蜂毒肽通过转化生长因子β/SMAD信号通路调控非小细胞肺癌的上皮-间质转化进程*

目的 探讨蜂毒肽对非小细胞肺癌转化生长因子β（TGF-β）/SMAD信号通路的调控作用及对TGF-β1诱导的上皮-间质转化（EMT）进程的影响。方法 通过外源性TGF-β1刺激构建非小细胞肺癌A549细胞EMT模型，将细胞分为对照组、TGF-β1组（加入2 μg/L TGF-β1）、蜂毒肽组（加入2.5 mg/L蜂毒肽）、蜂毒肽+TGF-β1组（加入2 μg/L TGF-β1和2.5 mg/L蜂毒肽）。采用免疫印迹及逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）实验检测各组细胞EMT标志蛋白钙黏附蛋白E、N-钙黏蛋白、波形蛋白及mRNA表达情况；同时检测各组细胞中Smad2、p-Smad2蛋白表达情况，分析蜂毒肽对非小细胞肺癌TGF-β/SMAD信号通路的影响。采用免疫荧光实验检测对照组及蜂毒肽组细胞中TGF-βⅠ受体及TGF-βⅡ受体表达情况，同时采用Transwell实验检测两组细胞迁移、侵袭能力。结果 ①与对照组相比，TGF-β1组钙黏附蛋白E mRNA及蛋白表达水平明显降低，N-钙黏蛋白mRNA及蛋白与波形蛋白mRNA及蛋白表达水平明显升高（均P＜0.05）。蜂毒肽+ TGF-β1组钙黏附蛋白EmRNA及蛋白表达水平明显优于TGF-β1组，且N-钙黏蛋白mRNA、蛋白以及波形蛋白mRNA、蛋白表达水平低于TGF-β1组（均P＜0.05）。②对照组和蜂毒肽组细胞中TGF-βⅠ受体表达比较，差异无统计学意义（P＞0.05），蜂毒肽组中TGF-βⅡ受体含量明显少于对照组。③Transwell实验结果显示，TGF-β1组细胞迁移、侵袭能力明显优于对照组，蜂毒肽+TGF-β1组细胞迁移、侵袭能力明显劣于TGF-β1组细胞（均P＜0.05）。结论 蜂毒肽可通过抑制TGF-β/SMAD信号通路抑制Smad2磷酸化，下调TGF-βⅡ受体分布，从而抑制肿瘤细胞的侵袭、迁移，抑制TGF-β1诱导的肺癌细胞EMT进程。