华细辛和北细辛HPLC特征图谱识别与抗炎靶点及抗炎成分分析

建立华细辛和北细辛HPLC特征图谱并结合聚类分析研究2种来源细辛的识别方法;应用网络药理学方法预测细辛潜在抗炎靶点并寻找潜在抗炎成分。对89批细辛药材(12批华细辛和77批北细辛)的数据进行分析确定了11个特征峰,用对照品、紫外光谱和LC-MS指认了11个特征成分。特征峰面积聚类分析显示华细辛和北细辛被分为2类,且利用特征峰面积比值可实现两者区分,当特征峰9(细辛素)/参照峰S(卡枯醇)峰面积比值大于5时为华细辛,小于2时为北细辛。对119种细辛成分进行网络药理学分析的结果表明细辛抗炎作用可能与COX-2,COX-1,iNOS,MAPK14,LAT4H,NR3C1,PPARG和TNF等8个靶点相关,其中COX-2最为关键,与5种特征成分细辛脂素、芝麻脂素、细辛素、甲基丁香酚和黄樟醚均存在相互作用。此外,细辛脂素、芝麻脂素与iNOS,MAPK14也存在相互作用关系,黄樟醚和细辛素可作用于iNOS,COX-1,LAT4H,甲基丁香酚可作用于COX-1,LAT4H。细辛脂素与芝麻脂素均可作用在COX-2,iNOS和MAPK143个靶点上,提示它们是细辛发挥抗炎作用的活性成分;COX-2分子对接结果和COX-2活性实验结果验证了细辛脂素、芝麻脂素可抑制COX-2活性,为细辛抗炎作用活性成分。基于HPLC特征图谱的华细辛和北细辛识别方法简便易行;预测到的细辛抗炎靶点和抗炎成分为完善细辛质量评价体系奠定了基础。     

细辛非挥发性提取物抗炎镇痛作用研究

目的:考察细辛不同煎煮时间的水煎液及不同浓度乙醇提取物是否具有抗炎及镇痛作用,并初步探讨细辛的抗炎镇痛作用机制.方法:采用ICR小鼠,以小鼠耳肿胀法对北细辛(根和根茎)水煎液(提取挥发油后水煎液和临床常用水煎液)和乙醇提取物(95%乙醇提取物和50%乙醇提取物)进行抗炎作用的评价;以热板法对北细辛水煎液进行镇痛作用的评价;并以去肾上腺试验和纳洛酮阻断试验,探讨细辛水煎液的抗炎镇痛机制.结果:二甲苯小鼠耳肿胀试验中,北细辛2种水煎液明显减轻炎症肿胀度,高剂量时抑制率分别为43.20%,和63.69%,而对二甲苯所致去肾上腺小鼠耳肿胀无抑制作用;北细辛95%乙醇提取物和50%乙醇提取物均能抑制小鼠耳肿胀,高剂量时抑制率分别为61.86%和52.56%.在热板试验中,北细辛2种水煎液高、低剂量均使痛反应潜伏期明显延长,镇痛作用在2.0 h达高峰;2.0 h各组痛阈提高率分别为51.27%,62.78%,60.08%和68.00%;经纳洛酮预处理后潜伏期明显缩短,北细辛水煎液未显示镇痛作用.结论:北细辛水煎液有明显的抗炎和镇痛作用.临床常用水煎液的抗炎镇痛作用强于提取挥发油后的水煎液.北细辛乙醇提取物具有显著的抗炎作用,95%乙醇提取物抗炎作用与50%乙醇提取物相当.北细辛水煎液抗炎作用有肾上腺的参与,镇痛作用与阿片受体有关.     

细辛油的抗炎作用

腹腔注射细辛油0.24 ml/kg对角叉菜胶引起的大鼠足肿胀有抑制作用。此作用在切除肾上腺的大鼠亦能看到。细辛油能降低炎症组织及其渗出液中组胺含量,对组胺或PGE₂引起的大鼠足肿胀有抑制作用,并能对抗组胺或PGE₂引起的毛细血管通透性增加,本品能抑制大鼠胸腔因注射角叉菜胶后引起的白细胞游走;对大鼠棉球肉芽肿有抑制作用,并使胸腺萎缩,还降低正常大鼠肾上腺内维生素C含量。     

山茨菇挥发油化学成分气相色谱-质谱联用分析

目的：分析山茨菇挥发油的化学成分。方法：用气相色谱-质谱联用法（GC-MS）分析。结果：山茨菇挥发油的化学成分，共鉴定了40个组分，其中芒樟醇、异石竹烯、β-金合欢烯、橙花叔醇、细辛醚、肉桂酸酯类等为其挥发油主要成分。结论：该结果可供临床研究参考。     

