在致痫灶定位中的一致性.方法 选择VEEG监测异常的癫痫患者45例,当患者出现临床发作和（或）脑电图出现典型癫痫波时30 s内注入锝-双半胱乙酯（^99Tc^m-ECD）,30 min后行脑血流灌注断层显像.比较癫痫发作期SPECT脑血流灌注显像和VEEG在癫痫定位诊断中的一致性,对部分性发作和全面性-强直阵挛发作患者发作期SPECT和VEEG定位的一致性进行卡方检验.结果 45例癫痫患者中,发作期SPECT定位阳性率为93.3％（42/45）,均表现为高血流灌注灶,其中40例（95.2％）表现为单叶局限性高灌注,2例（4.8％）表现为多个病灶高灌注.VEEG监测结果为：31例患者VEEG表现为局灶性异常放电,明确定位达68.9％（31/45）,各导联同步对称性异常放电不能定位者占所有患者的31.1％（14/45）.比较二者定位结果发现,对于部分性发作的患者,发作期SPECT和VEEG定位的一致性为83.9％（26/31）;对于全面性-强直阵挛发作的患者,VEEG表现为各导联同步对称性异常放电,而发作期SPECT则显示为孤立高血流灌注灶,故二者定位无一致性.部分性发作和全面性-强直阵挛发作患者发作期SPECT和VEEG定位的一致性差异有统计学意义（χ^2=24.478,P＜0.05）.结论 发作期SPECT脑血流灌注显像和VEEG在癫痫灶定位诊断中的一致性与癫痫发作类型相关.对于部分性发作的癫痫患者二者联合定位可指导手术治疗;而对于全面性-强直阵挛发作患者,发作期SPECT脑血流灌注显像和VEEG联合定位无一致性,需借助于其他检查方法方可明确定位.     

1例因尿管夹闭时间过长导致大量血尿继发菌尿患者的护理

对于长期留置尿管的患者,每天进行膀胱冲洗是预防和控制感染、保持尿管通畅、减少尿液沉渣和预防尿路结石形成的一种重要措施,但护理不当会发生意外。本科室1名轮科护士为患者进行膀胱冲洗后,因忙于其他工作,致使尿管关闭时间过长,冲洗液没有及时放出,加上尿液逐渐增多,造成膀胱过度膨胀,导致膀胱黏膜受损和毛细血