反义端粒酶RNA对SMMC7721细胞P16、P21表达的增强作用

目的 观察反义端粒酶RNA对SMMC7721细胞周期的影响,检测P16和P21的表达,探讨端粒酶与细胞期调控间的关系及反义端粒酶RNA在肝癌基因治疗中的意义。方法 经脂质体介导,将反义端粒RNA真核表达载体pBBS212－hTR导入SMMC7721细胞中。细胞克隆转移扩大培养后,采用流式细胞仪、TRAP－PCR－ELISA及免疫组化技术,结合图像分析,在检测SMMC7721／pBBS212－hTR细胞端粒酶活性的同时,检测P16和P21的表达。结果 与对照组相比较,反义端粒酶RNA在抑制SMMC7721／pBBS212－hTR细胞端粒酶活性的同时,检测P16和P21的表达。结果 与对照组相比较,反义端粒酶RNA在抑制SMMC7721细胞端粒酶活性的同时,P16和P21蛋白的表达水平显著增高。结论 转染反义端粒酶RNA在封闭细胞端粒活性表达的同时,伴发P21与P16表达水平的升高。本实验研究为探讨肝癌发病机制及治疗提供了一定的依据。     

凋亡相关基因在烧伤增生性瘢痕中的表达水平和组织学分布特征

目的探讨凋亡相关基因Bcl-2和Bax在增生性瘢痕(HS)中的表达水平和分布特征及其与瘢痕增生和退化关系.方法检测HS中Bcl-2和Bax的表达.结果正常皮肤不表达Bcl-2,在HS中Bcl-2和Bax的阳性率为100%.浅层Bcl-2阳性细胞率高达64%～78%,显著高于其他时间点标本和同一标本的中层和深层(P<0.01),仅成纤维细胞表达阳性;Bax在瘢痕增生的全过程和各层组织均有较高的阳性细胞率(52%～69%)和广泛的细胞分布,显著高于正常皮肤(P<0.01).结论深度烧伤创面愈合后,浅层成纤维细胞过度表达Bcl-2可能与创伤修复失控和HS形成有关,而广泛的Bax蛋白的过度表达可能具有抵抗Bcl-2活性作用,加速细胞的生理性凋亡和瘢痕成熟.     

小鼠胚胎耳蜗Corti器扫描电镜标本的制备

哺乳类耳蜗毛细胞是否存在再生，是目前国内外研究的热点和难点。国外有学者提出哺乳类胚胎后毛细胞再生是可能的。而研究胚胎耳蜗毛细胞再生的表面形态学，首先遇到的困难就是如何显示Corti器的结构，长期以来由于技术和方法的原因，使这方面的研究受到限制。本文采用低温恒冷切片定位法显露Corti器结构后制备耳蜗扫描电镜标本，取得了满意的观察效果。现报告如下。1材料和方法选用昆明系孕小鼠6只（以出现阴柱作为妊娠第1d的标志），分为胚胎17d、20d两组，每组3只，在相应的时间点，用0．5％戊巴比妥钢腹腔注射麻醉后，剖腹迅速取出小鼠…     

抑癌基因PTEN在乳腺癌中的表达及意义

目的　研究一种新的抑癌基因PTEN在乳腺癌中的表达及意义。方法　应用免疫组织化学SP法 ,检测了 2 8例乳腺癌及2 1例癌旁乳腺组织PTEN蛋白的表达 ;EnVision法检测癌组织中雌、孕激素受体的表达。结果　 2 1例癌旁乳腺组织中均有PTEN蛋白的表达 ,免疫组化染色较强 ,阳性物质位于乳腺小叶腺泡上皮细胞及导管上皮细胞的胞质和胞核。在乳腺癌组织中PTEN蛋白表达于癌细胞的胞质和胞核 ,2 8例乳腺癌组织中PTEN蛋白的表达不同。 14 .2 8%乳腺癌组织无PTEN蛋白的表达 ;2 1.4 %乳腺癌组织PTEN蛋白呈弱阳性 ;6 4 .2 8%乳腺癌组织中有较强的PTEN蛋白表达 ,表达强度与正常乳腺组织无明显差异。此外 ,PTEN蛋白的表达与乳腺癌的临床病理学特点相关 ,PTEN蛋白阴性的乳腺癌 ,2 5 %为雌、孕激素受体阳性 ;而PTEN蛋白表达较强的乳腺癌 ,6 6 .6 7%为雌、孕激素受体阳性 ,且差异有显著性 (P <0 .0 5 )。另外 ,PTEN蛋白阳性的乳腺癌组织 ,腋窝淋巴结转移率为 2 2 .2 % ;而PTEN蛋白阴性的乳腺癌腋窝淋巴结转移率为 75 % ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　乳腺癌组织中存在着抑癌基因PTEN的表达缺失和减弱 ,抑癌基因PTEN的表达异常可能与乳腺癌的发生、发展及预后有关。     

