自身免疫性胰腺炎患者血清外泌体中CD69表达升高及意义

目的探究自身免疫性胰腺炎(AIP)患者血清外泌体中CD69的表达情况,初步探讨其对疾病病理过程的影响。方法收集2012年10月~2016年12月来长海医院就诊的35例AIP患者血清和同期就诊的35例健康个体血清,分别作为实验组和对照组。以ELISA法检测血清中的细胞因子浓度,以磁珠结合抗体的方法在流式细胞仪中检测血清中外泌体表面分子的表达情况,两组之间计量资料的比较采取两独立样本t检验,两变量之间的相关性以Pearson系数表示。结果流式细胞仪分析显示,实验组血清中外泌体CD69表达水平高于对照组(85.76±19.45vs 17.01±5.89)%,差异有统计学意义(t=20.01,P0.0001);实验组中CD69+的外泌体所占百分比与血清中IL-4,IFN-γ,TGF-β表达量呈正比(r=0.456,0.678,0.548,均P0.05),CD69-的外泌体所占百分比与血清中IL-4,IFN-γ,IL-10,TGF-β呈反比(r=-0.589,-0.399,-0.784,-0.657,均P0.05)。结论 CD69在外泌体的表达可能通过影响CD4+T细胞功能参与了AIP病程,是该病潜在的监测指标和治疗靶点。     

细胞因子信号转导抑制因子（SOCS）与免疫调节

细胞因子信号转导抑制因子（suppressor of cytokine signaling,SOCS）是一类可由多种细胞因子诱导产生,又能通过多种途径对细胞因子的信号转导进行负向调节的蛋白质分子。众多研究发现SOCS蛋白家族是一个非常重要的可以负向调节 JAK／STAT信号通路的分子家族。本文将着重阐述介绍SOCS家族在炎症和自身免疫性疾病中的作用。     

热灭活白念珠菌刺激PBMC对颗粒溶素和TNF-α表达的影响

目的:研究热灭活白念珠菌刺激健康个体外周血单个核细胞对颗粒溶素和TNF-α表达的影响。方法:在热灭活白念珠菌刺激的情况下,采用ELISA和RT-PCR检测颗粒溶素的表达;采用SrCl2以及siRNA下调PBMC内颗粒溶素的表达,或者加入外源性颗粒溶素,观察TNF-α在mRNA和蛋白水平表达的变化。结果:热灭活白念珠菌刺激可以诱导PBMC合成颗粒溶素和TNF-α,采用SrCl2或siRNA下调颗粒溶素的表达均会引起TNF-α在mRNA和蛋白水平表达的下调,而加入外源性的颗粒溶素可以促进TNF-α的表达。结论:热灭活白念珠菌刺激PBMC可以引起颗粒溶素和TNF-α的表达,且颗粒溶素可能是促进TNF-α表达的因素。     

隐球菌脑膜炎患者外周血单个核细胞PILRα升高及意义

目的探究Ⅱ型成对免疫球蛋白样受体(paired immunogobin-like type 2ceceptor alpha,PILRα)在隐球菌脑膜炎患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中的表达情况,初步讨论其临床意义。方法收集2014年5月~2016年11月到长海医院就诊的30例隐球菌脑膜炎患者外周血作为实验组,诊断标准为脑脊液染色新生隐球菌阳性或培养阳性,同期体检的30例健康人外周血作为对照组。以密度梯度离心法获得标本PBMCs,以PCR检测PBMCs中PILRα的基因表达情况,以ELISA法检测血浆中PILRα及相关细胞因子的表达情况。以独立样本t检验进行两组间变量的比较,以Pearson相关系数表示两变量间的相关性。结果实验组与对照组PBMCs中PILRα相对mRNA水平为2.49±0.74vs 1.77±0.69(t=3.898,P=0.000 3),血浆中PILRα的蛋白表达水平为33.81±10.21ng/ml vs 20.01±6.74ng/ml,差异均具有统计学意义(t=6.178,P0.000 1)。实验组血浆中PILRα的蛋白表达量与IL-1,IL-6和IFN-γ呈正比(r=0.456,0.521,0.467,P0.05),差异具有统计学意义。结论 PILRα可能参与了隐球菌脑膜炎的免疫炎症过程,是该病潜在的监测标志物和治疗靶点。     

