LAMS抑制肝癌细胞增殖和促凝活性的实验研究

目的：观察LAMS抑制肝癌细胞增殖和促凝活性的效果。方法：比较LAMS处理的肝癌细胞生长曲线、AgNoRs含量变化;用一步法APTT测定LAMS拮抗肝癌细胞分泌物的促凝血作用。结果：LAMS处理后的肝癌细胞增殖受抑制、AgNoRs数量减少,LAMS能拮抗肝癌细胞分泌物对APTT的影响。结论：LAMS可有效地抑制肝癌细胞增殖和促凝活性。     

昆布多糖硫酸酯对化疗药物治疗肝癌细胞的增敏作用

目的：探讨LAMS对肝癌细胞化疗的增敏作用。方法：以免疫组化法测定用LAMS前后肝癌细胞Bcl—2基因蛋白含量，以MTT法分别测定5—Fu、MTX、MMC、ADM、CTX与LAMS联合及单独治疗肝癌细胞的IC50以及有效作用时间。结果：LAMS使肝癌细胞Bcl—2基因蛋白表达下降，并使肝癌细胞对5—Fu、MTX、MMC、ADM、CTX的敏感性增加，有效作用时间延长。结论：LAMS可有效地增加肝癌细胞对5—Fu、MTX、MMC、ADM、CTX的敏感性。     

昆布多糖对高脂血症大鼠降胆固醇作用及其机理的研究

高胆固醇血症是心脑血管疾病的主要危险因素,血清胆固醇(TC)水平与心脑血管疾病的发生率密切相关。在东方人中,血清TC每升高0 6mmol·L-1,冠心病发病的相对危险性升高34%。因此,有效的降胆固醇治疗能明显改善冠心病的自然病程。昆布Thalluslaminariae属海带科植物,含有丰富的多糖。本试验旨在研究昆布多糖(thalluscaminariaepolysaccharides ,TLP)对高脂血症的治疗效果及其机理。1　材料1 1　药物与试剂　昆布多糖的制备[1,2 ]....     

昆布多糖硫酸酯对荷瘤小鼠前列腺癌的抑瘤作用

目的:研究昆布多糖硫酸酯(LAMS)对移植前列腺癌细胞RM-1荷瘤小鼠的抑瘤作用。方法:C57小鼠接种前列腺癌RM-1细胞7 d后,按瘤体大小将40只小鼠均分为4组,分别为模型组(NS),环磷酰胺(CY)组(20 mg.kg-1),LAMS低、高剂量组(50,100 mg.kg-1)i,g,1次/d,连续14 d,停药次日称体质量并处死动物,剥取瘤块,摘取脾脏和胸腺,称质量,计算抑瘤率、脾指数和胸腺指数。结果:CY 20 mg.kg-1抑瘤率为40.3%,LAMS低、高剂量组抑瘤率分别为25.0%和33.8%,与模型组比较均有显著差异;CY在抑瘤的同时能显著抑制荷瘤小鼠的胸腺指数和脾指数,与模型组比较有显著性差异,LAMS对荷瘤小鼠的胸腺指数和脾指数无明显影响。结论:LAMS对移植前列腺癌RM-1的荷瘤小鼠有一定的抑瘤作用,LAMS在抑制肿瘤的同时不影响荷瘤鼠的免疫功能,无CY等化疗药物的常见副作用。     

昆布多糖对家兔血小板聚集和释放的影响

目的 观察昆布多糖对家兔血小板聚集和释放的影响.方法 采用体内试验,比浊法观察昆布多糖对血小板活化因子(PAF)诱导的家兔血小板聚集作用的影响,双抗夹心放射免疫法测定血浆血小板颗粒膜蛋白(GMP-140)含量.结果 昆布多糖能抑制血小板活化因子诱导的家兔血小板聚集,与生理盐水组相比有显著差异(P＜0.05或P＜0.01),并能降低血小板颗粒膜蛋白含量(P＜0.01).结论 昆布多糖具有抗血小板活化因子诱导的血小板聚集作用,能抑制血小板的聚集和释放.     