聚丙烯酰胺水凝胶注入兔体后组织病理学与免疫组化的动态观察

目的动态观察聚丙烯酰胺水凝胶(奥美定)注入兔体后,对组织细胞形态学及Bcl-2、P53、HsP70、PCNA表达的影响。方法将24只新西兰白色家兔分为三组,注入奥美定5ml/kg的10只为Ⅰ组,注入奥美定10ml/kg的11只为Ⅱ组,未注入任何材料的3只为对照组,在相同的饲养条件下,分别于注入3、6、14个月时处死白色家兔,即刻切取标本切片,经10%甲醛固定后,石蜡包埋,HE及免疫组化染色观察。结果24只新西兰白色家兔中有6只兔(注入奥美定的4只,对照组的2只),分别观察到支气管肺炎、支气管黏膜鳞状上皮化生、肝点状坏死、间质性心肌炎等病理改变;其余18只兔均无明显改变。免疫组化Bcl-2、p53均为阴性,Hsp70、PCNA仅在极少数的肝、肾小管上皮细胞有阳性表达。结论奥美定注入兔体后动态观察3、6、14个月时处死,经病理形态学及免疫组化检测表明是安全的。     

CDKN2(P 16/MTS 1)在大肠癌表达与发病及预后的关系

目的CDKN     

乳腺肿瘤VEGF表达的免疫组化研究

0　引言　实体肿瘤的生长及转移很大程度上依赖于持续的、不可控制的血管生成 .肿瘤的血管生成赖于多种相关因子的诱导和调节 ,而生长因子是重要的始动因素 ,VEGF是近年发现的血管生成调节因子 ,可以特异性作用于 EC,促使血管形成 .我们旨在观察 VEGF在不同乳腺组织中的表达 ,以明确VEGF表达与肿瘤血管生成的关系 ,进一步探讨 VEGF在乳腺肿瘤生长中的作用 .1　材料和方法1.1　材料　 1998/ 1999乳腺纤维腺瘤标本 2 0例 ,乳腺癌标本40例 ,其中 2 3例伴有区域淋巴结转移 ,正常乳腺组织 6例取自我院手术患者 .所有标本常规福尔马林固定…     

含有Ⅰ、Ⅳ型胶原的静脉管腔对周围神经缺损修复作用的影响

目的 为弄清楚含不同类型胶原的静脉管腔在修复周围神经缺损中的作用。方法 将Ⅰ，Ⅳ型胶原注入静脉管腔内用于桥接兔腓总神经１．５ｃｍ长缺损，以生理盐水作为对照组。术后１６周进行电生理、组织形态学和有髓纤维计数等项检查。     

人外周血内皮祖细胞的培养与鉴定

目的:探讨人外周血内皮祖细胞体外诱导分化及鉴定的方法,为自体外周血内皮祖细胞移植的临床应用打基础。方法:实验于2004-09/2005-05在解放军第四军医大学西京医院肝胆外科实验室完成。采集献血员抗凝外周血,经Ficoll密度梯度离心法获取单个核细胞,在含有体积分数为0.1胎牛血清、20μg/L的血管内皮细胞生长因子和4μg/L的碱性成纤维细胞生长因子的M199培养液中培养和扩增,分别在培养的第6和14天,流式细胞仪检测其KDR,CD133,CD34和vWF阳性率,并通过检测其对异硫氰酸荧光素标记的荆豆凝集素的吸附和内吞DiI-acLDL来进行细胞功能学的鉴定。结果:①人外周血单个核细胞经体外诱导分化,培养第6天的贴壁细胞表达KDR,CD133,CD34和vWF,流式细胞仪检测其阳性率分别为(46.4±9.3)%、(33.8±11.7)%、(73.5±6.3)%和(38.9±8.2)%,能特异性吸附异硫氰酸荧光素标记的荆豆凝集素并内吞DiI-acLDL。②培养第14天的贴壁细胞表达KDR,CD34和vWF,不表达CD133,流式细胞仪检测其阳性率分别为(81.5±7.6)%、(88.9±5.4)%和(78.3±13.6)%,能特异性吸附异硫氰酸荧光素标记的荆豆凝集素并内吞DiI-acLDL。结论:外周血来源的单个核细胞在一定的培养条件下可以分化为内皮祖细胞,为自体外周血内皮祖细胞移植的临床应用打下基础。