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1.
蝎蜂毒肽对大鼠纤溶系统作用初探 总被引:14,自引:0,他引:14
本研究采用大鼠肢体血管灌流和整体给药两种模型,观察蝎蜂毒(SBP)对血管理灌流液内纤溶酶原激活物(PA)活性、血浆优球蛋白纤溶性(EFA)和纤溶酶(PL)活性的影响。结果说明,SBP有明显激活纤溶系统作用;其机制可能涉及血管内皮细胞释放PA活性增加,进一步促使纤溶酶原活化为PL增多的途径。 相似文献
2.
蜂毒肽基因在大肠杆菌中的表达、纯化及初步鉴定 总被引:2,自引:1,他引:1
目的通过pGEX-2T原核表达载体表达蜂毒肽。方法将人工合成整合了肠激酶作用位点的蜂毒肽基因,插入载体pGEX-2T,构建蜂毒肽与谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合表达载体pGEX-MEL。重组质粒转化E.coliBL21(DE3)诱导表达,超声破碎菌体,SDS-PAGE检测蛋白表达情况,取超声上清,通过GST亲和色谱系统纯化目的融合蛋白,酶切通过溶血实验检测其溶血活性。结果SDS-PAGE结果显示,表达了相对分子质量约为30 000的融合蛋白,目的融合蛋白量约占菌体总蛋白量的29.5%。经Western blot鉴定,表达的GST融合蛋白与GST抗体有强烈的交叉反应,说明成功表达了目的融合蛋白。取超声上清,亲和色谱纯化融合蛋白,纯度为95%。肠激酶切割得到了人工天然蜂毒肽,测定蜂毒肽回收率为80%。结论通过原核表达系统成功表达蜂毒肽,具有和天然蜂毒相同的溶血活性。 相似文献
3.
将抗菌肽之一的蜂毒溶血肽(Melittin)基因序列定向克隆到表达载体pESP-2中,构建GST-Melittin融合蛋白。利用载体上严格受硫胺素浓度调控的启动子Pnmtl,采用先扩大培养后诱导表达的两步培养法,实现了融合蛋白在裂殖酵母Schizosaccharomyces Pombe中的异源表达。然后通过GST亲和层析法一步纯化得到融合肽。研究中1L培养液收集到约5g鲜活酵母菌,纯化得到400μg融合蛋白,融合蛋白经SDS-PAGE和Western blot验证,表明蜂毒肽融合蛋白已在裂殖酵母中高效的表达,并可以通过GST亲和层析法得到有效纯化。初步的活性实验证明所获得Melittin蛋白对Escherichia Coli DH5α菌种有良好的抑菌效果。 相似文献
4.
目的分析蜂蜇伤战士与正常人血清中蛋白质图谱之间表达差异。方法分别收集来源于解放军181医院于2008年10月—2010年2月收集的11例蜂蜇伤国防战士标本和8例健康人的血清标本进行双向凝胶电泳(2-DE)检测。通过基质辅助激光解析飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)分析鉴定蜂蜇伤患者的血清蛋白质中存在显著差异的蛋白质点。结果在蜂蜇伤战士的血清中存在5个新增蛋白质点,3个蛋白点上调,7个蛋白点下调,其中包括KRT10角蛋白Ⅰ型、KRT1角蛋白Ⅱ型、触珠蛋白相关蛋白、触珠蛋白HP、HPR蛋白、α2-巨球蛋白、β血影蛋白brain1。结论采用固相pH梯度2-DE分离鉴定血清蛋质组能够获得很好的实验重复性。蜂蜇伤患者与正常人血清存在差异表达蛋白,为进一步研究蜂蜇伤相关生物标记提供理论基础及指导。 相似文献
5.
在未使用复律治疗时,永久性房颤转复为窦性心律的文献报道甚少。作者报道1例经常规复律治疗无效的永久性房颤,改为蜜蜂蜇刺腹部皮肤后房颤转复为窦性心律,效果尚佳。 相似文献
6.
目的 探讨蜂毒素对人肝癌HepG-2细胞株裸鼠移植瘤的抑制作用.方法 建立人肝癌HepG-2细胞裸鼠皮下移植瘤模型,随机分为模型组、蜂毒素组(1、2、4 mg/kg)和氟尿嘧啶 (5-FU,2 mg/kg) 组,各组腹腔注射给药10 d,用药结束后隔天处死动物.观察蜂毒素腹腔注射对人肝癌细胞在裸鼠体内生长的的影响,计算... 相似文献
7.
8.
《中国老年学杂志》2017,(13)
目的探究蜂毒肽对大鼠退行性骨关节病软骨细胞核因子(NF)-κB信号通路的影响。方法成功建立大鼠骨关节炎模型,分别于关节腔注射蜂毒肽,并体外分离慢性骨关节炎软骨细胞,采用体外增殖CCK8实验及实时定量聚合酶链反应(PCR),观察蜂毒肽对软骨细胞的保护作用;采用Western印迹法分别检测了不同剂量下蜂毒肽影响白细胞介素(IL)-1诱导NF-κB信号通路的激活情况。结果成功建立大鼠膝关节来源的体外软骨细胞培养体系后,经细胞增殖CCK8实验结果发现,与慢性骨关节炎组相比,慢性骨关节炎+蜂毒肽组膝关节软骨细胞的增殖能力最强;经实时定量PCR检测成骨关键分子[成骨特异转录因子核心结合因子(Runx)2,碱性磷酸酶(ALP),成骨相关转录因子(Osterox)]的表达结果显示,相比于慢性骨关节炎组,慢性骨关节炎+蜂毒肽组早期胚胎发育相关基因(Sox)9、CCAAT增强子结合蛋白(CEBP)2、聚集蛋白聚糖(Aggrecan)因子表达均上调。经Western印迹检测发现,随蜂毒肽浓度的逐渐增高,IL-1β诱导核因子(NF)-κB及I-κB的表达条带颜色逐渐递减,且随时间延长,降低程度逐渐明显。结论蜂毒肽通过抑制NF-κB信号转导途径的激活以起到骨关节炎患者关节软骨保护。 相似文献
9.
目的:研究蜂毒肽(Mel)对离体豚鼠乳头状肌的影响。方法:观察Mel对豚鼠乳头状肌基本生理特性的影响,并应用标准玻璃微电极技术记录快反应动作电位(FAP)和慢反应动作电位(SAP)。结果:Mel(0.5,3μmol/L)显著增强乳头状肌收缩力,Mel(5μmol/L)在增强收缩力之前可出现短暂的抑制作用,Mel(0.5,3.5μmol/L)可显著缩短功能性不应期,在一定浓度下(Mel3,5μmol/L)可升高肾上腺素诱发的自律性,使时间-兴奋曲线上移(Mel3μmol/L)。Mel(0.3,5μmol/L)可显著缩短FAP的动作电位时程(APD),减小动作电位幅度(APA)和静息电位(RP)。Mel0.8μmol/L可减小SAP的APA和RP,仅缩短APD20和APD50,对APD90无影响。结论:Mel增强豚鼠乳头状肌收缩性和自律性,缩短不应期,降低兴奋性,缩短APD,减小APA和RP。 相似文献
10.