从经方的配伍应用探讨细辛宣营之功

[目的]阐发细辛宣营功效在经方配伍中的体现。[方法]追思传承,运用文献分析的方法,搜集整理《神农本草经》和《名医别录》等中医药经典对细辛的阐述,通过分析张仲景在《伤寒论》及《金匮要略》中运用细辛的情况,选用以当归四逆汤为代表的经典方剂,从经方的配伍应用中探讨细辛宣营的特点。[结果]在以历代医家对细辛的认知基础上,仲景在经方的配伍应用中对细辛宣营之功的运用分为四方面:第一,细辛可宣营而散寒解表,如当归四逆汤;第二,细辛可宣营而温化水饮,如苓甘五味姜辛汤;第三,细辛可宣营而通阳行痹,如三黄汤;第四,细辛可宣营而和血安胎,如白术散。[结论]细辛在经方的配伍应用中宣营之功体现为四方面,即散寒解表、温化水饮、通阳行痹、和血安胎,虽为辛热之品,只要合理搭配,即可宣营且不伤阴。     

细辛多糖对流感病毒H1N1型感染的保护作用及对炎症因子表达水平的影响

提取细辛多糖,分析其组成,研究其体外抗H1N1流感病毒活性及对肾阳虚外感证小鼠的干预作用。水提醇沉法制备细辛多糖,测定多糖含量并分析其单糖组成。体外采用细胞实时监测系统及Reed-Muench法评价其抗病毒活性。体内建立肾阳虚外感小鼠模型,比较麻黄细辛附子汤(以下简称"MXF组")和细辛多糖的药效。MXF组和细辛多糖组分别以1.8 g·kg^-1·d^-1和0.077 g·kg^-1·d^-1的临床等效剂量进行给药干预,每日1次,连续6 d。Real-time PCR法检测肺组织中H1N1流感病毒M基因及多个细胞因子的相对表达量。细辛中细辛多糖的质量分数为25.22%,多糖中蛋白质量分数为0.8%,其单糖组成为L-鼠李糖、D-阿拉伯糖、D-木糖、D-葡萄糖、D-半乳糖、D-甘露糖。达菲、MXF和细辛多糖的治疗指数(TI)分别为30.00,8.06,10.33。细辛多糖3个给药浓度均可显著降低上清液中病毒含量(P<0.05)。与模型组相比,MXF组、细辛多糖组小鼠的肺指数显著降低(P<0.05),H1N1流感病毒的M基因相对表达量显著降低(P<0.05)。IL-10和IFN-γ的基因相对表达量出现不同程度上调,IL-1β,IL-6,MCP-1的基因相对表达量均出现不同程度的下调,细辛多糖可显著增强TNF-α的表达(P<0.01)。细辛多糖具有较好的体外抗流感病毒活性,并可通过降低肺组织中病毒载量及减轻肺组织的炎症损伤、调节炎症细胞因子表达起到对肾阳虚外感证小鼠的保护作用。相较于全方,细辛多糖有较好的抗病毒活性。     

不同产地北细辛的种质特征

目的比较不同产地北细辛的种质特征。方法根据《中华人民共和国国家标准-农作物种子检验规程》和自建的马兜铃酸A检测方法,对8个产地的北细辛种子进行了水分、生活力、千粒质量、发芽率和马兜铃酸A含量的测定,并用SPSS13.0软件对检测结果进行聚类分析。结果各产地的种子总体上粒大饱满,活力较好,但水分都比较高,且都含有马兜铃酸A。结论清原县北三家乡和本溪谢家所产的北细辛种子从总体上来看,水分和马兜铃酸A的含量较低,生活力等其他指标较高,质量相对比较好。     

细辛与维拉帕米镇痛协同作用的实验研究

目的研究细辛与维拉帕米的镇痛协同作用,为临床联合用药提供理论依据。方法采用小鼠醋酸扭体实验及热板法致痛实验观测实验药物镇痛作用,并用神经盒、多媒体MS-302系统观察其对蟾蜍坐骨神经动作电位的影响。结果细辛及A-V复方制剂对醋酸致小鼠腹痛、热板法致小鼠足痛均有明显的镇痛作用并能抑制蟾蜍坐骨神经动作电位的传导。维拉帕米有弱的镇痛作用,无坐骨神经动作电位阻滞作用。A-V复方制剂的镇痛及抑制神经动作电位传导作用均大于其组分细辛和维拉帕米。结论细辛和维拉帕米有镇痛协同作用。     

中药细辛商品药材的基源研究

从中国28省市收集到细辛商品药材158份,发现其中仅3/4来源于中国药典品种,其余1/4来源于非中国药典品种。11l份来源于北细辛,在26省市使用;25份来源于单叶细辛,在10省区使用;另22份来源于华细辛、杜衡等9种植物。     

北细辛、华细辛驯化栽培技术要点

目的：驯化栽培北细辛、华细辛。方法：原山坡地环境下集中播种或移栽。结果：保持了药材质量、增加产量。结论：野生细辛可栽培驯化以增加产量。