凉血通瘀方干预高血压大鼠急性脑出血模型对脑组织中差异miRNA表达的影响＊

目的 研究凉血通瘀方对高血压大鼠急性脑出血模型脑组织miRNA表达的影响，对差异表达的miRNA靶基因进行分析，探索凉血通瘀方可能的药效机制。方法 将自发性高血压大鼠随机分成对照组（B）和实验组（C）。适应性饲养一周后，C组灌胃凉血通瘀方，B组灌胃等体积生理盐水，连续5天，每天1次。构建脑出血模型后收集脑组织，借助全转录组测序技术获得miRNA表达量，与miRBase数据库比对获取已知miRNA，使用miRDeep2预测新miRNA。差异分析软件为DESeq2，筛选阈值为|log₂FC| ≥1 并且P <0.05。对显著差异表达的miRNA进行靶基因预测，对靶基因进行GO功能、KEGG通路富集和PPI网络分析。结果 实验组和对照组对比，共发现21个显著差异表达的miRNA，上调有9个，下调有12个，共预测得到1243个有统计学意义的靶基因。GO富集分析发现，生物过程中突触囊泡分泌的调节、神经递质分泌的调节和神经递质运输的调节占前三位，神经元投射终点、全膜、质膜区域和细胞投射则是主要的细胞成分。分子功能分别为小GTPase绑定、底物特异性跨膜转运蛋白活性和离子跨膜转运体活性。通路分析结果显示，靶基因在癌证通路、pI3K-Akt信号通路、人类乳头瘤病毒感染、神经活性配体-受体相互作用和MAPK通路等分布广泛。采用STRING网站和Cytoscape软件，根据MCC算法筛选出ADRA2C、CASR、CCL28、CCR1、DRD2、GNAT3、GRM2、DYNC1LI1、GABBR1、GNAI1等核心靶基因。结论 凉血通瘀方对脑出血急性期鼠脑组织内miRNA的表达有重要影响；显著差异表达miRNAs可能通过靶向核心基因调控凉血通瘀方干预急性脑出血的病理过程及预后。     

输尿管切缘冰冻切片分析在根治性膀胱切除术中的应用

肿瘤上尿路复发是根治性膀胱切除术的术后晚期并发症之一。术中冰冻切片分析(FSA)长期以来用于识别输尿管切缘是否存在肿瘤侵犯,并指导术中进行适当的远端输尿管切除,降低术后上尿路复发的风险,但术中输尿管切缘FSA的应用具有较大的争议。本文结合相关研究结果,分析了输尿管切缘FSA的主要争议和应用价值。     

实验动物标准颞骨切片规范

颞骨切片技术是观察和评估实验性内耳病理学改变的重要手段。由于内耳复杂的迷宫式立体结构,从不同方向和角度获取的颞骨切片很难进行相互间的组织病理学比较。因此,统一颞骨标准切片技术规范,对于评判内耳听觉感受器和前庭各个平衡感受器以及耳蜗和前庭周边神经元的病变部位和病变程度十分重要,因为只有统一了规范的颞骨样品制备和切片角度,才有可能对实验性内耳病变做出正确的比较和评判。颞骨切片的标准方向是将切片平面平行于外耳道和内听道的水平面,从上鼓室向下鼓室方向依次收集到的需要进行重点评估的切片层次分别为上半规管壶腹嵴和外半规管壶腹嵴、椭圆囊斑和球囊斑及前庭上神经元、球囊斑和前庭下神经元、耳蜗中轴、内淋巴管及内淋巴囊、以及后半规管壶腹嵴。本文还根据作者的实践经验讨论了颞骨切片样品制备过程中有关样品固定、脱钙、颞骨整体染色、渗透和定向包埋等技术细节,期望能对从事内耳病理学研究的同道有所帮助。     

颈动脉狭窄支架成形术能替代内膜剥脱术吗?