昆布多糖对肾纤维化大鼠肾组织内质网应激的保护作用

目的研究昆布多糖对肾纤维化大鼠肾组织内质网应激(ERS)分子伴侣GRP78、GRP94蛋白表达的影响。方法采用单侧输尿管梗阻(UUO)诱导大鼠肾间质纤维化的动物模型,将大鼠随机分为假手术组、模型组、依那普利组、昆布多糖高、中、低剂量组。术后第7天处死大鼠,收集血清测定肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平。采用Western免疫印迹法检测大鼠肾组织GRP78、GRP94的蛋白表达;采用HE、Masson染色检测肾小管损伤及肾间质纤维化程度。结果各治疗组与模型组比较大鼠肾小管间质损伤指数、肾间质纤维化程度、血清Scr、BUN水平及肾组织GRP78、GRP94蛋白表达有差异(P<0.05;P<0.01),昆布多糖与依那普利组比较,大鼠肾组织GRP78、GRP94表达升高(P<0.05),肾小管间质损伤及肾间质纤维化程度明显降低(P<0.05),肾功能Scr、BUN明显降低(P<0.05)。结论UUO早期昆布多糖可能通过上调ERS分子伴侣GRP78、GRP94蛋白表达,协助变性蛋白进行重新折叠、装配及跨膜转运,抑制未折叠蛋白反应,阻断ERS应激信号传导通路,从而减轻肾间质纤维化的发生和发展。     

昆布多糖对哮喘小鼠气道炎症及肺泡灌洗液相关细胞因子水平影响

目的探讨昆布多糖对哮喘小鼠气道炎症、肺泡灌洗液（BALF）内白细胞介素-12（IL-12）、白细胞介素-13（IL-13）及转化生长因子β1（TGF-β1）表达的影响。方法 40只SPF级昆明种小鼠随机分为对照组、哮喘模型组、布地奈德组、昆布多糖组,每组10只。哮喘模型组腹腔注射卵清蛋白（OVA）及雾化OVA吸入激发2周建立哮喘小鼠模型,昆布多糖和布地奈德治疗组每次OVA雾化吸入前分别给予昆布多糖灌胃（50mg/kg）、布地奈德雾化吸入（每只200μg）进行干预。苏木精-伊红染色观察各组哮喘小鼠肺组织病理学形态的变化,用酶联免疫吸附试验（ELISA）法测定小鼠BALF中IL-12、IL-13、TGF-β1的水平。结果哮喘模型组小鼠经2周过敏原激发后肺组织病理检查出现较典型的哮喘样改变;昆布多糖组和布地奈德组小鼠肺部组织病理改变较哮喘模型组减轻。与对照组比较,哮喘模型组小鼠BALF中IL-12水平明显降低,IL-13、TGF-β1表达水平明显增高（F=18.01～52.51,q=9.93～17.12,P〈0.05）;与哮喘模型组比较,昆布多糖组和布地奈德组小鼠BALF中IL-12水平明显升高,IL-13、TGF-β1表达明显降低,但后两者仍高于正常对照组（q=2.91～12.59,P〈0.05）;昆布多糖组与布地奈德组相比,各细胞因子水平差异均有显著性（q=3.06～3.54,P〈0.05）。结论昆布多糖可在一定程度上抑制哮喘小鼠BALF内IL-13、TGF-β1表达,升高IL-12表达,拮抗哮喘呼吸道炎症,为哮喘的治疗提供了新的方法。     

昆布多糖对大鼠心肌缺血/再灌注模型葡萄糖调节蛋白-78及半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶12蛋白表达含量的影响