原发性胆汁性肝硬化患者外周血单个核细胞中Tim-3 mRNA表达增高及其意义

为研究Tim-3是否参与了原发性胆汁性肝硬化(PBC)的发病机制,我们采用实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测了38例PBC患者及30例健康者外周血单个核细胞(PBMC)中Tim-3mRNA的相对表达量,并分析Tim-3mRNA表达与PBC患者Mayo危险评分和碱性磷酸酶(ALP)之间的关系。结果表明,PBC患者外周血PBMC中Tim-3mRNA表达较健康对照组明显增高(P<0.01),且与Mayo危险评分呈正相关(r2=0.31,P<0.01),与血清ALP水平呈负相关关系(r2=0.37,P<0.01)。本研究表明Tim-3可能参与了PBC的发病机制,同时还是PBC的潜在标志物。     

血小板平均体积对急性心肌梗死患者住院期间死亡事件的预测价值

目的评价初诊时的血小板平均体积（MPV）对急性心肌梗死（AMI）患者发生住院期间死亡事件的预测价值。方法回顾性地分析了415例AMI患者的住院病历,从中提取出患者初诊时临床特征的数据（包括胸痛发生时间及是否患有高血压、糖尿病和高血脂等）和实验室特征数据：心肌肌钙蛋白I（cTnI）水平、肌酐浓度和血小板计数、MPV。分析MPV与患者的临床和实验室特征之间的关系。采用受试者工作特征曲线（ROC）法评价MPV对患者发生住院期间死亡事件的总体预测价值。采用多元Logistic回归分析MPV与AMI患者发生住院期间死亡事件的关系。结果随着MPV的增加,AMI患者发生住院期间死亡事件的比例增高。MPV预测AMI患者发生住院期问死亡价值的曲线下面积（AUC）（95％可信区间）为0．77（0．72-0．82）。当将界值设定为12．55n时,MPV预测AMI患者发生住院期间死亡时间的敏感度（95％可信区间）为0．59（0．49-0．69）,特异度（95％可信区间）为0．85（0．81-0．89）。在校正了cTnI、胸痛发生时间、肌酐和年龄以后,MPV〉12．55fl仍然与所有AMI患者、STEMI和NSTEMI患者发生住院期间死亡事件相关,优势比（95％CI）分别为10．87（5．08-23．25）、26．19（7．36-93．17）和5．35（1．80．15．92）。结论AMI患者就诊时的MPV值可以作为预测其发生住院期间死亡事件的指标,MPV〉12．55n是AMI患者发生住院期间发生死亡事件的独立危险因子。     

热灭活白念珠菌通过Dectin-1诱导外周血单个核细胞表达IL-12和IFN-γ

为研究Dectin-1在热灭活白念珠菌刺激外周血单个核细胞(PBMC)免疫应答中的作用。我们用不同浓度昆布多糖(Dectin-1封闭剂)与PBMC共培养1 h后,再用热灭活白念珠菌刺激PBMC 4 d;同时用不同剂量的Dectin-1激活剂酵母聚糖(zymosan)刺激PBMC 4 d,收集培养液上清,经ELISA检测IL-12和IFN-γ水平。结果发现,昆布多糖可以部分抑制热灭活白念珠菌刺激PBMC合成IL-12和IFN-γ的能力,酵母聚糖可以诱导PBMC合成IL-12和IFN-γ。因此,Dectin-1是介导热灭活白念珠菌诱导PBMC产生IL-12和IFN-γ的受体之一。     