颈动脉分叉处独特的血流动力学特征决定了该处是动脉粥样硬化最易发生的部位，造成管径的狭窄而导致脑组织远端血流动力学性梗死。另外，沿颈动脉球内侧壁的血流保持层流，有着很高的流速和很强的剪切力，而其外侧壁处血流的分离、停滞、湍流和复杂震荡的剪切力都可引起动脉粥样硬化性斑块的脱落。因此，颈动脉粥样硬化性狭窄是导致卒中发生的主要原因之一（占卒中发生的10％～20％），对其治疗是多年来受全球关注的热点。     

亚低温治疗重型颅脑损伤中脑组织氧分压的临床意义

目的观察亚低温治疗重型颅脑损伤过程中患者颅内压及脑组织氧分压的变化及临床意义。方法将80例急性重型颅脑损伤患者,随机分为亚低温治疗组(40例)和对照组(40例)。亚低温组入院后或术后立即给予亚低温治疗,保持肛温在32~34℃,持续24h~5d;对照组给予常规治疗。两组均观察颅内压(ICP)和脑组织氧分压(PbtO2)变化。结果亚低温组治疗后,ICP明显下降,PbtO2逐渐升高,与对照组相比有显著性差异。结论亚低温治疗能降低脑外伤后增高的ICP,提高PbtO2;伤后24h内持续PbtO2<5mmHg预示患者预后不良。     

冰冻切片在门诊活组织检查中的应用及体会

目的:探讨并总结冰冻切片应用于门诊活组织检查中的意义及体会.方法:746例门诊冰冻切片与石蜡切片诊断相对照,计算其诊断符合率.结果:门诊小标本冰冻切片与石蜡切片诊断的总符合率为98.7%,其中宫内膜诊刮、直肠黏膜、肢体软组织诊断符合率为100%,宫颈、淋巴结、乳腺、鼻咽黏膜、头面部其诊断符合率分别为99.5%、99.0%、96.6%、95.1%、95.0%.结论:冰冻切片应用于门诊活组织检查具有高度的可信性及可行性,值得基层病理科大力推广.     

介绍两则组织切片染色小技巧

在常规染色和特殊染色的操作过程中，由于日工作量的巨大．切片染色的种类繁多。常常会使切片或染色剂出现一系列意想不到的问题．如：经典的教学HE切片褪色；短期内特染所用的无色品红液失效等系列问题一直困扰着我们，根据我科多年来积累的经验．现将介绍一种HE切片褪色、无色品红液在短期内失效的补救方法。以供大家参考。     

一种新型的适用于延迟溶栓治疗的大鼠脑血栓模型的制作

目的 通过对血栓大小的改良,建立适用于延迟溶栓治疗的大鼠脑血栓模型.方法 将10个长度0.8～1.0 mm、宽度0.35 mm的白色血栓经颈内动脉分别注入栓塞脑动脉,形成局灶性脑血栓模型.接受脑血管栓塞的138只SD雄性大鼠被随机分为两大组,分别为单纯缺血组(n=68)和延迟溶栓治疗组(n=70).单纯缺血组不接受任何治疗;延迟溶栓治疗组分别在血栓注入3、6和9 h后,将10 mg/kg的rt-PA自股静脉缓慢注入.使用MRI评价梗死灶的位置、大小、栓塞后不同时间的相对脑血流量.末次MRI检查结束后,大鼠脑组织用4%甲醛固定,作病理检查.结果 共有131只大鼠在血栓注入后脑内形成明确梗死灶,模型成功率为95%,脑梗死仅位于同侧大脑半球占84.7%(111/131),局限于左侧顶叶皮质或(和)左侧基底节的占79.4%(104/131),局灶性脑梗死体积占同侧大脑半球(23.12±6.04)%;对侧大脑半球也同时出现梗死灶占14.5%(19/131).发生局灶性出血11只,大面积出血1只,出血率为9.2%(12/131),均发生在延迟溶栓组.单纯缺血组大鼠,在血栓注入后3、6和9 h的rCBV分别为(34.13±17.55)%、(40.67±25.91)%和(40.72±26.51)%,各组之间rCBV均无显著差异(分别为3 h和6 h,Z=-0.958,P=0.338,3 h比9 h,Z=-1.147,P=0.251).延迟溶栓后成活率高(24 h死亡13只;48 h死亡1只,溶栓后8 d和12 d各死亡1只).结论 改良后的大鼠脑血栓模型是可靠的可重复性的类似于人类大脑中动脉分支栓塞的脑血栓模型,适用于研究延迟溶栓治疗的大鼠脑血栓模型.     

血管性痴呆研究进展

随着世界人口老龄化的发展及脑卒中发病率的升高，血管性痴呆（VD）的发生率亦有所升高，正日益受到人们的重视。近年来，有关VD的研究取得较大进展，本主要对VD的危险因素，分类，诊断和防治等方面的研究简要做一综述。