目的研究昆布多糖(Lam)对大鼠心肌缺血/再灌注(MI/RI)模型中葡萄糖调节蛋白-78(GRP-78)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶12(Caspase 12)蛋白表达含量的影响,探讨其对大鼠心肌是否有保护作用。方法选取32只雄性SD大鼠,随机分为4组:假手术组(sham组)、MI/RI组、Lam低剂量组、Lam高剂量组。采用左冠状动脉结扎法制作大鼠MI/RI模型。酶联免疫吸附试验(ELISA)测定肌酸激酶同工酶MB(CK-MB),比色法测定髓过氧化物酶(MPO)的表达量。应用蛋白质免疫印迹(Western blotting)检测各组中大鼠心肌GRP-78、Caspase 12、B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)蛋白的表达情况。光镜下观察心肌组织的病理形态学改变。伊文思蓝(Evans)、氯化三苯基四氮唑红(TTC)双染色法测定心肌梗死面积。采用SPSS 21.0软件进行统计分析。结果与MI/RI组相比,低、高剂量组的CK-MB[(93.74±5.37)和(72.71±5.63)和(59.79±9.67)U/L]、MPO[(72.66±3.40)和(58.92±4.88)和(46.06±5.74)U/L]、GRP-78[(1.13±0.02)和(0.81±0.01)和(0.66±0.01)]、Caspase 12[(1.45±0.10)和(0.82±0.06)和(0.62±0.02)]表达显著减少(P0.01),Bcl-2[(1.01±0.04)和(1.19±1.10)和(1.41±0.02)]表达显著升高(P0.01)。与MI/RI组相比,Lam各处理组的心肌组织损伤有不同程度的减轻。与MI/RI组比较,Lam各处理组心肌梗死面积显著减少[(55.36±2.47)%和(46.63±2.10)%和(38.40±2.07)%,P0.05]。结论 Lam能减轻大鼠MI/RI,对MI/RI的心肌有保护作用。其机制可能是Lam抑制GRP-78的过度表达,减轻了由内质网应激介导细胞凋亡途径的激活,下调Caspase 12凋亡通路,增强Bcl-2的表达,从而抑制心肌细胞凋亡。     

昆布多糖对吸入性苯中毒的保护功能

目的探讨昆布多糖对吸入性苯中毒的保护功能,研究开发昆布多糖的潜在医药价值。方法选取50只6～8周龄健康昆明种小鼠,随机等分为5组,每组10只,雌雄各半。正常对照组与苯中毒模型组给予生理盐水0.4ml/d灌胃,低、中、高剂量组分别给予昆布多糖50 mg/kg、100 mg/kg、200 mg/kg灌胃,连续灌胃7 d后,除正常对照组不作处理外,其余4组均采用动式吸入式染毒,染毒剂量为2 376.49 mg/m3,每天1次,连续染毒21 d。称重后分别进行全血细胞计数、骨髓有核细胞计数、骨髓DNA含量的测定、微核试验及多能干细胞测定。结果预防性给予昆布多糖,能有效减少苯对小鼠外周血的抑制作用,防止苯中毒小鼠骨髓有核细胞数量和DNA含量的降低,有助于降低吸入性苯中毒小鼠微核形成,减少骨髓细胞DNA突变,使骨髓无效造血维持在较低水平。结论在该实验条件下,昆布多糖对吸入性苯中毒有一定的保护作用,但要把它作为一种新型低副作用的有效药物推广仍有待进一步探讨。     

Dectin-1在热处理光滑假丝酵母菌刺激大鼠气道上皮细胞中的作用及对IL-10和TNF-α表达的影响

目的探讨树突状细胞相关C型凝集素-1(Dectin-1)在热处理光滑假丝酵母菌刺激大鼠气道上皮细胞(RTECs)中的作用及对IL-10和TNF-α表达的影响。方法将体外培养的RTECs随机分为3组:对照组(RTECs+无菌生理盐水)、真菌刺激组(RTECs+热处理光滑假丝酵母菌)、抑制剂干预组(RTECs+昆布多糖+热处理光滑假丝酵母菌),分别孵育0、2、4、6 h后终止,MTT法检测细胞存活率,Western Blot法检测Dectin-1表达,ELISA法检测IL-10和TNF-α的表达。结果热处理光滑假丝酵母菌破坏细胞结构,降低细胞存活率。在培养开始时(0h),3组RTECs细胞存活率以及Dectin-1、IL-10、TNF-α表达水平比较,差异均无统计学意义(均P0.05)。培养2、4、6 h后,真菌刺激组、抑制剂干预组Dectin-1、IL-10、TNF-α表达水平均高于对照组,抑制剂干预组Dectin-1、IL-10、TNF-α表达水平均低于真菌刺激组(均P0.05)。除抑制剂干预组0h与2 h IL-10表达量比较,差异无统计学意义之外,真菌刺激组和抑制剂干预组组内不同时间段Dectin-1、IL-10、TNF-α表达水平比较,差异均有统计学意义(均P0.05)。结论 Dectin-1是RTECs识别热处理光滑假丝酵母菌的重要受体,并诱导其释放IL-10和TNF-α,介导炎症反应的发生。