细胞因子信号转导抑制因子(SOCS)与免疫调节

细胞因子信号转导抑制因子(suppressor of cytokine signaling,SOCS)是一类可由多种细胞因子诱导产生,又能通过多种途径对细胞因子的信号转导进行负向调节的蛋白质分子。众多研究发现SOCS蛋白家族是一个非常重要的可以负向调节JAK/STAT信号通路的分子家族。本文将着重阐述介绍SOCS家族在炎症和自身免疫性疾病中的作用。     

表面增强拉曼光谱技术检测隐球菌脑膜炎患者血清中CD93~+外泌体及其意义

目的利用表面增强拉曼光谱技术(SERS)检测隐球菌脑膜炎患者血清中CD93~+外泌体,以优化该病的监测手段。方法收集2013年12月~2017年3月在上海长海医院和长征医院确诊的38例隐球菌脑膜炎患者的血清作为实验组,同期体检的38例健康者血清作为对照组。用ELISA法检测血清中的IFN-γ,TNF-α的蛋白表达水平;用超高速离心法分离血清外泌体;用磁珠连接抗体法捕获CD93~+外泌体并进行标记,于拉曼光谱仪下检测样本的SERS信号。实验组与对照组计量资料间的比较采用两独立样本的t检验,用Origin75软件对两连续变量进行线性拟合,两变量之间的相关性以Pearson系数表示。结果 SERS检测隐球菌脑膜炎患者血清中外泌体最低浓度为5 500个/ml,最低量为110个/ml,log(SERS信号)与log(外泌体浓度)进行线性拟合的R值为0.995 96,P0.0001;SERS检测实验组与对照组血清外泌体CD93的信号值取对数分别为2.75±0.59vs 2.47±0.15,差异具有统计学意义(t=2.835,P=0.005 9);SERS检测实验组血清CD93~+外泌体得到的数据与ELISA法检测实验组血清中IFN-γ,TNF-α的结果呈正相关,差异有统计学意义(r=0.389,0.478,P0.05)。结论该方法可初步提高隐球菌脑膜炎患者血清标本检测的灵敏度,为该病监测提供新的技术思路。     

IL-27介导的炎症反应在原发性胆汁性肝硬化中的作用

目的 探讨IL-27介导的免疫炎症性反应在原发性胆汁性肝硬化(primary biliary cirrhosis,PBC)发病中的作用.方法 荧光定量PCR、流式细胞术、酶联免疫吸附试验(ELISA)、免疫组化等方法检测PBC患者IL-27的表达;生化常规测定PBC患者和健康对照者的谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、谷丙转氨酶(ALT)、总胆红素(TBIL)、谷氨酰基转移酶(GGT)水平,分析IL-27与它们之间的相关性.结果 PBC患者外周血IL-27/P28亚基mRNA的表达显著高于慢性乙型肝炎组和健康对照组(P＜0.05),IL-27/EBI3 mRNA未有明显改变;免疫组化结果显示IL-27在PBC患者肝脏呈阳性表达;流式细胞仪检测结果表明IL-27在PBC患者的CD4+T细胞表达率(72.40%±6.22%)较慢性乙型肝炎组(59.40%±7.03%,P＜0.01)和健康对照组(1.70%±0.55%,P＜0.01)明显升高,而IL-27在各研究组的CD8+T细胞、单核细胞、B细胞中的表达无明显变化;PBC患者外周血血清IL-27的表达[(126.25±36.00)pg/ml]显著高于慢性乙型肝炎组[(51.81±23.30)pg/ml,P＜0.01)和健康对照组[(34.19±9.70)pg/ml,P＜0.01],PBC患者IL-27的血清蛋白表达水平与GGT(r=0.554,P＜0.01)和TBIL(r=0.559,P＜0.01)水平呈显著正相关,与ALT、AST和ALP无相关性.结论 IL-27在PBC中表达升高,与PBC的发生发展存在一定的相关性,可能参与了PBC的发病机制.