外泌体在肝癌中作用的研究进展

 外泌体(exosome)是一种具有脂质双分子层膜结构的微小囊泡,直径为30～100 nm,几乎可由所有细胞分泌,含有细胞特异的蛋白质、脂质和核酸等物质,能把信号分子传递给靶细胞从而改变其生物学功能。目前对于外泌体在肝癌中作用的研究引起了广泛关注。由于外泌体的内容物可以反映其来源细胞的特性,从而区分正常组织和病变组织,并在人体内广泛存在且获取便捷,故有望成为肝癌检测、诊断和治疗的生物标志物。本文对外泌体miRNA在肝癌发展过程中潜在的生物学效应及外泌体在肝癌中的相关作用作一综述。     

干扰SULT2B1对Hepa1-6肝癌细胞凋亡的影响及机制研究

目的研究羟基类固醇硫酸基转移酶SULT2B1对小鼠Hepa1-6肝癌细胞凋亡的影响及作用机制。方法SULT2B1慢病毒干扰载体感染Hepa1-6细胞(MOI=100),Real-time PCR检测其干扰效果。采用流式细胞仪通过Annexin V-APC/7-ADD染色检测干扰SULT2B1后Hepa1-6细胞凋亡率的改变,Western blot检测FAS和p-JNK的蛋白表达水平。结果构建的SULT2B1干扰载体可显著抑制Hepa1-6细胞中SULT2B1的表达(P<0.05)。Hepa1-6细胞中干扰SULT2B1后其凋亡率较对照组相比显著增加(P<0.05),干扰SULT2B1后可显著增加FAS和p-JNK的蛋白表达水平(P<0.05)。结论干扰SULT2B1可促进Hepa1-6细胞的凋亡,其作用主要与增加FAS和p-JNK的蛋白表达水平有关。     

小鼠可移植性淋巴细胞性白血病,L783 Ⅱ.白血病组织的电子显微镜观察及其无细胞提取液的致白血病活性

小鼠L783白血病是一株可移植性淋巴细胞性白血病,它起源于小鼠L6565病毒性白血病,后者的细胞内、外已证明含有C型病毒颗粒。为了探讨病毒学方面的联系,对L783白血病组织进行电子显微镜(下称电镜)观察及其无细胞提取液的致白血病活性的研究。     

反义c—fox寡脱氧核苷酸对淋巴瘤细胞株SCA—ⅡB2恶性表型…

已发现ＳＡＣ－ⅡＢ２淋巴瘤细胞中中原癌基因ｃ－ｆｏｓ呈过度表达，针对小鼠ｃ－ｆｏｓｃＤＮＡ第２－７编码序列，设计合成了１８聚反义，正义和无义的寡脱氧核苷酸。结果发现，反义ｃ－ｆｏｓ寡脱氧核苷酸能促使ＳＣＡⅡＢ２的细胞形态向成熟阶段分化并抑制共增殖速度，同时降低其对裸鼠的致瘤性及Ｆｏｓ蛋白的表达，但对ＳＣＡ－ⅡＢ２的细胞动力学没有明显的影响。     

小鼠SRS实体瘤的生物学、病理学和电子显微镜观察

1971年,本室在昆明种小鼠建立了SRS淋巴细胞腹水型瘤株,对其生物学特性和超微结构及其提取液的致白血病活性进行了研究。SRS腹水瘤细胞注射小鼠皮下可以产生实体肿瘤,移植发生率可达100％,对多种抗癌药物较敏感,可用于实验肿瘤研究和药物筛选。现将SRS实体瘤的生物学、病理学和电镜观察结果报道如下。     

肥大细胞类胰蛋白酶促进人乳腺癌细胞系MDA-MB-435的跨膜侵袭

 目的 研究类胰蛋白酶对人乳腺癌细胞系MDA-MB-435侵袭力的影响及其机制。方法 通过体外细胞侵袭力试验观察不同浓度、不同时间类胰蛋白酶对乳腺癌MDA-MB-435细胞跨膜侵袭力的影响，并利用RT-PCR以及明胶酶谱法研究类胰蛋白酶对基质金属蛋白酶-2（matrix metalloproteinase-2，MMP-2）和金属蛋白酶组织抑制物（tissue inhibitor of metalloproteinases-2，TIMP-2）表达水平的调节。结果 150～500pmol/L的类胰蛋白酶可以促进MDA-MB-435细胞的跨膜侵袭；还可以促进MMP-2、TIMP-2的mRNA表达（P<0.01）和MMP-2的蛋白表达（P<0.05）。 结论 类胰蛋白酶可以促进人乳腺癌细胞系MDA-MB-435细胞的跨膜侵袭，该作用可能与增加MMP-2的mRNA和蛋白表达、TIMP-2的mRNA表达相关。     

重组人尿激酶原病毒安全性研究

目的:对经过提纯及病毒灭活处理后的重组人尿激酶原(rhpro-UK)进行病毒安全性实验研究。方法:将SRSV/3T3细胞以及本产品Sp2/0基因工程细胞培养上清液感染NIH/3T3细胞分别作阳性对照组1和2,将不同浓度的rhpro-UK原液感染NIH/3T3细胞为实验组。各组细胞盲传3代,分别进行XC细胞合胞形成实验和透射电子显微镜观察病毒颗粒。结果:rhpro-UK原液的高、中、低3个浓度组(1,0．15,0．03mg·mL~(-1))均未见到合胞体形成,透射电子显微镜下均未观察到病毒颗粒,与2个阳性对照组比较有显著性差异(P＜0．01)。结论:重组人尿激酶原(rhpro-UK)原液中不含有逆转录病毒。     

L6565小鼠白血病癌基因表达的初步研究

本文应用免疫组织化学方法检测我室建立的Ｌ６５６５淋巴细胞细胞白血病小鼠的肝、脾、淋巴结、胸腺等组织的癌基因和癌蛋白及分化标记。发现上述组织中对ｃ－ｍｙｃ、ｃ－ｆｏｓ癌基因都呈较强的表达，尤其以脾和肝表达最强，对ｃ－ｊｕｎ，ｒａｓ－ＰＳＡ和ｃ－ｅｒｂＢ－２则弱阳性表达，而对Ｐ５３和ｂｃｌ－２则不表达，同时还对它们的分化表记进行了检测，提示其可能还是处于干细胞水平。     

大鼠心肌微血管内皮细胞的培养及基因芯片分析的研究

目的：用血管内皮细胞生物学功能基因芯片研究培养的大鼠心肌微血管内皮细胞特征。 方法： 用植块法培养大鼠心肌微血管内皮细胞，利用倒置显微镜、扫描电子显微镜和透射电子显微镜观察培养细胞的形态学特征；利用免疫细胞化学方法显示血管内皮细胞特异性表面标志；用细胞计数方法绘制细胞生长曲线；用血管内皮细胞生物学功能基因芯片研究细胞基因表达谱，并比较原代细胞和传代细胞基因表达的变化。 结果： 利用植块法培养的大鼠心肌微血管内皮细胞具备多种典型微血管内皮细胞（MVEC）特征：细胞呈多边形或梭形并呈铺路石样生长；存在管腔样结构（TLS）和毛细血管网络，细胞表面有丰富的微绒毛； CD34、CD31、CD105 、vW因子和Tie-2阳性；多种与正常血管功能密切相关的基因不同程度表达，前2代细胞特征稳定。 结论： 用植块法培养的大鼠心肌微血管内皮细胞，具备微血管内皮细胞的特征，原代和第2代培养细胞特征稳定，可用于心血管疾病的基础与临床研究。